北京某医院感染性腹泻患者致泻性大肠埃希菌毒力和耐药特征分析

目的明确本院感染性腹泻患者致泻性大肠埃希菌毒力和耐药特征。方法采用VITEK MS微生物质谱检测系统初步鉴定,多重实时荧光PCR检测毒力基因,对本院感染性腹泻患者临床分离的致泻性大肠埃希菌(Diarrheagenic Escherichia coli,DEC)进行5种型别鉴定。微量肉汤稀释法和E-test法药敏试验检测DEC菌株的耐药表型特征。二代测序及生物信息学分析其耐药分子特征。采用Fisher确切概率法进行统计学分析。结果本院DEC检出率为11.9%,其中EAEC占比37.5%,非典型EPEC占比34.38%,ETEC占比25.0%,EIEC占比3.12%,未检出EHEC菌株。32株DEC对氨苄西林、四环素、甲氨苄啶/磺胺异恶唑耐药率最高,分别为53.12%、43.75%和37.5%。ESBLs(+)株占比18.75%,其多重耐药菌株检出率为83.83%,显著高于ESBLs(-)菌株,差异有统计学意义(P=0.042)。32株DEC共有25个ST型,优势基因型为ST10共4株(12.5%),ST28、ST31和ST3153各2株(各占比6.25%),其他21个型别各1株菌(各占比3.13%)。EAEC中检出1株携带bla_(NDM-1)的耐碳青霉烯类菌株。结论我院感染性腹泻患者的DEC以aggR、pic、astA、eae 4种毒力基因较为常见,以EAEC、EPEC为主要型别,基因型别呈高度多态性,检出多重耐药菌株。

多黏菌素与美罗培南联合应用对碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌多黏菌素异质性耐药的体外抗菌活性分析

目的评价多黏菌素与美罗培南的联合使用对碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌多黏菌素异质性耐药的体外抗菌活性。方法收集2021年1月至12月首都医科大学附属北京友谊医院临床分离碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)381株。采用微量肉汤稀释法检测多黏菌素及美罗培南的最低抑菌浓度(MIC)。采用群体谱分析方法(PAPs)分析敏感菌株对多黏菌素的异质性,通过PCR扩增筛选耐药基因,根据结果分析部分菌株的时间-杀菌曲线,评价联合用药抑菌效果。结果381株肺炎克雷伯菌经过微量肉汤稀释法检测,未见多黏菌素耐药菌株,全部菌株对美罗培南均耐药。PAPs分析显示对多黏菌素异质性耐药的菌株比例为95%(38/40)。根据CRKP耐药基因的检测筛选3株携带不同耐药基因菌株进行的时间-杀菌曲线分析结果显示,与单独用药相比,低浓度联合用药即可在短时间内起到杀菌作用。结论碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌对多黏菌素的异质性耐药率较高。多黏菌素与美罗培南的联合应用在体外可以对异质性耐药CRKP表现出很好的杀菌活性。

肠球菌致病机制的研究进展

肠球菌属(Enterococcus)已经成为医院感染的常见条件致病菌,通常引起尿道感染、腹腔感染、伤口感染、菌血症等,主要见于免疫力低下或过量使用抗生素的患者[1],也可导致败血症、心内膜炎等危及生命,死亡率达21.0%～27.5%[2].在肠球菌感染临床分离菌株中,粪肠球菌最为常见,外周留置导管是主要的危险因素.由于肠球菌具有天然耐药和获得性耐药的特性,使所致医院感染成为临床治疗棘手的问题之一,越来越受到人们的重视.对肠球菌致病机理的研究多集中于粪肠球菌,有关屎肠球菌的研究相对较少,笔者就肠球菌致病机理的研究进展进行综述.

