广州管圆线虫感染对不同宿主免疫系统的影响

【目的】探讨宿主免疫系统在广州管圆线虫感染所致脑炎发病机制中的作用。【方法】大鼠是广州管圆线虫适宜宿主,小鼠是其非适宜宿主。采用广州管圆线虫感染SD大鼠和BALB/c小鼠模型,观察感染21 d后宿主中枢免疫器官胸腺以及外周免疫器官脾脏的差异变化,并通过流式细胞技术检测感染后大、小鼠胸腺和脾脏中细胞亚型的变化。【结果】广州管圆线虫感染21 d后,大鼠胸腺和脾脏外观没有明显改变;正常组和感染组胸腺细胞总数以及胸腺细胞中各细胞亚型(CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞、CD4^(+)CD8^(+)T细胞和CD4^(-)CD8^(-)T细胞)比例与数量的变化差异均无统计学意义(P>0.05);而感染后大鼠脾脏中CD4^(+)T细胞比例和数量均增加(P=0.016;P=0.023),CD8^(+)T细胞比例和数量变化均不明显(P>0.05)。广州管圆线虫感染21 d后,小鼠胸腺和脾脏均严重萎缩,胸腺细胞总数急剧减少(P<0.0001);胸腺细胞各亚型中CD4^(+)CD8^(+)T细胞比例和数量减少最为明显(P<0.0001;P<0.0001);感染导致小鼠脾脏单个核细胞总数降低(P<0.0001),脾脏淋巴细胞亚型CD4^(+)T细胞和CD8^(+)T细胞总数均减少(P<0.0001;P=0.0038)。【结论】广州管圆线虫感染对非适宜宿主小鼠的免疫系统产生严重免疫抑制,而大鼠的免疫系统影响较小,虫体感染引起宿主的免疫抑制,进而引起宿主清除和抵抗寄生虫能力降低,这可能是寄生虫产生免疫逃逸的重要机制。本研究揭示机体免疫系统牵涉到广州管圆线虫感染所致脑炎发病机制中的重要作用,此为广州管圆线虫感染所致脑炎的防治提供了新思路。

miR-200a&c靶向PTEN/mTOR信号通路减轻广州管圆线虫感染所致的CNS脱髓鞘

中枢神经系统(CNS)脱髓鞘疾病是一种临床常见病,但如何有效地修复损伤的髓鞘仍是一个难题。大量研究表明广州管圆线虫(Angiostrongylus cantonensis,A.cantonensis)可导致中枢神经系统脱髓鞘,而miRNAs也被发现可调控中枢神经系统髓鞘的生长。本课题用A.cantonensis感染BALB/c小鼠造成中枢神经系统脱髓鞘,并筛选感染过程中的小鼠脑内差异表达的miRNAs,探讨这些miRNAs在A.cantonensis致中枢神经系统髓鞘损伤中发挥的作用以及可能的机制。由于miRNA在少突胶质细胞分化和髓鞘合成中的关键作用,因此被认为是脱髓鞘恢复的潜在因素。在本研究中,我们发现miR-200s的表达在感染的早期阶段显著增加,而在感染后期则有明显下降。

广州管圆线虫感染小鼠导致脱髓鞘性视神经炎模型的研究

目的构建脱髓鞘性视神经炎(demyelinating optic neuritis,DON)动物模型,为DON的研究提供参考。方法首先通过灌胃广州管圆线虫(Angiostrongylus cantonensis)幼虫的方法感染Balb/c小鼠;接着用神经行为学和视觉评分来评估小鼠神经功能学变化,视觉动作电位和视网膜电图检测小鼠视觉通路的变化,组织病理学染色和透射电镜观察小鼠视网膜和视神经髓鞘形态功能性变化,RT-qPCR和Western Blot来检测视网膜节细胞标志物Brn-3a和视神经髓鞘标志物髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)的变化。结果与对照组相比,Balb/c小鼠在广州管圆线虫感染后第21天,其体质量明显下降,神经行为学评分和视觉评分均显著降低;同时,视觉动作电位和视网膜电图检测结果表明视神经和视网膜的视路传导功能受损;另外,苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色、固蓝(luxol fast blue,LFB)染色和透射电镜观察到视网膜节细胞和视神经髓鞘出现明显损伤;最后,RT-qPCR和Western Blot结果显示视网膜神经节细胞标志物Brn-3a和髓鞘少突胶质细胞标记物MBP的蛋白水平和mRNA水平均显著降低。结论广州管圆线虫感染Balb/c小鼠可损伤其视网膜和视神经,进而导致脱髓鞘性视神经炎发生,其可作为一种新的DON动物模型。