不同方法提取广藿香油化学成分及其体外抑制NO活性比较

目的:研究3种不同提取方法所得广藿香油化学成分的差异,并初步考察其体外抑制一氧化氮(Nitric Oxide,NO)活性。方法:通过气相色谱-质谱法(GC-MS)分析石油醚冷浸提取法、超临界提取法和水蒸气蒸馏法得到的广藿香油的化学成分,利用美国国家标准与技术研究院(National Institute of Standards and Technology,NIST)及Wiley数据库与相关参考文献检索结果进行定性鉴别。测定不同提取方法广藿香油对脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导的巨噬细胞RAW264.7的NO生成的抑制作用。结果:从5个广藿香油样品中总共分析鉴定了30个化合物,超临界CO 2流体萃取法和石油醚冷浸提取法中百秋李醇的相对含量都高于水蒸气蒸馏法;NO抑制实验表明3种提取方法所得样品在50μmol/L的浓度下对NO抑制的强弱顺序是:超临界CO 2流体萃取法>石油醚冷浸提取法>水蒸气蒸馏法,其中超临界CO 2流体萃取法得到的广藿香油对NO的抑制作用显著强于氨基胍组。结论:以体外NO抑制生成作为评价标准,超临界CO 2流体萃取法作为广藿香油绿色高效的制备技术有望于取代传统的水蒸气蒸馏法,结合化学成分分析发现超临界CO 2流体所得广藿香油中桉叶烷型倍半萜含量高于其他两种提取方法制备的样品,可能是其NO抑制活性显著提高的原因之一。

枇杷叶中活性五环三萜酸组分富集及测定

目的富集枇杷Eriobotrya japonica(Thunb.)Lindl.叶活性五环三萜组分并进行含量测定。方法明确枇杷叶中主要的五环三萜单体的抑制人中性粒细胞弹性蛋白酶(HNE)活性,在此基础上,富集高HNE抑制活性的五环三萜组分,测定其含量并进行方法学验证。结果经HNE抑制活性测试,枇杷叶主要的五环三萜组分中蔷薇酸无显著HNE抑制活性,山楂酸、科罗索酸、齐墩果酸、熊果酸均显示出较好的HNE抑制活性,IC 50在13.30~31.29μmol/L范围内。通过提取纯化,从枇杷叶提取物中富集得到以山楂酸、科罗索酸、齐墩果酸、熊果酸为主的总五环三萜酸组分,其中4种活性五环三萜含量达74%以上,形成的提取物IC 50为4.412μg/mL,按照分子量为500计,相当于8.824μmol/L,优于三萜酸单体。结论用于富集纯化枇杷叶中4种活性五环三萜组分的方法可行,五环三萜的含量测定方法稳定、可靠。

极地真菌Geomyces pannorum SA3-2-YM次级代谢产物的研究

采用聚酰胺柱层析、硅胶柱层析、反相硅胶柱层析、凝胶柱层析和高效液相HPLC等色谱技术,对极地真菌Geomyces pannorum SA3-2-YM的发酵液提取物进行分离纯化,共得到13个化合物,通过NMR和MS等波谱数据确定结构为:cyclo-(L-Trp-L-Pro)(1)、cyclo-(L-Trp-L-Tyr)(2)、cyclo-(Gly-L-Trp)(3)、cyclo-(L-Trp-L-Phe)(4)、cyclo-(L-Trp-L-Ser)(5)、cyclo-(L-Tyr-L-Pro)(6)、cyclo-(L-Trp-L-Ile)(7)、cyclo-(D-Ala-D-Trp)(8)、ergosterol(9)、(22E)-5α,8α-epidioxyergosta-6,22-dien-3β-ol(10)、anicequol(11)、indazole(12)、p-hydroxybenzaldehyde(13)。其中,化合物1~9、11~13均为首次从地丝霉属的真菌中分离得到。抑菌试验表明化合物9对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌具有一定的抑制活性,其最小抑制浓度(MIC)均为90μg/mL。采用CCK-8法测试了13个化合物对四种肿瘤细胞株的体外细胞毒活性,化合物1~13对四株实验肿瘤细胞株表现出不同程度的抑制活性,其中环二肽化合物8对HeLa肿瘤细胞的抑制率可达62.28%,含有过氧基团的化合物10对SMMC-7721细胞的抑制率达到了68.13%。

广藿香中非挥发性化学成分研究

目的对刺蕊草属植物广藿香Pogostemon cablin中的非挥发性化学成分进行研究。方法采用硅胶、DM130大孔树脂、ODS、Sephadex LH-20、TLC、半制备HPLC等多种色谱技术对其化学成分进行分离纯化,依据理化性质、MS、1D NMR和2DNMR等波谱数据鉴定化合物结构。结果从广藿香95%乙醇提取物中共分离得到25个化合物,分别鉴定为2α,3β,19α,23α,30β-五羟基齐墩果-12-烯-28-酸(1)、2α,3β,19α,23α,29α-五羟基齐墩果-12-烯-28-酸(2)、齐墩果酸(3)、无羁萜酮(4)、β-谷甾醇(5)、豆甾醇(6)、豆甾-4-烯-3,6-二酮(7)、6-羟基豆甾-4-烯-3-酮(8)、6-羟基豆甾-4,22-二烯-3-酮(9)、5-羟基-7,3′,4′-三甲氧基-二氢黄酮(10)、5,4′-二羟基-7,3′-二甲氧基-二氢黄酮(11)、5-羟基-7,4′-二甲氧基-二氢黄酮(12)、圣草酚(13)、3,3′,4′,7-四甲氧基-5-羟基黄酮(14)、3,5,3′,4′-四羟基-7-甲氧基黄酮(15)、5-羟基-3,7,4′-三甲氧基黄酮(16)、3,5-二羟基-7,4′-二甲氧基黄酮(17)、木犀草素(18)、3-甲氧基槲皮素(19)、7,3′,4′-三甲氧基槲皮素(20)、10-二十碳烯酸(21)、13-十八碳烯酸乙酯(22)、二十二烷酸(23)、天师酸(24)、9(S),12(S),13(S)-三羟基十八烷-10(E),15(Z)-二烯酸(25)。结论化合物1和2为新的齐墩果烷型五环三萜化合物,分别命名为30β-羟基阿江榄仁素和29α-羟基阿江榄仁素。化合物1、2、7、8、19、24、25为首次从刺蕊草属植物中分离得到。