旋毛虫成虫三种抗原SDS-PAGE及Western-blot比较研究

目的研究大理猪源旋毛虫(Trichinella spiralis)成虫虫体可溶性抗原、表面抗原和排泄分泌抗原3种抗原的蛋白组分及其之间的差异,比较分析其免疫反应性。方法以十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和蛋白印迹对成虫3种抗原进行蛋白组分及其免疫反应性分析。结果十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果:虫体可溶性抗原显示29条蛋白带,分子量范围在112kDa^10kDa之间,其中主带13条;表面抗原显示4条主要蛋白带,分子量分别为50、48、40、34kDa;排泄分泌抗原显示17条蛋白带,分子量范围在120~14kDa之间,其中主带6条,分子量分别为120、64、43、40、35、33kDa。蛋白印迹结果:虫体可溶性抗原出现13条反应条带,其中分子量为81、40、37、33、30kDa的条带着色明显;表面抗原出现4条反应条带,其分子量分别为50、48、40、34kDa;排泄分泌抗原显示7条反应带,其中43、40、27、18kDa着色明显。结论旋毛虫成虫虫体可溶性抗原与排泄分泌抗原较表面抗原蛋白组分复杂,3者主带部分属低分子量区;免疫反应性的强度表面抗原和排泄分泌抗原高于虫体可溶性抗原,说明前两种抗原是旋毛虫成虫刺激机体产生免疫应答的主要靶抗原。

旋毛虫抗原的研究进展

旋毛虫抗原分为表面抗原、排泄-分泌抗原(ES抗原)、虫体抗原和杆细胞颗粒相关抗原,本文综述了其分类、化学组成及其功能、免疫保护性和重组抗原的研究情况。

以岗位胜任力为导向的临床生物化学检验教学改革研究

临床生物化学检验是医学检验技术专业的主干课程之一,具有较强的实践性和应用性。为了提高医学检验技术专业学生的岗位胜任力,在教学过程中,对课程体系、教学方法、实验教学等进行改革,以期提高教学质量,提升学生岗位技能和综合素质,满足临床需求。

生物化学与生化检验教学的改革与实践

由于医学检验专业"五改四"的变化,课时压缩,给教学带来新的难题。本课题组对生化和生化检验教学进行了课程整合和教学改革,从加强操作训练、丰富授课手段、举办技能大赛、改进实验项目和开展座谈问卷等方面着手,进行了系统深入的教育教学改革与实践,力争做好两门课程的衔接。通过系列措施,取得了非常好的教学效果,学生也从中受益匪浅。

旋毛虫成虫与肌幼虫排泄分泌抗原蛋白组分的比较分析

目的比较大理猪源旋毛虫(Trichinela spiralis)成虫与肌幼虫排泄分泌抗原(Excretory-secretory antigens,ES)的蛋白组分差异,并进一步分析其反应原性,为分离筛选出免疫原性和反应原性强的旋毛虫抗原成分奠定基础。方法分别收集和纯化旋毛虫成虫、肌幼虫虫体,制备ES,采用SDS-PAGE分析成虫和肌幼虫ES蛋白成分,Western blot分析其反应原性。结果经SDS-PAGE分析,旋毛虫成虫ES显示17条蛋白条带,相对分子质量范围在120000～14000之间,其中主带6条,相对分子质量分别为120000、64000、43000、40000、35000、33000;旋毛虫肌幼虫ES显示20条蛋白条带,相对分子质量范围在112000～10000之间,其中主带11条,相对分子质量分别为112000、66000、56000、55000、53000、49000、45000、43000、25000、21000、10000。Westernblot分析表明,旋毛虫成虫ES抗原显示7条反应带,相对分子质量分别为43000、40000、35000、27000、19000、18000、14000,其中相对分子质量43000、40000、27000、18000的条带着色明显;旋毛虫肌幼虫ES抗原显示14条反应带,相对分子质量范围在74000～12000之间,其中相对分子质量53000、49000、45000、43000、35000、27000、18000、12000的条带显色明显。结论旋毛虫成虫和肌幼虫ES抗原蛋白组分均复杂,有共同组分,也有不同组分,旋毛虫ES抗原具有较强的反应原性,是旋毛虫病研究的重要候选抗原。

