天然型无机骨的制备及其成骨效应的实验研究

已有多种材料修复骨缺损，但天然型无机骨（ｎａｔｕｒａｌｎｏｎ－ｏｒｇａｎｉｃｂｏｎｅ，ＮＮＢ）的骨作用研究较少。采用动物骨，经物理、化学及高温处理，除去其有机成分，保留其无机成分的三维结构外型。天然型无机骨既具有类似人骨的网状孔隙，又有利于传导成骨。植入家兔的肌肉、桡骨内和胫骨内，采用Ｘ线，组织学荧光标记等方法观察。证实，该材料组织相容性好，且具有新生骨出现早、生长快及成骨量多的特点。

钙及高压氧对卵巢切除大鼠骨丢失影响的实验研究

目的 评价纳米碳酸钙及高压氧对雌激素缺乏引起的骨丢失的预防作用。方法 采用 3月龄Wistar雌性大鼠切除双侧卵巢并用低钙饲料喂养作动物模型 ,术后分别给予钙剂及高压氧 ,连续 14周。结果 与假手术组 (Sham)相比去势组 (OVX)骨密度、股骨生物力学性质、生化、骨形态计量指标均有显著差异 ;钙剂组 (OVX +Ca)及高压氧组 (OVX +HBO)与OVX组比较 ,股骨干及股骨近段骨密度、股骨最大载荷、弹性桡度、最大应力、弹性模量显著升高 ,血清TRAP、ALP显著下降 ,高压氧组股骨弹性载荷、弹性应力、弹性应变的升高及血清TRAP、ALP的下降均较钙剂组明显。结论 纳米碳酸钙及高压氧能在一定程度上抑制去势低钙饲料喂养的Wistar大鼠骨密度及骨生物力学性能下降。

bFGF复合NNB无机骨修复兔下颌骨缺损的实验研究

目的 研究碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)与天然型无机骨 (NNB)复合人工骨修复兔下颌骨缺损的效果 ,以期为临床提供一种较为理想的骨替代材料。方法 在 30只成年新西兰兔双侧下颌骨下缘形成 15mm× 6mm全层骨膜骨质缺损 ,每一缺损作为一个实验单位 ,术后 3周、6周、12周取材行大体标本、X片观察 ,并对HE染色切片行计算机定量分析。结果 复合骨与NNB相比 ,同期成骨量大 ;6周时复合骨成骨面积尚不如自体骨 ,而 12周时已接近自体骨水平 ,空白缺损则始终未能修复。结论 复合骨生物相容性好 ,效果明显优于NNB ,远期与自体骨相似 ,是一种较为理想的骨替代材料。

天然型无机骨修复骨巨细胞瘤刮除术后骨缺损

目的 观察骨巨细胞瘤刮除术后采用天然型无机骨 (NNB)充填的临床结果。方法 7例骨巨细胞瘤手术刮除内瘤腔 ,95 %乙醇灭活 ,充填块状NNB。结果 7例患者术后 3～ 7个月均可下地行走 ,术后 4～ 8个月复查可见X线片中骨缺损充填处的方块状NNB间隙影消失 ,新生骨与NNB及周围骨壳融合 ,显示病灶愈合。术后随访 14～ 5 0个月 ,无肿瘤复发。结论 NNB作为一种新型的人体骨组织替代材料 。

碱性成纤维细胞生长因子促进颌骨缺损修复的研究

目的 :评价碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)对成骨的促进作用 ,以期为颌骨缺损提供一种较为理想的替代材料。方法 :18只成年兔双侧下颌骨下缘各造成 15mm× 6mm的全层骨膜骨质缺损 ,每一缺损作为一个实验单位 ,按自身同期配对设计 ,分别植入复合骨和天然型无机骨 (NNB)。术后 3、6、12周取下标本 ,进行甲苯胺蓝染色观察、四环素荧光检查以及组织学成骨面积定量分析。结果 :复合骨新骨形成及钙化早 ,同期成骨面积大于NNB(P <0 .0 1)。结论 :合适的复合条件下bFGF可有效地促进软骨及骨的生长 ,复合骨新骨形成及钙化早 ,同期成骨量多 ,修复效果优于NNB。

仿生骨植入下颌骨的实验研究

目的 :将煅烧骨与骨形成蛋白复合 ,形成仿生骨植入动物体内以证明其为理想的载体。方法 :将所制仿生骨植入 12只狗的下颌骨 ,采用同体对照方法。术后 2、4、8、12、2 4周进行组织学检查、扫描电镜等方法观察新骨生成量及降解过程。结果 :动物实验揭示该仿生骨具有快速的成骨能力 ,同时具有骨传导与骨诱导能力。结论 :煅烧骨是骨形成蛋白的良好载体 。

天然型无机骨颌面植入体在正颌外科的应用

目的 验证天然型无机骨颌面植入体在正颌外科中应用的有效性。方法 ３０ 例患有各种颌面畸形的正颌形的正颌外科患者植入了天然型无机骨， 植入方式全部为表面贴覆。结果 此种骨代用品具有良好的组织相容性和稳定性， 植入手术的并发症少见， 软组织改变明显。结论 病例选择合适， 天然型无机骨在正颌外科患者中将起到改善面部外形， 节省自体骨的目的。

脱钙骨基质颗粒(DGB)骨移植治疗骨折不愈合(附16例报告)

作者报告自1984年3月至1986年3月间用脱钙骨基质颗粒(DGB)移植治疗16例骨折不愈合,随访13例中骨愈合11例,说明DGB有较好的诱导成骨作用.作者认为临床应用DGB移植治疗骨折不愈合中,充分沟通骨髓腔、足够的植入DGB和坚强的固定,是保证骨愈合的重要因素.

