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佐剂性关节炎大鼠滑膜及血清中MANF的表达及其与炎症的相关性
被引量:
9
1
作者
马钰泱
狄泽敏
+3 位作者
曹晴
沈玉君
沈玉先
冯利杰
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第4期537-543,共7页
目的观察中脑星形胶质细胞源性神经营养因子(mesencephalic astrocyte-derived neurotrophic factor,MANF)在佐剂性关节炎(adjuvant arthritis,AA)大鼠膝关节滑膜和血清中的表达情况,分析MANF表达与关节炎症是否具有相关性。方法 SD大...
目的观察中脑星形胶质细胞源性神经营养因子(mesencephalic astrocyte-derived neurotrophic factor,MANF)在佐剂性关节炎(adjuvant arthritis,AA)大鼠膝关节滑膜和血清中的表达情况,分析MANF表达与关节炎症是否具有相关性。方法 SD大鼠足趾皮内注射弗氏完全佐剂(Freund complete adjuvant,FCA)制备AA模型;足容积法测量继发侧足肿胀度,关节炎指数(arthritis index,AI)评价AA严重程度,HE染色观察膝关节病理学变化;分别采用Western blot和RT-PCR法检测致炎后不同时期继发侧膝关节滑膜组织中MANF和内质网应激标志蛋白BiP、CHOP的蛋白和mRNA水平;ELISA法检测致炎后不同时期血清中MANF、C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)水平,并进行相关性分析。结果 AA大鼠模型建立成功,致炎d 2滑膜组织中BiP表达明显升高,到d 28稍有下降;MANF表达在致炎d 2略有升高并保持稳定,d 14表达明显上调,随后逐渐下降;而CHOP则保持低水平缓慢上升的趋势;致炎d 14血清中MANF水平明显增高,随后逐渐下降,d 28仍高于正常水平;CRP与MANF变化趋势基本一致;在AA大鼠继发性反应期,MANF水平与关节炎症状、血清IL-1β和TNF-α水平呈负相关。结论关节炎症能诱导MANF表达和分泌,且MANF水平与关节炎症进展和程度密切相关。
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关键词
类风湿性关节炎
内质网应激
未折叠蛋白反应
MANF
分泌性蛋白
炎症因子
下载PDF
职称材料
自噬降低异常磷酸化tau蛋白所致的神经细胞毒性
被引量:
3
2
作者
丁倩
张瑾
+3 位作者
马钰泱
沈玉君
沈玉先
冯利杰
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第6期761-767,共7页
目的观察雷帕霉素和饥饿诱导的自噬对表达异常磷酸化tau蛋白的神经细胞形态、tau蛋白聚集和磷酸化tau降解的影响,探讨这两种经典的诱导自噬方式抑制磷酸化tau的细胞毒性,发挥细胞保护作用的可能机制。方法体外培养小鼠神经瘤母细胞株N2...
目的观察雷帕霉素和饥饿诱导的自噬对表达异常磷酸化tau蛋白的神经细胞形态、tau蛋白聚集和磷酸化tau降解的影响,探讨这两种经典的诱导自噬方式抑制磷酸化tau的细胞毒性,发挥细胞保护作用的可能机制。方法体外培养小鼠神经瘤母细胞株N2a并转染tau真核表达质粒,蛋白磷酸酯酶抑制剂冈田酸(okadaic acid,OA)诱导tau蛋白异常磷酸化,雷帕霉素(rapamycin,Rapa)或Earle's平衡盐溶液(Earle's balanced salts,EBSS)诱导细胞自噬,巴佛洛霉素A1(Bafilomycin A1,Baf A1)抑制自噬,DAB染色观察表达tau细胞的形态变化;激光共聚焦显微镜观察细胞内tau聚集体;TUNEL染色和caspase-3活性检测细胞凋亡;免疫印迹(immunoblot,IB)检测磷酸化tau和细胞自噬水平。结果过表达tau的细胞胞体变圆,突起减少;OA处理后细胞突起进一步减少甚至消失,胞质出现明显tau聚集体,凋亡细胞增加,剪切型caspase-3水平上调;Rapa和EBSS处理后的细胞形态均有一定程度改善,tau聚集体明显减少,细胞凋亡减少,剪切型caspase-3表达降低;而自噬抑制剂Baf A1处理的细胞变圆,皱缩,胞质大量tau聚集体,凋亡细胞明显增加。IB结果显示Rapa明显降低高分子量的磷酸化tau,而EBSS能明显减少低分子量磷酸化tau的水平。结论 Rapa和EBSS诱导的细胞自噬均能抑制磷酸化tau蛋白的细胞毒作用,但其发挥细胞保护作用的机制不同,Rapa诱导自噬倾向于降解磷酸化tau的寡聚体,而EBSS更易于降解低分子量的磷酸化tau蛋白。
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关键词
TAU
磷酸化
雷帕霉素
自噬
蛋白降解
细胞毒性
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职称材料
题名
佐剂性关节炎大鼠滑膜及血清中MANF的表达及其与炎症的相关性
被引量:
9
1
作者
马钰泱
狄泽敏
曹晴
沈玉君
沈玉先
冯利杰
机构
安徽医科大学基础医学院
安徽医科大学生物药物研究所
出处
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第4期537-543,共7页
基金
国家自然科学基金资助项目(No 81173074
