复方人参健体方的处方优化及其抗疲劳活性和急性毒性研究

目的:优化复方人参健体方4种组方药材(人参、山药、枸杞子、益智仁)的配比,并考察其抗疲劳活性及急性毒性。方法:通过水提取、浓缩、减压干燥制备复方人参健体方水提物。采用单因素试验,以小鼠负重游泳时间为指标,考察人参、山药、枸杞子、益智仁的处方量等4个因素的影响。在单因素试验的基础上,以小鼠负重游泳时间和运动后血清尿素氮含量、肝糖原含量和血乳酸曲线下面积的综合评分为评价指标,采用Box-Behnken响应面法优化处方配比。将小鼠分为空白对照组(水)、阳性对照组(人参红景天胶囊,0.135 g/kg)和复方低、中、高剂量组[最优配比复方人参健体方提取物(以下简称"优化复方")4.08、8.16、12.24g/kg,以生药量计],灌胃给药或水20 m L/kg,每日1次,连续30 d。以给药后小鼠的负重游泳时间和运动后血清尿素氮含量、肝糖原含量和血乳酸曲线下面积的综合评分验证优化复方的抗疲劳活性;同时,以复方中剂量组小鼠的测定数据计算综合评分,比较其与理论预测值的差距。对小鼠灌胃优化复方(总剂量为16.00 g/kg,以提取物计),连续14 d观察并记录小鼠的一般状态、体质量变化、中毒特征以及死亡情况等,并测定半数致死量(LD50)和最大耐受剂量(MTD)。结果:复方人参健体方的最优处方配比为人参1.5 g、山药10 g、枸杞子10 g、益智仁3 g。抗疲劳活性验证试验显示,优化复方较空白对照组可显著延长小鼠负重游泳时间,降低血清尿素氮含量和血乳酸含量及曲线下面积(低剂量组除外),提高肝糖原含量(P<0.05或P<0.01);且复方中剂量组的综合评分平均值为96.95分,与理论预测值97.01分仅相差0.06%。急性毒性实验显示,小鼠均未见死亡现象发生,优化复方的经口MTD均大于15 g/kg,属无毒级。结论:优化的复方人参健体方对小鼠具有显著的抗疲劳活性,且未见明显毒副作用。

葛根蛋白提取工艺及其体外抗氧化性研究

以葛根为原料提取葛根蛋白,以葛根蛋白提取率为指标对4种不同提取工艺进行对比,采用Box-Behnken响应面试验设计,优化葛根蛋白提取工艺,对葛根蛋白进行体外抗氧化分析,并以十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)测定葛根蛋白分子量。结果表明葛根蛋白最佳提取工艺为:提取温度45℃,提取时间2 h,料液比1∶20(g/mL),pH3.5;测得葛根蛋白提取率为11.73%;抗氧化试验表明,葛根蛋白具有良好的羟基自由基和DPPH自由基清除效果,其清除率分别为(88.62±0.73)%、(51.15±0.32)%,且清除DPPH自由基和羟基自由基的IC50分别为0.78、1.89 mg/mL,并具有一定的还原能力;SDS-PAGE试验结果可清晰看见葛根蛋白条带,分子量主要分布在14.0 kDa~43.0 kDa。

葛根抗氧化活性有效部位的筛选研究

对葛根提取物及其萃取物进行活性成分含量测定及抗氧化活性和总还原能力的测定。以DPPH自由基清除能力、羟基自由基清除能力和总还原能力代表其抗氧化活性,比较葛根各提取物及萃取物的抗氧化活性。采用Origin软件中的多项拟合计算活性试验的IC50值和A0.7值,并采用Pearson相关性分析测定活性成分含量与抗氧化活性相关性。最终测得结果表明,葛根70%乙醇提取物中含量最高的是总黄酮,含量为326.1 mg/g,水提物中总多糖含量最高,为183.9 mg/g。葛根提取物及其萃取物抗氧化活性顺序为:乙酸乙酯相>正丁醇相>水相。葛根70%乙醇提取物的乙酸乙酯萃取物的抗氧化活性最优。