羟基磷灰石复合骨形成蛋白骨表面种植的组织学观察

本研究采用组织学观察方法,比较单纯羟基磷灰石与羟基磷灰石复合骨形成蛋白在兔颅骨骨皮质表面的种植情况。结果表明:羟基磷灰石—骨形成蛋白复合材料有极高的成骨率,成骨现象十分活跃,可达种植材料全层,材料与骨皮质之间的界面为骨性连接。而单纯羟基磷灰石成骨率低,成骨范围局限,这种成骨可能是手术创伤所致,材料与骨皮质之间的界面多为纤维结缔组织。我们认为,羟基磷灰石复合骨形成蛋白是较理想的骨皮质表面种植材料,而单纯羟基磷灰石材料不适宜作为骨皮质表面的种植材料,特别不适宜用作牙槽嵴再造。

天然型无机骨支架组织工程化骨的构建及兔自体异位成骨实验

目的 以天然型无机骨 (NNB)为支架材料 ,复合体外诱导培养的骨髓间充质干细胞 (MSCs) ,构建组织工程化骨 ,并进行动物自体异位成骨实验 ,以期为骨缺损的修复提供较为理想的方法。方法 贴壁法培养兔MSCs ,体外诱导培养扩增。以 5 0× 10 6/ml的密度与NNB复合 ,构建组织工程化骨 ;部分材料体外培养 1天 ,电镜观察细胞与材料复合情况。其余以NNB为空白对照 ,分别植入 6只新西兰兔皮下 ,每组 6例 ,4周取材 ,脱钙组织学观察。结果 复合后 1天 ,细胞可在NNB内表面良好贴壁 ;植入动物自体皮下 4周 ,实验组材料网孔中有新生骨、软骨样组织形成 ;而NNB空白对照组材料内无新骨形成。结论 NNB具有良好的生物相容性 ,可为种子细胞生长提供理想的三维空间 。

煅烧骨成骨效应实验研究

作者采用取材丰富的家猪骨，经脱脂、脱蛋白、煅烧等工艺处理制成的煅烧骨（ＴｒｕｅｂｏｎｅＣｅｒａｍｉｃＴＢＣ）为植骨实验材料。将ＴＢＣ植入兔背肌肌囊、胫骨洞型骨膜骨缺损、桡骨骨干的骨膜骨缺损（２．５ｃｍ）内。术后２～１６周组织学观察表明：ＴＢＣ不引起组织排斥反应和炎症反应。ＴＢＣ网状孔隙内成骨活跃。荧光标记发现新生骨出现早、增加快、数量多。１６周ＴＢＣ与桡骨二断端愈合者１６／３０。

氧化新喹对O_S-732细胞系的杀伤作用及超微结构的电镜观察

本文介绍氧化新喹对O_s-732细胞系的体外实脸结果,并以扫描及透射电镜的细胞计量学测算超微结构变化及意义的探讨。当药物浓度达30μg/ml时,对细胞毒性显著,细胞在48小时相继死亡。扫描电镜观察,药物达0.5μg/ml时肿瘤细胞微绒毛大部消失,5～20μg/ml则细胞皱缩碎裂成不规则团块。透射电镜见到核质溶解、线粒体水肿、嵴消失,脆质溶解成空泡、溶酶体增多自溶灭亡。细胞计量学测算溶酶体增大3.3倍导致自溶为本品抑瘤杀伤机理。

HA复合BMP骨表面种植的骨定量分析

无牙(牙合)牙槽嵴萎缩患者很多,数十年来人们曾采用多种手术方式和骨移植等方法行牙槽嵴再造,但由于并发症和术后移植骨吸收等问题难以在临床广泛应用。随着生物医学工程的发展,新型人工种植材料的研制和应用越来越受到重视。其中羟基磷灰石(HA)因具有良好的生物相容性和组织亲和力被认为是目前最好的材料之一。但HA材料本身只有骨引导作用,而没有骨诱导能力。骨形成蛋白(BNIP)是一种具有很强诱导成骨能力的非胶原性疏水糖蛋白,我们将HA复合BMP及单纯HA两种材料在兔颅骨表面种植。

