“八卦阵”

我来到一片湿润的土地,找到红薯的踪迹,一边刨土一边不停地摇晃红薯藤蔓,但我终究不是鲁智深,没有倒拔垂杨柳的洪荒之力。只能试着先用铲子围着红薯藤蔓画一个圈,然后沿着这个圈把铲子插下去,将周围的泥土插松后再把红薯从这个圈里撬出来。

家有“悟空”

我的弟弟像孙悟空一样,会七十二变。他温顺时,就变成小猫,安安静静地搭积木:设计发电厂、灯泡厂。这个“悟空”完完全沉浸在自己设计的世界中,努力让“水帘洞”通上电。但有时他又变成贪吃的饿狼。饭桌上摆着火腿肠,他扑上饭桌,嘴巴张得大大的,拼命往嘴里扒,这是因为着急赶路取经而忘了吃饭吗?

负载银纳米颗粒小球藻的明胶/聚乙二醇水凝胶的性能及其对小鼠全层皮肤缺损感染创面愈合的作用

目的探讨负载银纳米颗粒(AgNP)小球藻的明胶/聚乙二醇水凝胶(以下简称复合水凝胶)的性能及其对小鼠全层皮肤缺损感染创面愈合的作用。方法该研究为实验研究。制备单纯明胶/聚乙二醇水凝胶(以下简称单纯水凝胶)和复合水凝胶,大体观察2种水凝胶分别在55、37℃以及808 nm近红外光照射下的外观和可注射性;采用电子万能试验机测试2种水凝胶在室温下的拉应力-应变性能、压应力-应变性能以及复合水凝胶在80%最大压应力下的循环压应力-应变性能。分别于磷酸盐缓冲液(PBS)、单纯水凝胶和复合水凝胶中滴加金黄色葡萄球菌或大肠埃希菌菌液。取部分滴加了金黄色葡萄球菌或大肠埃希菌菌液的复合水凝胶,予近红外光照射5 min。将各样品孵育6 h后,采用稀释涂布平板法检测并计算2种细菌培养24 h的死亡率(样本数为5)。取海军军医大学第一附属医院泌尿外科收治的1名6岁健康男童包皮环切术后废弃包皮组织,采用酶解法提取分离原代人成纤维细胞(HFb),常规培养至第3~6代,用于后续细胞实验。制备终质量浓度分别为100.0、50.0、25.0、12.5、0 mg/mL的复合水凝胶浸提液,用其培养HFb,培养24 h后采用细胞计数试剂盒8检测细胞增殖活性,样本数为3。取20只6~8周龄雌性C57BL/6J小鼠,在每只鼠背部制作1个全层皮肤缺损创面,在创面上涂抹金黄色葡萄球菌菌液进行感染。将感染小鼠按照随机数字表法分为空白对照组、单纯水凝胶组、复合水凝胶组、联合处理组,每组5只小鼠,分别采用PBS、单纯水凝胶、复合水凝胶、复合水凝胶+光照(用波长808 nm近红外光照射5 min)处理其创面。于伤后0(首次处理创面后即刻)、3、7、14 d,大体观察各组小鼠创面渗出及愈合情况并计算伤后7、14 d的创面愈合率,样本数为5。伤后14 d,行苏木精-伊红染色观察小鼠创面组织病理学变化。结果单纯水凝胶和复合水凝胶在55℃时均为溶液状态,降温到37℃后均呈凝胶态;近红外光照射2种水凝胶后,仅复合水凝胶升温,可再次回到溶液状态,即具有可注射性。复合水凝胶的最大拉应力可达301.42 kPa,对应的应变为87.19%;最大压应力可达413.79 kPa,对应的应变为91.67%,均与单纯水凝胶的拉伸和压缩性能相近。复合水凝胶经过10次压缩循环后,其最大压应力仍可达第1次压应力的84.1%。培养24 h,金黄色葡萄球菌经单纯水凝胶处理后的死亡率明显高于经PBS处理后(P<0.05);大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌仅经复合水凝胶处理后的死亡率均明显高于经单纯水凝胶处理后(P<0.05);大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌经复合水凝胶+光照处理后的死亡率均明显高于仅经复合水凝胶处理后(P<0.05)。培养24 h,与用终质量浓度0 mg/mL复合水凝胶浸提液培养相比,用终质量浓度25.0、50.0 mg/mL复合水凝胶浸提液培养的HFb的增殖活力均明显增强(P<0.05),用终质量浓度100.0 mg/mL复合水凝胶浸提液培养的HFb的增殖活力明显减弱(P<0.05)。伤后0、3 d,空白对照组、单纯水凝胶组小鼠创面中的脓性分泌物均较多,复合水凝胶组小鼠创面中仅有少量渗出液,而联合处理组小鼠创面中未见明显感染。伤后7、14 d,单纯水凝胶组小鼠创面愈合率均明显高于空白对照组(P<0.05),复合水凝胶组小鼠创面愈合率均明显高于单纯水凝胶组(P<0.05),联合处理组小鼠创面愈合率均明显高于复合水凝胶组(P<0.05)。伤后14 d,空白对照组小鼠创面有较多的炎症细胞浸润、未见新生的上皮层;单纯水凝胶组小鼠创面中新生上皮长度短,且存在少量炎症细胞;复合水凝胶组小鼠创面中有连续的新生上皮形成,以及大量未成熟的肉芽组织;联合处理组小鼠创面有连续的新生上皮形成,未成熟肉芽组织较少。结论制备的复合水凝胶具有良好的温敏性、光热性和可注射性,以及良好的机械性能、抗菌性能和生物相容性,可促进小鼠全层皮肤缺损感染创面愈合。