中药薤白药食同源功效探析

薤白作为药食同源两用品,具有降血脂、抗肿瘤和解痉平喘等功效。文章通过对其生药来源、化学成分、药理作用和药食两用的价值来对薤白进行研究,通过查找CFDA、soopat、中国知网、维普、PubMed等数据库的相关资料对薤白的研究现状进行归纳总结。生药及历史记载方面:薤白早在《神农本草经》中就有记载,一直延续至今;活性成分方面,薤白主要含有甾体皂苷、多糖、生物碱、挥发油及其他类成分;药理活性方面,薤白具有抑制血小板凝集、抗菌、抗氧化等作用;开发利用方面,薤白复方药物申报的专利主要用于治疗心脏早搏等疾病,其提取物及有效组分用于防治代谢综合征或2型糖尿病;应用价值方面,薤白可以是防腐剂,也可以是调味料,丰富了人们的日常生活所需。

复方人参免疫增强方配比优选及其对小鼠的免疫活性和急性毒性研究

目的:优选复方人参免疫增强方4味组方药材(人参、黄芪、黄精、枸杞)的最佳配伍比例,并对最佳配比提取物进行免疫活性及急性毒性研究。方法:在采用细胞活性试验筛选4味药材生药量浓度范围的基础上,以不同生药量浓度的药材提取物作用后小鼠RAW264.7巨噬细胞中的一氧化氮(NO)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量为指标,采用均匀设计法确定复方人参免疫增强方各药材的最佳配比。取小鼠240只,随机分为4批,每批60只,均随机分为空白组(生理盐水)、模型组(生理盐水)、阳性药物组[左旋咪唑,4 mg/(kg·d)]和复方人参免疫增强方最佳配比提取物低、中、高剂量组[0.952 8、1.905 6、2.858 4g/(kg·d)],每组 10 只,灌胃给药,qd,连续给药 30 d;除空白组外,其余组小鼠于首次给药后第 24 天时腹腔注射环磷酰胺[40mg/(kg·d)],qd,连续注射3 d以建立免疫低下模型。通过测定各组小鼠脏器系数,脾淋巴细胞转化能力,血清溶血素、IL-2、IgM、IgG、IgA含量,腹腔巨噬细胞吞噬功能,来评价最佳配比提取物的免疫活性。另取小鼠20只,灌胃最佳配比提取物20 mL/kg,给药2次,以经口最大耐受剂量(MTD)考察其急性毒性。结果:复方人参免疫增强方的最佳配比为人参、黄芪、黄精、枸杞生药质量比 1 ∶ 2 ∶ 2 ∶ 4。免疫活性实验结果显示,该方最佳配比提取物可显著提高小鼠的脏器指数,脾淋巴细胞增殖能力,血清中溶血素、IL-2、IgM、IgG、IgA含量以及腹腔巨噬细胞吞噬功能(P<0.05或P<0.01);急性毒性实验结果显示,其经口MTD均大于15 g/kg,口服无毒性。结论:复方人参免疫增强方最佳配比提取物可显著增强小鼠的免疫功能,且口服无毒性。

响应面法优化复方降脂片的成型性工艺及其降脂活性

目的:优化复方降脂片的成型性工艺,并对其降脂活性进行研究。方法;采用Box-Behnken响应面法,以复方降脂片提取物为主药,以脆碎度、崩解时限及溶出度为评价指标,对主药与填充剂的比例、崩解剂的用量及乙醇的浓度为影响因素,优化复方降脂片的成型性工艺。同时采用高脂血症大鼠模型评价复方降脂片的降脂活性。结果:最优成型性工艺为:主药与辅料比例为80∶15,崩解剂用量为5%,乙醇浓度为80%。验证实验结果:各批次样品综合评分为94.01%,与预测值相对误差为1.49%,且脆碎度和崩解时限均符合药典规定;降脂活性实验:与高脂模型组的实验数据相比,复方降脂片各剂量组大鼠血清中,除高密度脂蛋白(HDL-C)外,其他指标均呈下降趋势,其中高剂量组各指标水平均呈极显著下降(P<0.01);中剂量组AST、ALT水平呈极显著下降(P<0.01),TC、TG及LDL-C的水平显著下降(P<0.05),HDL-C水平增加,与模型组差异显著(P<0.05)。结论:本实验优选的成型性工艺,稳定可行,且复方降脂片降脂活性良好,本研究结果为复方降脂片的生产开发提供可靠依据。