异体脱钙骨基质修复颌面骨缺损31例临床疗效观察

作者采用异体脱钙骨基质,对31例颌面骨缺损及牙周炎重度牙槽骨吸收的病例进行植骨治疗,经2年临床观察,疗效满意。异体脱钙骨植入后,无明显的排异反应,能迅速诱导新生骨。材料来源充分,便于贮存,应用时可塑形,是一种较好的治疗骨缺损的植入材料。

猪骨形态发生蛋白的分离与初步纯化

骨形态发生蛋白(BMP)为诱导中胚层未分化间充质细胞向成骨细胞方向分化的诱导因子。本实验以猪皮质骨为材料,通过6mol/L脲抽提、分步沉淀、羟基磷灰石层析、凝胶过滤和制备电泳等方法纯化BMP,并通过将BMP植入小鼠骨骼肌诱导成骨测定活性。结果表明,猪BMP的表观分子量小于26000,可能为酸性蛋白质。

煅烧骨植入的生物力学和成骨效应研究

为了解决骨科临床大量用骨问题,1987年我们采用动物骨经脱脂、脱蛋白、煅烧等工艺研制出一种新型骨代用材料-煅烧骨(True bone ceramic TBC)。该材料经X线衍射和扫描显微观察证实,其主要成份是HA(羟基磷灰石),具有原骨的三维结构形态和由此构成的天然的网状孔隙系统。本文报告TBC植入动物体内后的生物力学性能、组织相容性及其成骨效应,为临床应用提供实验依据。1 材料和方法1.1 TBC植入动物体内的生物力学实验 用狗2只,体重17kg,体健,雌性。以噻胺酮麻醉,无菌操作下,行尺骨干中段骨膜骨切除长2.5cm,左侧骨缺损区内植入5mm×8mm×25mm煅烧骨一块,右侧骨缺损区内植入5mm x 8ram×25mmHA/BMP一块(HA系用化学方法人工合成的块料,含孔率40-60％,孔径200-400μm,BMP为骨形态发生蛋白,二者构成复合人工骨)。

天然型无机骨修复良性溶骨性骨缺损的临床观察

为寻找良性骨缺损理想的充填材料，特别是修复儿童良性溶骨性较大的骨缺损，采用天然型无机骨（ＮＮＢ）充填良性溶骨性骨缺损５例，其中骨囊肿３例，纤维异样增殖症１例，非骨化性纤维瘤１例。病变位于股骨中上段１例，股骨下段３例，肱骨上段１例。５例均行病灶开窗刮除，彻底清除内膜及瘤样病变。充填方块状ＮＮＢ，术后伤口均Ⅰ期愈合。术后３个月～６个月活动正常。术后Ｘ线片复查见方块状ＮＮＢ间及其内的间隙影消失，新生骨与周围骨壳融合，显示病灶愈合。经７个月～２年随访，病变区无复发。认为，ＮＮＢ是修复良性溶骨性骨缺损理想的充填材料。

新型复合人工骨成骨效应的实验研究

新型复合人工骨，ＨＡ／ＴＣＰ／ＢＭＰ为含孔块料，含孔率４０～６０％，孔径２００～４００μｍ。该材料不但有一定的生物降解性能、良好的组织相容性和稳固性，且具有诱导成骨作用。动物实验，经Ｘ－线、γ－照像、骨密度测量及组织学检查后表明：ＨＡ／ＴＣＰ／ＢＭＰ成骨效应高于ＨＡ／ＴＣＰ，而ＨＡ／ＴＣＰ和ＨＡ／ＴＣＰ／ＢＭＰ的成骨效应都高于不具生物降解性能的ＨＡ。新型复合人工骨是一种有希望过渡于临床应用的人体硬组织替代材料之一。

人骨形成蛋白4基因修饰的组织工程化骨的实验研究

目的 探讨基因治疗与组织工程方法相结合促进成骨的效果。方法 应用亚克隆法构建真核表达载体 pEGFP hBMP 4。贴壁法培养兔骨髓基质干细胞 (bonemarrowstromalcells,bMSCs) ,体外转染pEGFP hBMP 4 ,pEGFP基因并留置空白对照 ,以天然型无机骨为支架材料 ,分别构建组织工程化骨 ,植入裸鼠皮下 (每组 6例 ) ,4周取材 ,进行组织学及新骨成骨面积定量分析。结果成功构建了序列完全正确的 pEGFP hBMP 4表达载体。bMSCs可以在天然型无机骨支架网孔内表面贴壁生长。裸鼠体内实验表明术后 4周转染pEGFP hBMP 4基因组支架材料中已大部由新骨充满 ,新骨面积大于对照组 (P <0 0 5 )。结论 应用hBMP 4基因转染的bMSCs作为种子细胞构建组织工程化骨 。

异体颅骨、骨形态发生蛋白及骨膜修复颅骨巨大缺损

以异体颅骨和骨形态发生蛋白为材料,应用部分带蒂骨膜瓣和头皮瓣成功修复4例巨大颅骨缺损。缺损范围最小为9cm×7cm,最大13cm×11.5cm。经术后1～2年随访,外观均好,且移植异体骨逐渐被吸收,新生骨已形成。