圈养梅花鹿肠道菌群组成的性别差异

为探究圈养梅花鹿(Cervus nippon)肠道菌群的结构、多样性以及肠道菌群组成的性别差异,利用Illumina MiSeq高通量测序平台对10只圈养健康梅花鹿粪便中的细菌16S rRNA V3—V4区扩增子进行PCR扩增,采用生物信息学手段以性别作为分组因素,分析雄、雌圈养梅花鹿肠道菌群的结构、多样性和差异物种。结果显示:在门水平上,圈养梅花鹿肠道菌群的优势菌门为厚壁菌门(Firmicutes;雄性61.69%,雌性58.23%)和拟杆菌门(Bacteroidetes;雄性27.40%,雌性31.19%);在属水平上,优势菌属为拟杆菌属(Bacteroides;雄性4.60%,雌性6.13%)和梭菌属(Clostridium_IV;雄性3.42%,雌性3.25%)。雄、雌圈养梅花鹿肠道菌群的α多样性无显著差异(p>0.05)。β多样性分析表明,不同性别梅花鹿的肠道菌群组成相似度较高,且组间不存在显著差异(p>0.05)。STAMP和LEfSe分析表明,雌性圈养梅花鹿中起重要作用的菌群为拟杆菌门(LDA值>4,p<0.05)。研究表明,圈养梅花鹿肠道菌群结构及多样性性别间无显著差异,但雄、雌梅花鹿肠道中个别菌门、菌属的分布存在一定差异,拟杆菌门受宿主性别影响较大。

复方中草药对虹鳟生长和非特异性免疫功能的影响

将20∶1的红枣、黄芪和山药提取物等比例混合成复合物,按照质量分数分别为0%(对照组)、0.3%、0.6%和1.2%的比例加入到基础饲料中制成复合中草药饲料,投喂给饲养在冷水鱼循环系统中直径1 m×高1 m饲养缸中、体长7.6~8.9 cm的虹鳟Oncorhynchus mykiss,在水温11~15℃下,探讨复方中草药对虹鳟生长和非特异性免疫功能的影响。56 d饲养结果显示,饲料中添加复方中草药组虹鳟的增重率(WGR)、特定生长率(SGR)和肝脏指数(LSI)有所增加,但与对照组无显著差异(P>0.05),仅添加0.6%的复方中草药组虹鳟的脾脏指数(SSI)显著性升高了21%(P<0.05)。复方中草药组虹鳟的溶菌酶(LYZ)、血清抗菌活力(AA)和超氧化化物歧化酶(SOD)活力有所升高,其中SOD酶活力极显著升高(P<0.01);0.3%和0.6%复方中草药组LYZ活力显著升高(P<0.05),而0.6%和1.2%复方中草药组AA与对照组无显著差异(P>0.05)。复方中草药组虹鳟的尿素氮水平(BUN)、血清中肌酐(CREA)含量和谷草转氨酶(GOT)及碱性磷酸酶(ALP)活性比对照组低,谷丙转氨酶(GPT)、酸性磷酸酶(ACP)活性和总蛋白(TP)含量升高,其中CREA含量和ALP活性极显著降低(P<0.01);0.6%复方中草药组的BUN极显著降低(P<0.01);而0.6%和1.2%复方中草药组的GPT活性与对照组无显著差异(P>0.05),各剂量组的GOT活性高于对照组水平,但无显著差异(P>0.05)。复方中草药组的ACP显著高于对照组,0.6%和1.2%组的TP也显著高于对照组。0.6%复方中草药组血清中补体3(C3)和补体4(C4)水平显著升高(P<0.05),0.3%和0.6%添加剂组血清中α-肿瘤坏死因子(TNF-α)水平显著升高(P<0.05)。结果表明,在基础饲料中添加等比例红枣、山药和黄芪的提取物混合物,对虹鳟的生长性能无显著影响,但能提高虹鳟的非特异性免疫功能,建议添加量为0.6%。