81302755)
文摘
目的观察中脑星形胶质细胞源性神经营养因子(mesencephalic astrocyte-derived neurotrophic factor,MANF)在佐剂性关节炎(adjuvant arthritis,AA)大鼠膝关节滑膜和血清中的表达情况,分析MANF表达与关节炎症是否具有相关性。方法 SD大鼠足趾皮内注射弗氏完全佐剂(Freund complete adjuvant,FCA)制备AA模型;足容积法测量继发侧足肿胀度,关节炎指数(arthritis index,AI)评价AA严重程度,HE染色观察膝关节病理学变化;分别采用Western blot和RT-PCR法检测致炎后不同时期继发侧膝关节滑膜组织中MANF和内质网应激标志蛋白BiP、CHOP的蛋白和mRNA水平;ELISA法检测致炎后不同时期血清中MANF、C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)水平,并进行相关性分析。结果 AA大鼠模型建立成功,致炎d 2滑膜组织中BiP表达明显升高,到d 28稍有下降;MANF表达在致炎d 2略有升高并保持稳定,d 14表达明显上调,随后逐渐下降;而CHOP则保持低水平缓慢上升的趋势;致炎d 14血清中MANF水平明显增高,随后逐渐下降,d 28仍高于正常水平;CRP与MANF变化趋势基本一致;在AA大鼠继发性反应期,MANF水平与关节炎症状、血清IL-1β和TNF-α水平呈负相关。结论关节炎症能诱导MANF表达和分泌,且MANF水平与关节炎症进展和程度密切相关。
关键词
类风湿性关节炎
内质网应激
未折叠蛋白反应
MANF
分泌性蛋白
炎症因子
Keywords
adjuvant arthritis
endoplasmic reticulum stress
unfold protein response
MANF
secretory protein
inflammatory factor
分类号
R-332 [医药卫生]
R322.72 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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职称材料
题名
自噬降低异常磷酸化tau蛋白所致的神经细胞毒性
被引量:
3
2
作者
丁倩
张瑾
马钰泱
沈玉君
沈玉先
冯利杰
机构
安徽医科大学基础医学院
安徽医科大学生物药物研究所
安徽医科大学药学院
出处
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第6期761-767,共7页
基金
国家自然科学基金资助项目(No 81302755)
文摘
目的观察雷帕霉素和饥饿诱导的自噬对表达异常磷酸化tau蛋白的神经细胞形态、tau蛋白聚集和磷酸化tau降解的影响,探讨这两种经典的诱导自噬方式抑制磷酸化tau的细胞毒性,发挥细胞保护作用的可能机制。方法体外培养小鼠神经瘤母细胞株N2a并转染tau真核表达质粒,蛋白磷酸酯酶抑制剂冈田酸(okadaic acid,OA)诱导tau蛋白异常磷酸化,雷帕霉素(rapamycin,Rapa)或Earle's平衡盐溶液(Earle's balanced salts,EBSS)诱导细胞自噬,巴佛洛霉素A1(Bafilomycin A1,Baf A1)抑制自噬,DAB染色观察表达tau细胞的形态变化;激光共聚焦显微镜观察细胞内tau聚集体;TUNEL染色和caspase-3活性检测细胞凋亡;免疫印迹(immunoblot,IB)检测磷酸化tau和细胞自噬水平。结果过表达tau的细胞胞体变圆,突起减少;OA处理后细胞突起进一步减少甚至消失,胞质出现明显tau聚集体,凋亡细胞增加,剪切型caspase-3水平上调;Rapa和EBSS处理后的细胞形态均有一定程度改善,tau聚集体明显减少,细胞凋亡减少,剪切型caspase-3表达降低;而自噬抑制剂Baf A1处理的细胞变圆,皱缩,胞质大量tau聚集体,凋亡细胞明显增加。IB结果显示Rapa明显降低高分子量的磷酸化tau,而EBSS能明显减少低分子量磷酸化tau的水平。结论 Rapa和EBSS诱导的细胞自噬均能抑制磷酸化tau蛋白的细胞毒作用,但其发挥细胞保护作用的机制不同,Rapa诱导自噬倾向于降解磷酸化tau的寡聚体,而EBSS更易于降解低分子量的磷酸化tau蛋白。
关键词
TAU
磷酸化
雷帕霉素
自噬
蛋白降解
细胞毒性
Keywords
ta u
phosphorylation
rapamycin
autoph-agy
protein degradation
cytotoxicity
分类号
R329.24 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
R341 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
佐剂性关节炎大鼠滑膜及血清中MANF的表达及其与炎症的相关性
马钰泱
狄泽敏
曹晴
沈玉君
沈玉先
冯利杰
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2018
9
下载PDF
职称材料
2
自噬降低异常磷酸化tau蛋白所致的神经细胞毒性
丁倩
张瑾
马钰泱
沈玉君
沈玉先
冯利杰
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2017
3
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