混凝-超滤处理含油废水试验研究

采用混凝-超滤组合工艺处理含油废水。试验结果表明,原水经混凝预处理后生成微絮体,改善了分离性能,对膜污染起了重要的缓解作用,可延长反冲洗周期,使其保持较高的稳定通量,长时间运行。运行过程中膜通量下降幅度较小(仅为33%);随着超滤时间的延长,COD和油的去除率较高,均可保持在90%～95%的较高水平。

非药物避孕方式对健康育龄期妇女阴道乳酸杆菌的影响

目的明确非药物避孕方式对中国健康育龄期妇女阴道乳酸杆菌（LB）的影响。方法纳入164名18～45岁中国健康育龄期妇女进行横断面研究，根据受试者采用非药物避孕方式的不同分为安全套组、宫内节育器组和安全期组。采集受试对象月经第21～22天的阴道拭子，进行阴道分泌物涂片Nugent评分、阴道LB定量培养并检测过氧化氢的产生。应用卡方检验和ANOVA统计方法分析各组间NugentO～3分占比、产过氧化氢LB培养阳性率和菌落计数的差异。结果安全套组93．1％的阴道拭子Nugent评分为0～3分，高于宫内节育器组（75．4％），二者差异有统计学意义（P=0．005）。安全套组产过氧化氢I。B的培养阳性率（82．3％）高于宫内节育器组（68．2％），二者差异有统计学意义（P=0．016）。安全套组产过氧化氢LB菌落计数对数值（x±s）为（7．81±0．14），高于宫内节育器组（6．54±0．14），二者差异有统计学意义（P=0．000）。结论坚持正确使用安全套有利于产过氧化氢LB在阴道内的定植，从而减少细菌性阴道病的发生和HIV感染，对保护健康育龄期妇女生殖健康具有积极意义。

阴道正常菌群构成及其影响因素的研究进展

人体的体表与开放腔道内分布着大量与人体共生的正常菌群,它们与宿主、环境之间构成了相互制约、相互协调、动态的微生态平衡,不仅有助于人体消化、吸收营养物质、能量供应、脂肪代谢、免疫调节和生物拮抗,而且在人体抵御致病菌或条件致病菌等方面也发挥着重要的作用。19世纪晚期,＂微生物之父＂安东·范·列文虎克在观察牙齿上的生物膜时首次发现了口腔菌群的存在,从此展开了以细菌培养为基础的传统微生态学研究。

MALDI-TOF MS结合短时培养法在阳性血培养病原菌鉴定中的临床应用

目的评估基质辅助激光电离解析-飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)结合短时培养法在阳性血培养病原菌鉴定中的应用价值。方法前瞻性收集北京友谊医院2017年3月至10月的162例单一病原菌血培养阳性标本,取3 ml培养液离心后刮取分离胶表层浓集的病原菌,血平板培养1~4 h,直接用菌膜涂靶板,MALDI-TOF MS菌株鉴定,同时与常规培养后再鉴定的传统方法比较菌种鉴定结果的准确性。结果共收集革兰阳性细菌73株,革兰阴性细菌89株。与传统培养法相比,MALDI-TOF MS结合短时培养法的鉴定时间由1~2 d缩短至1~4 h,革兰阳性细菌和革兰阴性细菌的鉴定准确率分别为87.7%和98.9%。结论用MALDI-TOF MS结合短时培养法可以大大缩短阳性血培养病原菌鉴定时间,尤其适用于革兰阴性杆菌所致的血流感染。该方法操作简单,结果可靠,有良好的临床应用价值。

腹腔感染耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的毒力特征

目的研究耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant klebsiella pneumoniae,CRKP)的毒力特征。方法收集首都医科大学附属北京友谊医院侵袭性腹腔感染部位分离的CRKP菌株38株,采用PCR方法检测碳青霉烯酶耐药基因bla KPC-2、bla NDM-1、bla IMP-4、bla VIM-1和bla OXA-48,检测毒力基因rmpA2和铁载体iucA基因,采用多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)方法进行菌株的基因分型,采用结晶紫法、铬天青S法分别定量检测生物膜形成能力和铁载体生成能力。结果38株CRKP中,ST11为主要克隆株,占比78.1%(25/38)。88.0%(22/25)的ST11型菌株中只检测到bla KPC-2,高于非ST11组,两组之间差异有统计学意义。60.0%(15/25)的ST11型菌株同时携带rmpA2和iucA,高于非ST11组,两组之间差异无统计学意义。生物膜形成能力在非ST11组和KPC+rmpA2+iucA组较弱,差异无统计学意义。ST11组铁载体生成能力高于非ST11组、KPC+rmpA2+iucA组高于KPC组,两组之间的差异均有统计学意义。结论同时携带KPC-2型耐药基因、rmpA2和iucA毒力基因的ST11型CRKP菌株的出现,需要采取更为严格的医院感染控制措施防止播散。