旋毛虫肌幼虫3种抗原的蛋白组分及免疫反应性比较研究

目的:研究大理猪源旋毛虫肌幼虫(Trichinela spiralis musclelarvae)3种抗原:虫体可溶性抗原(body soluble anti-gen,BSA)、表面抗原(surface antigen,SA)和排泄分泌抗原(excretory-secretory antigen,ESA)的蛋白组分及其之间的差异,并进一步比较分析其免疫反应性,为分离和筛选出免疫原性和免疫反应性强的旋毛虫肌幼虫抗原成分打基础。方法:采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),对肌幼虫3种抗原蛋白成分进行分析;采用蛋白印迹(Western-blot)对成虫3种抗原蛋白组分进行免疫反应性分析。结果:SDS-PAGE电泳结果:BSA显示30条蛋白染色条带,分子量范围在100 kDa～12 kDa之间,其中主带11条;SA显示10条主要蛋白染色条带,分子量范围在105 kDa～28 kDa之间;ESA显示20条蛋白染色条带,分子量范围在112 kDa～10 kDa之间,其中主带11条。Western-blot结果:BSA出现25条反应条带,其中分子量为75 kDa、66 kDa、63 kDa、55 kDa、49 kDa、45 kDa、37 kDa、28 kDa、20 kDa、16 kDa的条带着色较深;SA出现7条反应条带;ESA显示14条反应带,其中53 kDa、49 kDa、45 kDa、43 kDa、35 kDa、27 kDa、18 kDa、12 kDa显色明显。结论:旋毛虫肌幼虫BSA与ESA较SA蛋白组分复杂,三者主带部分属低分子量区;免疫反应性的强度SA和ESA高于BSA,说明前两种抗原是旋毛虫肌幼虫刺激机体产生免疫应答的主要靶抗原。

旋毛虫成虫表面抗原的SDS-PAGE和Western blot分析

目的研究大理猪源旋毛虫成虫表面抗原(surface antigen,SA)的蛋白组分,分析其抗原性。方法采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对旋毛虫成虫SA蛋白成分进行分析,并采用蛋白印迹(Western blot)分析其抗原性。结果旋毛虫成虫SA经SDS-PAGE,电泳显示4条主要蛋白条带,分子质量单位分别为50、48、40和34ku;经Western blot检测,上述4个蛋白组分均能被大鼠抗旋毛虫血清识别。结论旋毛虫成虫SA中主要含有50、48、40和34ku等4个蛋白组分,均具有抗原性。

旋毛虫成虫与肌幼虫表面抗原的比较分析

目的比较大理猪源旋毛虫(Trichinela spiralis)成虫与肌幼虫表面抗原(Surface antigen,SA)的蛋白组分差异,并进一步分析其免疫反应性,为分离和筛选出免疫原性和免疫反应性强的旋毛虫抗原成分提供依据。方法采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),对成虫和肌幼虫SA蛋白成分进行分析,并进一步采用蛋白印迹(Western-blot)对其免疫反应性分析比较。结果旋毛虫成虫SA显示4条主要蛋白染色条带,分子量分别为50kDa、48kDa、40kDa和34kDa,旋毛虫肌幼虫SA显示10条主要蛋白染色条带,分别为105kDa、99kDa、80kDa、63kDa、55kDa、48kDa、35kDa、28kDa、24kDa和21kDa。;Western-blot检测结果表明,旋毛虫成虫SA出现4条反应条带,其分子量分别为50kDa、48kDa、40kDa和34kDa,旋毛虫肌幼虫SA出现7条反应条带,分子量分别为105kDa、99kDa、80kDa、55kDa、48kDa、35kDa和28kDa,其中48kDa和35kDa显色明显。结论旋毛虫成虫SA与肌幼虫SA都含有分子量为48kDa的蛋白组分,且两种抗原组分均具有较强的免疫反应性。