多指标综合评分法优选复方降脂缓释片的水提醇沉工艺及活性研究

目的:多指标综合优选复方降脂缓释片的水提醇沉工艺及其降低血脂的活性研究。方法:选择丹酚酸B、荷叶碱、总黄酮提取率为评价指标,采用多指标综合评分的方法,以提取时间、提取次数和溶媒量为影响因素,Box-Behnken响应面法优化水提工艺;以醇沉浓度、醇沉时间和浸膏相对密度为影响因素,正交试验优选醇沉工艺;采用动物高脂血症模型对复方降脂缓释片提取物进行活性研究。结果:最佳水提醇沉工艺为10倍加水量、提取3次,每次1.5 h,提取温度100℃,合并提取液,浓缩至浸膏相对密度1.15 g·mL-1(40℃),加入乙醇使醇量达到70%,放置12 h;通过高脂血症模型实验研究得出复方降脂缓释片提取物能明显降低血脂。结论:优选后的水提醇沉工艺稳定可行;复方降脂缓释片提取物可明显降低血脂。为确保开发出安全有效、适合工业化生产的复方降脂缓释片提供了实验依据与技术支撑。

桔梗美白活性部位的提取分离及活性初步研究

目的以桔梗药材为原料,以抗氧化(DPPH自由基、ABTS自由基清除实验)及抑制酪氨酸酶、透明质酸酶活性作为指标,筛选桔梗美白活性部位。方法该研究通过不同提取分离技术得到不同桔梗提取物及萃取物,通过抗氧化实验及抑制酶活性实验,筛选得到抗氧化及抑制酪氨酸酶、透明质酸酶活性最佳的部位,并测定其中的有效成分进行含量测定。结果各提取物和萃取物中,萃取物Ⅻ的抗氧化能力最强,对DPPH自由基和ABTS自由基的清除能力达到98.03%和84.30%,对酪氨酸酶、透明质酸酶的抑制率达到97.71%、90.18%。结论经筛选得到的桔梗美白活性部位,为抗氧化及酶抑制能力最强的萃取物Ⅻ,为今后寻找桔梗美白活性物质奠定基础,为进一步科学合理开发利用桔梗奠定了良好基础。

荷丹三七降脂片对高脂血症大鼠脂代谢及Nrf2、γ-GCS基因mRNA表达的影响

目的:探讨荷丹三七降脂片对高脂血症大鼠血脂代谢的影响。方法:将72只大鼠随机分为正常对照组、高脂血症模型组、荷丹三七降脂片高剂量组、中剂量组、低剂量组、阳性对照组(辛伐他汀)6个小组,每小组12只。采用高脂饲料建立大鼠高脂血症模型,连续给药30 d后,测体质量、肝脏湿重和肝脏系数;取血测定各剂量组高脂血症大鼠血清中总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)水平;测定肝组织的抗氧化指标:超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)、总抗氧化能力(T-AOC);采用实时荧光定量RT-PCR法测定高脂血症大鼠肝组织中核因子NF-E2相关因子(nuclear factor erythroid 2-related factor2,Nrf2)、谷氨酰半胱氨酸合酶(γ-glutamylcysteine synthethase,γ-GCS)mRNA表达;显微镜下观察肝组织形态学变化;通过小鼠急性毒性试验记录小鼠状况。结果:与模型组比较,荷丹三七降脂片各剂量组显著降低TC、TG、LDL-C、MDA水平(P<0.01,P<0.05);显著升高SOD、CAT、GSH-Px、T-AOC(P<0.01,P<0.05)以及肝组织中的Nrf2、γ-GCS mRNA表达显著升高(P<0.01,P<0.05)并明显减轻肝组织病理损伤;急性毒性试验表明荷丹三七降脂片无毒性。结论:荷丹三七降脂片安全无毒,对高脂血症大鼠具有良好的辅助降血脂及肝脏保护作用,其可能作用机制是通过调节Nrf2基因表达的作用,促进γ-GCS表达,进而启动机体的抗氧化防御系统,减轻氧化应激对机体的损害作用。