加强微生物检验医师与临床医师的有效沟通

随着新发病原体的不断涌现，感染性疾病在世界各国致死性病因中地位的不断攀升，以及多重耐药细菌和医院感染暴发流行事件的不断出现，临床微生物检验在临床医疗工作中的作用日益重要。不仅要准确、快速地检测或发现病原微生物，

肠球菌表面蛋白基因与生物膜形成关系的探讨

目的探讨肠球菌表面蛋白(esp)基因与生物膜形成之间的关系,以利临床采取预防措施和选药治疗。方法应用PCR方法检测145株临床分离肠球菌中esp的携带率,并用斑点杂交确证。用96孔聚苯乙烯板进行生物膜形成试验。结果96株粪肠球菌和49株屎肠球菌中esp的检出率分别为34.4%和36.7%;生物膜形成率分别为93.8%和91.8%;esp阳性的肠球菌生物膜形成率为100%。结论肠球菌普遍具有形成生物膜的能力,但生物膜的形成并不仅限于携带esp的肠球菌。

健康成人与住院病人肠球菌致病基因及表型和耐药性的比较研究

目的 调查健康成人与住院病人分离肠球菌致病基因、致病表型和耐药性的携带情况,以了解肠球菌在医院感染中的意义.方法 应用PCR检测肠球菌cylA、gelE、esp、ace、agg和efaA等6种致病基因,并用斑点杂交和基因测序确证.应用β溶血试验、明胶溶解和生物膜形成检测3种致病表型.应用琼脂稀释法检测肠球菌对高浓度庆大霉素、高浓度链霉素、万古霉素和氨苄西林的耐药性.结果 健康成人和住院病人粪肠球菌中均检测到6种致病基因,前者检出率7.4～40.7%,后者检出率29.0～80.6%;屎肠球菌健康成人分离菌株检测出3种致病基因,检出率5.6～16.7%;住院病人分离菌株检测出4种致病基因,检出率21.1～57.9%.健康成人和住院病人肠球菌β溶血、明胶溶解和生物膜形成的检出率分别为26.7%,54.0%;13.3%,40.0%;97.8%,90.0%.健康成人和住院病人屎肠球菌耐药率分别为22.2～94.4%,68.4～100.0%;粪肠球菌分别为3.7～33.3%,29.0～64.5%.结论 健康成人分离株较住院病人分离株的致病性弱,屎肠球菌比粪肠球菌的耐药性高.

降钙素原在血流感染中的临床价值

目的探讨降钙素原(procalcitonin,PCT)在血流感染中的临床价值。方法回顾性分析2015年1月至2016年9月血流感染患者的临床资料、血培养和PCT结果,参照血培养结果评估PCT的临床意义。结果收集8 710例疑似血流感染患者资料,与阴性血培养结果相比,PCT在革兰阴性细菌血流感染中明显升高(7.36 ng/ml,95%CI4.69～8.82 ng/ml,P<0.01),在革兰阳性细菌(4.77 ng/ml,95%CI 3.35～6.04 ng/ml,P<0.01)和真菌血流感染(1.30 ng/ml,95%CI 0.79～2.98 ng/ml,P<0.01)的患者中稍高,但污染菌的则不变。PCT对血流感染的诊断临界值为1.1 ng/ml,特异性、灵敏度、阳性预测值和阴性预测值分别为81.0%,79.0%,25.8%和93.1%。结论 PCT能快速区分血流感染与非血流感染,具有很好的临床诊断价值。

PAN中空纤维超滤膜污染与膜阻力测定

对膜污染问题进行了研究,指出浓差极化、滤饼层形成和膜孔堵塞是造成膜污染的主要原因。同时测定了PAN膜阻力,试验结果表明,PAN膜超滤过程中主要阻力来源为膜孔吸附、凝胶层及浓差极化等引起的膜污染阻力,占总阻力的71.61%。膜自身阻力和不可逆阻力分别占总阻力的28.39%和11.76%,所占比例较小,有利于实际应用。

Cide蛋白质与糖脂代谢相关性的研究进展

细胞内糖脂代谢的稳态调控是维持细胞或机体基本生命活动的基础,糖脂代谢紊乱与糖尿病、肥胖、肝脂肪变性、心血管疾病以及癌症的发生和发展密切相关。1998年,细胞死亡诱导的DNA片段化因子-α样效应子（Cide）被首次发现,