复方中草药对虹鳟免疫保护力的影响

【目的】研究复方中草药对虹鳟(Oncorhynchus mykiss)肝脏免疫功能及肠道免疫相关基因的影响。【方法】将红枣提取物、山药提取物和黄芪提取物按照质量比1∶1∶1混合,分别按质量分数0(对照)、0.3%、0.6%和1.2%添加到虹鳟基础饲料中,饲喂体长7.6~8.9 cm的虹鳟幼鱼56 d。用副溶血弧菌(Vibrio parahemolyticus)对幼鱼进行攻毒试验(5.48×10^(6) cfu/尾),4 d后,取其肝脏和肠道,测定肝脏的生理生化指标,用半定量PCR及荧光定量PCR测定肠道免疫相关基因的表达。【结果】与对照组比较,肝脏的总抗氧化能力(T-AOC)显著升高(P<0.05),溶菌酶(LZM)水平极显著升高(P<0.01),酸性磷酸酶(ACP)、过氧化氢酶(CAT)活性显著降低(P<0.05),碱性磷酸酶(ALP)活性极显著降低(P<0.01),0.6%剂量组的丙二醛(MDA)极显著降低(P<0.01),而SOD无显著差异(P>0.05);各复方中草药组肠道的肿瘤坏死因子(TNF-α)及1.2%剂量组转化生长因子-β(TGF-β)转录水平极显著降低(P<0.01),0.3%和0.6%剂量组的补体3(C3)转录水平显著升高(P<0.05)。【结论】复方中草药(红枣+山药+黄芪)可提高感染副溶血弧菌的虹鳟非特异性免疫功能。

红枣提取物对虹鳟血清指标和头肾免疫相关基因表达的影响

为了探讨添加红枣提取物对促进虹鳟(Oncorhynchus mykiss)机体健康的可能性,选取体长为7.2~8.4 cm的健康虹鳟,随机分成4个试验组,分别投喂红枣提取物添加量为0%(对照组)、0.25%、0.50%和1.00%的等氮等脂饲料,饲养56 d,养殖结束后测定12项血清生化指标和头肾的6个免疫相关基因mRNA表达量。结果显示:与对照组相比较,血清中肌酐(CREA)和尿素氮(BUN)含量三个红枣提取物组均出现极显著下降;谷丙转氨酶(GPT)活性在0.50%和1.00%组极显著下降,谷草转氨酶(GOT)活性也在0.50%和1.00%组出现了一定程度下降,但差异不显著;酸性磷酸酶(ACP)和碱性磷酸酶(AKP)活性无显著变化;总蛋白(TP)和白介素6(IL-6)含量在0.25%组出现显著增加;溶菌酶(LZM)活性三个红枣提取物组均显著升高;超氧化物歧化酶(SOD)活性在0.50%组极显著增加;补体4(C4)和肿瘤坏死因子(TNF-α)含量在0.25%和0.50%组均极显著增加。在头肾中,与对照组相比,SOD、白介素1β(IL-1β)和补体3(C3)基因表达量在0.50%和1.00%组均为显著或极显著上调;Factor H基因表达量在0.50%组显著上调;过氧化氢酶(CAT)和LZM基因表达量在0.50%和1.00%组仅出现差异不显著上调。上述结果表明,在虹鳟饲料中添加一定量的红枣提取物,可以起到促进肾功能,保护肝脏和提高其非特异性免疫功能的作用。

三氯生对斑马鱼卵巢抗氧化和凋亡相关基因表达的影响

为了探讨三氯生(TCS)对硬骨鱼类性腺损伤作用的分子机制,通过半静态水体暴露法对斑马鱼(Danio rerio)进行染毒,将斑马鱼暴露在2种不同TCS浓度(0.034 mg/L和0.068 mg/L)溶液中,同时设置空白对照组,42 d后,利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术,探究TCS对斑马鱼卵巢抗氧化及凋亡相关基因表达的影响。结果发现:与空白对照相比,SOD、CAT和GPx1a基因在0.068 mg/L TCS处理组表达水平显著下调,GPx1和MT-2基因在0.034 mg/L浓度组表达显著上调;Bcl-2基因在0.068 mg/L浓度组表达显著下调,p53基因在0.034 mg/L浓度组表达极显著上调,Bax在TCS处理组中均显著上调。以上研究结果表明:较高浓度TCS显著影响了斑马鱼卵巢抗氧化和凋亡相关基因的表达,从而产生了氧化损伤和加速细胞凋亡的发生。

山药提取物对虹鳟生长和非特异性免疫指标的影响

为了探讨山药对虹鳟(Oncorhynchus mykiss)生长和非特异性免疫功能的影响,将虹鳟分成基础饲料组(对照组)和0.1%、0.2%、0.4%山药提取物组,饲养56 d,进行生长及血清免疫相关指标的检测。结果显示,与对照组相比,0.1%、0.2%、0.4%山药提取物组虹鳟生长性能指标无显著差异,而血清中尿素氮(BUN)含量分别显著降低了51.20%、64.06%和49.80%,补体4(C4)含量分别显著升高了154.35%、144.03%和304.68%,溶菌酶(LZM)活性分别显著升高了42.41%、34.95%和27.89%;0.2%和0.4%山药提取物组总蛋白(TP)含量分别显著升高了36.49%和45.97%,白介素(IL)-6显著升高了45.01%和56.25%,肿瘤坏死因子(TNF-α)显著升高了247.32%和414.15%,超氧化物歧化酶(SOD)活性显著升高了82.14%和110.71%,而碱性磷酸酶(ALP)活性显著降低了51.60%和56.75%;0.1%和0.2%山药提取物组谷丙转氨酶(GPT)活性分别显著降低了77.37%和60.71%;0.1%山药提取物组肌酐(CREA)含量显著降低了41.96%;0.2%山药提取物组IL-2含量显著升高了87.59%;0.4%山药提取物组白蛋白(ALB)含量和酸性磷酸酶(ACP)活性分别显著升高了30.73%和63.77%。上述结果表明,在虹鳟基础饲料中添加山药提取物,对虹鳟生长性能无显著影响,但可提高虹鳟非特异性免疫功能,建议添加量为0.2%~0.4%。