采用Box-Behnken响应面法优化金鉴灵软膏的制备工艺及其初步药效研究

目的:优化金鉴灵软膏制备工艺,并对其治疗烧烫伤的作用进行初步药效研究。方法:选择姜黄素提取率为评价指标,以煎炸时间、煎炸温度、加油量、浸泡时间为影响因素进行单因素实验,在单因素分析的基础上增加皮肤愈合率为评价指标,Box-Behnken响应面优化制备工艺。采用深Ⅱ度烫伤模型,通过测定创面愈合率及愈合时间等指标,考察金鉴灵软膏对创面愈合情况的影响。同时通过ELISA法测定血清中TNF-α和IL-1水平,初步探讨其作用机制。结果:最优制备工艺为加麻油4倍量,浸泡23 h后,于144℃煎炸64 min;金鉴灵软膏组对于烫伤小鼠受损皮肤的愈合效果显著,血清TNF-α和IL-1水平均下降。结论:本实验优选的制备工艺稳定可行,为确保开发出安全有效、适合工业化生产的外用制剂提供了实验依据与技术支撑。

外用制剂金鉴灵软膏的提取工艺及初步药效研究

目的 优化金鉴灵软膏提取工艺及其对皮肤损伤治疗效果的药效研究。方法 选择姜黄素提取率为评价指标,以煎炸时间、煎炸温度、加油量、浸泡时间为影响因素,Box-Behnken响应面优化提取工艺,采用深Ⅱ度烫伤模型,通过测定创面愈合率及愈合时间等指标,考察金鉴灵软膏对创面愈合情况的影响。同时通过ELISA法测定血清中TNF-α,IL-1水平,初步探讨其作用机制。结果 最优提取工艺为:加麻油4倍量,浸泡23h后,于144℃下煎炸64min;金鉴灵软膏组对于烫伤小鼠受损皮肤的愈合效果显著,血清TNF-α,IL-1水平均下降。结论 实验优选的提取工艺,稳定可行,为确保开发出安全有效、适合工业化生产的外用制剂提供了实验依据与技术支撑。

BOX-Behnken响应面分析法优选旗参枸杞颗粒提取工艺及免疫活性研究

目的:利用响应面法优选旗参枸杞颗粒提取工艺,并考察其提高机体免疫力的能力。方法:以总多糖、总皂苷、黄芪甲苷提取率为评价指标,采用多指标综合评分法,以提取时间、次数、温度、溶媒量为影响因素,采用BOX-Behnken响应面法优化旗参枸杞颗粒水提工艺;采用双抗体夹心ELISA法及小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验对旗参枸杞颗粒提取物进行免疫活性研究。结果:优选最佳水提工艺为:回流时间1.5h,溶媒量4倍,提取温度100℃,提取次数2次;旗参枸杞颗粒提取物可明显提高机体的免疫力。结论:优选后的水提工艺科学可靠,为旗参枸杞颗粒的研究开发提供参考依据及技术支持。

源于经典方剂的抗疲劳方剂筛选及其功效研究

目的:筛选并配伍出具有良好抗疲劳效果的方剂。方法:以负重游泳时间、爬杆时间为指标进行方剂筛选并优选出处方最佳配伍,为分析筛选出的最佳配伍方剂与方剂中各药材的相关性建立10批最佳配伍方剂的指纹图谱,以游泳时间、爬杆时间、游泳后的血清尿素氮(BUN)、肝糖原、血乳酸(LD)、三磷酸腺苷(ATP)、超氧化歧化酶(SOD)为指标对最佳配伍方剂进行抗疲劳活性研究与验证,通过小鼠急性毒性试验记录小鼠状况。结果:筛选出的"鹿茸酒"与"独参汤"二者的组合方能显著延长小鼠负重游泳时间以及爬杆时间,组合方的最佳配比即鹿茸∶人参∶山药=1∶3∶18缓解疲劳效果明显,能显著提高爬杆实验、负重游泳实验运动时间,提高小鼠体内肝糖原、ATP以及SOD含量,降低BUN、LD含量,建立10批最佳配比组合方提取物对照指纹图谱,从中确定9个共有峰,并全部归属到各药材,急性毒性试验表明该方剂无毒性。结论:筛选并配伍出的方剂具有良好的抗疲劳效果,且安全无毒,建立该方剂指纹图谱证明方剂与各药材间的相关性。