体验式教学法在临床微生物教学中的应用

选取临床微生物教学中的难点和要点,以感染性疾病和临床微生物学理论知识为基础,师生一起构建真实或模拟场景,使学生直面具体的临床问题,亲历过程并在过程中体验和感受临床微生物学科特点。首先,课前通过设计体验式场景主线,夯实学生跨学科理论基础。其次,课程中引导学生主动思考、系统分析和判断微生物检验的临床意义,将临床表现特点与实验室检验结果联系起来,对检验结果进行正确的解读和应用,提高综合分析、解决问题的能力。最后,教师对整个体验式教学过程进行点评,不仅使学生正确审视自己的个人能力,还着重强调个人融入团队、团结协作的重要性,为日后投入临床工作做好准备。

厌氧水解-CASS工艺在抗生素废水处理中的应用

介绍了厌氧水解-CASS工艺处理抗生素废水的工程实例,调试运行结果表明,系统抗冲击负荷能力强,运行稳定,处理效果较好,出水达到《污水综合排放标准》GB8978-1996二级标准。

混凝处理抗生素废水研究

采用混凝法对抗生素废水进行预处理。试验结果表明:混凝沉淀方法去除混合液中的有机物及部分非溶解态的溶媒物质具有较好的效果,CODCr平均去除率达到32.0%,且运行成本合理,具有较高的应用价值。

96例冲击波治疗跟痛症患者的护理体会

目的探讨96例冲击波治疗跟痛症患者的护理体会。方法选择2009年10月至2012年4月在大庆油田总医院疼痛外科应用冲击波治疗跟痛症患者98例,除1例脑出血死亡和1例失访未选入统计,余下96例患者治疗前、治疗中、治疗后进行护理干预。结果在96例患者中,治愈39例,显效28例,好转23例,无效6例;其中2例治疗初期疼痛加重,3 d后自行缓解,3例并发症发生,无加重病例;治愈率40.63%,有效率93.75%。结论积极的护理干预能有效缓解冲击波治疗跟痛症过程中患者的恐惧心理,能够提高患者治疗中的耐受性,显著缓解患者的疼痛程度,促进疾病康复。

乳双歧杆菌V9对小鼠免疫功能的影响及机制研究

目的评价乳双歧杆菌V9(Bifidobacterium lactis V9)对小鼠免疫功能的调控作用,为其进一步的研发及利用提供实验依据。方法C57BL/6J小鼠随机分为4组,每组10只,分别灌胃给予双蒸水0.5、1.0和3.0 mg/kg乳双歧杆菌V9。30 d后处死小鼠,检测其脏器/体质量比。通过脾淋巴细胞转化、迟发型变态反应来评估各组小鼠的细胞免疫情况;小鼠碳廓清能力和巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬功能测定来评估各组小鼠的单核-巨噬细胞功能;溶血空斑实验和血清溶血素水平测定来评估各组小鼠的体液免疫情况;乳酸脱氢酶(LDH)检测来评估各组小鼠的自然杀伤(NK)细胞活力。结果乳双歧杆菌V9对小鼠体质量、脾指数、胸腺指数均无显著影响(P>0.05);乳双歧杆菌V9可显著提高小鼠的脾淋巴细胞转化、碳廓清吞噬指数、单核-巨噬细胞功能、半数溶血值和NK细胞活力(P<0.05)。结论益生菌乳双歧杆菌V9可有效增强机体免疫功能。

荧光类水滑石的细菌检测及杀菌性能

通过阴离子交换法制备万古霉素改性的铕掺杂锌铝类水滑石,并考察该材料对革兰氏阴性细菌的检测识别和对革兰氏阳性细菌的抑菌活性。所制备的产品通过X射线衍射,透射电镜,荧光等进行了表征。结果表明万古霉素改性的铕掺杂类水滑石纳米片层材料的粒径在50nm左右,而且材料具有较好的荧光性能。利用材料的荧光性质和万古霉素与大肠杆菌之间的作用实现了对大肠杆菌的荧光标记检测;同时,该材料可以利用万古霉素的抗菌性实现对革兰氏阳性细菌的杀灭。结果显示,万古霉素改性的铕掺杂类水滑石具有较好的荧光标记细菌性能和杀菌作用。该材料的合成对于致病菌的快速、方便检测和控制有着重要意义。