LncRNA LINC01194在非小细胞肺癌中对miR-302e的影响及机制研究

目的:初步探索长链非编码RNA(lncRNA LINC01194)在非小细胞肺癌(NSCLC)中对miR-302e的影响及机制。方法:实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分别检测NSCLC组织、癌旁组织和人肺正常上皮细胞BEAS-2B及NSCLC细胞株中lncRNA LINC01194、miR-302e表达,筛选最佳干预细胞系;将NCI-H1975细胞分为:control组(正常培养)、si-NC组(转染si-NC)、si-LINC01194组(转染si-LINC01194)、si-LINC01194+anti-miR-NC组(si-LINC01194和anti-miR-NC共转染)、si-LINC01194+anti-miR-302e组(si-LINC01194和anti-miR-302e共转染);qRT-PCR检测细胞中lncRNA LINC01194、miR-302e的表达;MTT法、平板克隆实验、Transwell小室、流式细胞仪分别检测细胞增殖、迁移及侵袭、凋亡;Western blot方法检测增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、B细胞淋巴瘤蛋白2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达;双荧光素酶报告基因实验验证lncRNA LINC01194与miR-302e靶向调控关系。结果:在NSCLC组织和细胞中,lncRNA LINC01194表达水平升高,miR-302e表达水平降低(P<0.05);抑制lncRNA LINC01194表达可显著抑制NCI-H1975细胞增殖、迁移与侵袭,促进细胞凋亡(P<0.05);抑制miR-302e表达可逆转抑制lncRNA LINC01194表达对NCI-H1975细胞增殖、迁移、侵袭的抑制作用及对细胞凋亡的促进作用(P<0.05);双荧光素酶报告基因实验证实lncRNA LINC01194与miR-302e存在靶向调控关系。结论:在NSCLC组织和细胞中lncRNA LINC01194上调表达,miR-302e下调表达,抑制lncRNA LINC01194可通过上调miR-302e表达,从而抑制NSCLC细胞增殖、迁移与侵袭,促进其凋亡。

功能核酸DNA水凝胶的制备与组装

功能核酸DNA水凝胶是一种以DNA为构建单元通过化学反应或物理缠结自组装而成的新型柔性材料,其构建单元中包含1种或多种能够形成功能核酸的特定序列。功能核酸是通过碱基修饰和DNA分子之间的相互作用力组合的一类特定核酸结构,包括核酸适配体、DNA核酶、G-四联体(G-quadruplex,G4)和i-motif结构等。传统上,高浓度的长DNA链是制备DNA水凝胶的必要条件,而核酸扩增方法的引入为DNA水凝胶的组装方式提供了新的可能。因此,对常用于制备DNA水凝胶的多种功能核酸以及核酸的提取、合成和扩增手段进行了详细的介绍。在此基础上,综述了通过化学或物理交联方式组装功能核酸DNA水凝胶的制备方法。最后,提出了DNA纳米材料的组装所面临的挑战和潜在的发展方向,以期为开发高效组装的功能核酸DNA水凝胶提供参考。

功能核酸DNA水凝胶的理化特性及应用进展

自DNA被开发为纳米级的自组装材料以来,凭借其可调节的多功能性、便利的可编程性、精确的分子识别能力、高通用性以及优越的生物相容性和生物降解性连接了生命科学和材料科学两大领域。受益于DNA纳米材料的结构特性,以功能核酸作为构建单元,经交联、自组装形成的功能核酸DNA水凝胶已成为新型材料领域的研究热点。基于此,对功能核酸DNA水凝胶所具有的主要理化特性进行了总结,并进一步综述了近年来功能核酸DNA水凝胶在药物递送与靶向治疗、生物传感、三维组织构建等生物医学、分子检测及环境工程等领域中的应用进展。最后,从生命科学和材料科学的角度总结了在设计与搭建功能核酸DNA水凝胶时应考虑的关键点和方向,以期助力DNA水凝胶在多学科领域的研究与应用。

硫酸软骨素荧光传感器的构建新策略

硫酸软骨素(chondroitin sulfate,CS)是一类从动物组织中提取的蛋白类黏性多聚糖,在人体免疫调节、缓解关节疼痛、抗凝活性和保护神经元等方面发挥效用,开发硫酸软骨素传感器对生物医药行业研发相关药剂、保健产品质量的粗筛具有重要意义。利用荧光传感器制备简便、响应迅速、选择性强的特点,用阳离子聚合物PDDA诱导芘基分子HPTS自组装,导致荧光淬灭构建传感器。研究结果显示,待测物的加入引起510 nm处荧光强度的恢复,最终建立了实际样品中CS的快速分析方法。构建的硫酸软骨素荧光传感器在浓度0~5μmol·L-1间呈现良好的线性关系,线性方程为y=1.90752+0.27359x(R2=0.9982),检出限为2.8μmol·L-1,样品加标回收率在104%~121%之间。该传感器具有水溶性好、特异性强、直观可视等特点。