自体表皮细胞扩增体系创新与临床应用

目前,大面积烧伤患者创面封闭广泛使用的方法是自体刃厚皮或自异体混合邮票状皮片移植术,以应对大面积烧伤后自体皮源匮乏的问题。移植皮片后,多采用网眼纱布作为内层覆盖物,以充分引流植皮后创面渗液。如何提高植皮后皮片存活率、减少术后早期换药过程中皮片损伤是临床应用邮票状皮片移植术时较为关注的问题。本课题组采用一种新型自体表皮膜片载体及应用模式,在改善膜片机械特性、为皮片移植(尤其是邮票状皮片移植)术后提供一种充分引流渗液的覆盖物的同时,充分发挥自体表皮膜片促愈作用,提高植皮后皮片存活率,减少术后早期换药过程中皮片损伤及创面疼痛。该载体可促进表皮细胞黏附、扩增,在保证表皮细胞膜片发挥促进创面愈合的生物效应的同时,充分引流创面渗液,降低积液导致局部炎症、感染的风险。临床纳入大面积烧伤患者25例次,单独应用自体表皮细胞膜片或联合邮票状皮、网状皮植皮术。结果表明,在术后换药期间创面均较为干燥,无明显积液、感染发生;采用自体表皮细胞膜片覆盖的植皮创面皮片存活率更高,具有更加明显的表皮爬行、融合成片及再上皮化表现。本课题组通过前期动物试验和临床试验的探索、总结,所制备自体表皮细胞膜片的应用具有以下特点:(1)适用于采用复合邮票状皮、网状皮移植修复的深Ⅱ度削痂后创面、Ⅲ度创面及烧伤后残余创面等;(2)应用2周前(或尽早,如入院后1~2 d内)取正常皮肤分离获取表皮细胞并冻存,术前2 d种植细胞于载体,2 d后形成亚融合;(3)取皮部位包括会阴部、下腹部、腋窝、四肢、躯干等皮肤松弛部位,可取断层皮、全厚皮;(4)术后1周左右换药,如无异常继续使用至载体与创面分离。目前本研究仍在进一步纳入临床病例并对患者创面愈合持续随访、追踪,以期探究其在改善创面愈合后瘢痕结局等方面的作。