关于中学体育课的几点思考

中学体育课程是面向全体学生的必修课程,是学校进行体育教育的重要课程和主要途径。学生通过体育课程的学习,一方面可以提高自己的体育知识和体育技能,另一方面也能提高自己的协调、身体素质能力,从而推动学生的全面发展,也就是常说的德、智、体、美、劳均衡发展。

绿城广场

绿城广场位于郑州市中原区，那里绿树成荫，景色宜人，是市民休闲娱乐的好去处。

肺腺癌患者外周血中外泌体EGFR突变检测及其临床意义

目的:探讨肺腺癌患者外周血中外泌体检测EGFR的临床意义。方法:采用PCR方法检测肺腺癌患者外周血中外泌体、ctDNA和癌组织中EGFR突变情况,分析肺腺癌患者外周血外泌体中EGFR突变及其与临床病理特征的关系,比较外周血中外泌体、ctDNA和癌组织中检测EGFR突变的一致性。结果:肺腺癌患者外周血外泌体中检测EGFR突变型肺腺癌21例,EGFR野生型肺腺癌23例。肺腺癌外泌体中EGFR突变与性别、年龄、肿瘤大小、TNM分期、组织学类型及淋巴结转移情况比较差异无统计学意义(P>0.05)。肺腺癌组织检测25例EGFR突变中,外泌体中检测出EGFR突变19例,一致率为76%;19例肺腺癌组织EGFR野生型中,外泌体检测出EGFR突变2例。25例肺腺癌组织EGFR突变中,ctDNA中检测出EGFR突变16例,一致率为64%。kappa分析显示,外泌体、ctDNA与癌组织检测一致性较好,前者一致性优于后者。结论:外泌体可用于肺腺癌血浆中EGFR突变检测,对指导临床用药具有一定意义。

肺腺癌程序性死亡配体1表达与表皮生长因子受体基因突变及T淋巴细胞功能状态的相关性

目的探讨程序性死亡配体1(programmedcelldeathligand1,PD-L1)在肺腺癌中表达与表皮生长因子受体(epidermalgrowthfactorreceptor,EGFR)基因突变的关系及对T淋巴细胞的影响。方法85例肺腺癌患者为肺腺癌组,29例肺良性病变患者为对照组;采用免疫组织化学法检测2组手术切除组织中PD-L1和CD8阳性表达率,采用Sanger测序法检测肺腺癌组织中EGFR突变情况,分析肺腺癌组PD-L1阳性表达与临床病理特征的关系,采用Pearson相关分析肺腺癌组PD-L1阳性表达与EGFR突变、T淋巴细胞浸润的相关性。结果肺腺癌组组织中PD-L1阳性表达率(44.7%)高于对照组(0)(P<0.05);肺腺癌组不同性别、年龄及组织学类型患者PD-L1阳性表达率比较差异无统计学意义(P>0.05),肿瘤直径>2cm、临床分期Ⅱ~Ⅲ期、有淋巴结转移患者PD-L1阳性表达率(76.2%、55.2%、65.5%)高于肿瘤直径≤2cm(34.4%)、临床分期Ⅰ期(39.3%)及无淋巴结转移患者(33.9%)(P<0.05);EGFR突变型肺腺癌36例,EGFR野生型肺腺癌49例;EGFR突变型肺腺癌组织中PD-L1阳性表达率(58.3%)高于EGFR野生型(34.7%)(P<0.05);CD8阳性肺腺癌患者组织中PD-L1阳性表达率(25.0%)低于CD8阴性患者(56.6%)(P<0.05);PD-L1阳性表达与EGFR突变呈正相关(r=0.264,P=0.011),与T淋巴细胞浸润呈负相关(r=-0.575,P=0.010)。结论PD-L1可作为判断肺腺癌预后的新指标,PD-L1、EGFR及T淋巴细胞联合检测可为肺腺癌治疗提供新的分子依据。