PCDH10在胃癌组织中的表达特点及其与患者临床特征、预后的关系

目的探讨原钙粘蛋白(PCDH10)在胃癌组织中的表达特点及与患者临床特征、预后的关系。方法分别选取术后胃癌组织标本90例和癌旁组织标本45例,采用蛋白质印迹法、免疫组化法检测两组标本中PCDH10蛋白表达情况,比较不同临床特征的胃癌患者胃癌组织的PCDH10阳性表达率,探讨PCDH10蛋白表达与患者预后的关系。结果胃癌组织中PCDH10阳性表达率为32.22%,明显低于癌旁组织的84.44%,差异有统计学意义(P﹤0.01);胃癌组织中PCDH10蛋白相对表达量明显低于癌旁组织,差异有统计学意义(P﹤0.01);TNM分期为Ⅰ～Ⅱ期、无淋巴结转移的胃癌患者胃癌组织的PCDH10阳性表达率高于TNM分期为Ⅲ期、有淋巴结转移的胃癌患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05);PCDH10阳性表达患者的3年生存率为62.1%,高于PCDH10阴性表达患者的36.1%,差异有统计学意义(P﹤0.05)。结论PCDH10在胃癌组织中相对表达量较低,并且与肿瘤的TNM分期、有无淋巴结转移及患者远期预后有关。

胃癌患者循环中OCT4表达水平与临床病理特征及生存率的关联分析

目的评估血浆八聚体结合蛋白4 (OCT4)mRNA的表达水平与胃癌患者临床病理特征及预后的关联。方法采集137例胃癌患者的血浆样本,抽提总RNA,采用实时荧光PCR法进行定量分析OCT4mRNA的表达水平,中位随访时间为51月。结果血浆中OCT4 mRNA的表达水平与肿瘤大小(R=0.351,P<0.001)成正相关;血浆中OCT4mRNA的高表达患者比低表达患者有较差的总体生存期(OS)(P<0.001)。单元Cox风险回归模型分析显示,血浆OCT4 mRNA高表达水平(P<0.001)、低分化(P=0.001)、高N分期(P=0.034)以及高TNM分期(P=0.010)均与患者较差的OS有关。进一步采用多元Cox回归模型分析胃癌患者OS的预测因素,结果显示,血浆OCT4mRNA高表达水平(P<0.001)能独立预测患者较差的OS。结论血浆OCT4mRNA的表达水平可作为新颖的可靠的生物标记物,用于评估胃癌患者的临床病理特征和预后情况。

刺激响应型DNA水凝胶的性质及其应用

DNA水凝胶作为一种生物合成分子,既具有DNA分子的特异性、生物可降解性和分子识别等特性,又具有水凝胶的高亲水性等特征。刺激响应型DNA水凝胶主要是在环境因素的刺激下,利用常规DNA序列经Watson-Crick碱基互补配对形成的DNA分支结构或多种功能核酸的特殊DNA序列形成的i-motif结构;T-A·T三螺旋结构、C-G·C^+三螺旋结构及G-四链体结构等对环境的响应行为使水凝胶形成及应用。近年来,刺激响应型DNA水凝胶因其在温度、pH、光、金属离子、生物分子等单刺激因素,以及光热、金属离子、有机物、温度与p H等多刺激因素下的独特应答性质,在生物传感、生物成像、药物递送、生物材料等方面得到了广泛的应用。综述了刺激响应型DNA水凝胶的形成方法、分类及其核酸来源,形成后的表征手段以及在环境刺激下的响应行为与应用,概括了目前刺激响应型DNA水凝胶的研究热点,并就其未来发展趋势做出了预测。

浅谈砌体结构房屋建筑产生裂缝的处理措施

在人口总量不断增加的情况下,对房屋建筑的需求量越来越大,建筑行业取得了快速发展。其中,砌体结构在房屋建设中占据着关键性的位置,在出现裂缝的时候,墙体的承重能力大大降低,必须采取相应措施防止这种现象的产生。因此,本文分析了砌体结构房屋裂缝的原因,并提出了相应的解决方法,具有一定的借鉴性意义。