旋毛虫新生幼虫可溶性抗原的分析

目的初步分析云南大理旋毛虫不同时龄新生幼虫可溶性抗原的蛋白组分及其免疫反应性。方法以十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—PAGE）和蛋白印迹（Westernblot）对旋毛虫不同时龄新生幼虫可溶性抗原进行蛋白组分及其免疫反应性分析。结果SDS．PAGE结果显示：24h旋毛虫新生幼虫可溶性抗原显示36条蛋白染色条带，相对分子质量（幔）范围在160000—10000之间，其中主带8条，帆分别为73000、64000、58000、54000、46000、40000、34000、25000；48h旋毛虫新生幼虫可溶性抗原显示40条蛋白染色带，肘，范围在172000～10000之间，其中主带17条，恤分别为120000、102000、89000787000779000、74000、72000、64000、58000、54000、46000、40000、34000、32000、25000、18000、10000。Westernblot结果：以旋毛虫感染大鼠血清检测，24h旋毛虫新生幼虫可溶性抗原出现7条反应条带，恤分别为89000、78000、64000、58000、40000、34000、25000；48h新生幼虫可溶性抗原出现14条反应条带，M1分别为89000、87000、79000、74000、72000、64000、58000、40000、38000、34000、32000、25000、18000、10000。而正常大鼠血清在相应位置均无特异性反应条带出现。结论云南大理旋毛虫24、48h新生幼虫可溶性抗原存在7个共同蛋白组分，其中48h新生幼虫虫体可溶性抗原中存在24h新生幼虫可溶性抗原没有的5个蛋白组分，新生幼虫虫体可溶性抗原的蛋白组分随时龄的增大而增多。旋毛虫感染大鼠血清均可识别24、48h新生幼虫可溶性抗原中6个蛋白组分，说明这些蛋白组分具有较强的免疫反应性。

旋毛虫成虫排泄分泌抗原检测唾液中抗旋毛虫IgG抗体的研究

目的评价旋毛虫（Trichinella spiralis）成虫排泄分泌抗原（adult worm excretory—secretory antigen，AWESA）作为诊断抗原检测旋毛虫感染日本大耳兔唾液中抗旋毛虫IgG抗体的可行性。方法建立旋毛虫感染日本大耳兔和对照组兔动物模型，采集感染前和感染后1～6周兔唾液和血清以及对照组兔唾液和血清。制备AWESA，建立AWESA作为诊断抗原的间接酶联免疫吸附试验（enzyme—linked immunosorbent assay，ELISA），以市售旋毛虫IgG抗体检测试剂盒作为对照，测定感染前和感染后1～6周兔唾液和血清以及对照组兔唾液和血清中抗旋毛虫IgG抗体。AWESA和试剂盒测得的唾液A值和血清4值进行线性相关分析，AWESA和试剂盒测得的唾液阳性率和血清阳性率分别进行，检验。结果AWESA检测唾液和血清特异性IgG抗体阳性率依次为0、5％、20％、40％、60％、85％、90％，0、30％、60％、85％、95％、100％、100％，除感染后0、1、2周外其余各周唾液A值与血清A值呈显著线性相关（P〉0．05、P〉0．05、P〉0．05、P〈0．05、P〈0．05、P〈0．05、P〈0．05）。市售旋毛虫IgG抗体检测试剂盒检测旋毛虫感染前和感染后兔唾液和血清中特异性IgG抗体阳性率依次为0、15％、20％、40％、55％、75％、90％，0、35％、60％、95％、95％、100％、100％，除0、1、3周外其余各周唾液A值与血清A值呈线性相关（P〉0．05、P〉0．05、P〈0．05、P〉0．05、P〈0．05、P〈0．05、P〈0．05）。结论AWESA与市售试剂盒检测唾液和血清中抗旋毛虫IgG抗体的阳性率具有一致性。

“三支一扶”大学生满意度影响因素探析——基于对三支一扶大学生的调研

河北省从2006年开始实施“三支一扶”计划,成效巨大,但仍存在一些问题,研究“三支一扶”大学生满意度影响因素可以更有针对性的为优化“三支一扶”相关政策和管理措施提供参考。文章针对我省部分“三支一扶”大学生进行调研,发现大学生对“三支一扶”计划满意程度主要受以下因素影响:政策了解程度、报考动机、薪酬待遇、期满就业保障、专业应用、工作认同感与成就感、在岗离岗培训等,而工作压力、办公生活条件等因素影响较弱。在此基础上,提出了提升“三支一扶”大学生满意度的建议。