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结核杆菌HSP70在耻垢分枝杆菌中的表达及其免疫原性研究 被引量:18
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作者 程继忠 郑波 +2 位作者 肖红梁 驹卿 皇甫永穆 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第5期337-341,共5页
目的在重组分枝杆菌中表达编码人结核杆菌(TB)热休克蛋白70(HSP70)的DnaK基因,并观察其对小鼠的免疫效应。方法采用基因工程和免疫学技术将DnaK基因及其两侧的表达调控区一起从质粒pMT-70中切出,经末端修... 目的在重组分枝杆菌中表达编码人结核杆菌(TB)热休克蛋白70(HSP70)的DnaK基因,并观察其对小鼠的免疫效应。方法采用基因工程和免疫学技术将DnaK基因及其两侧的表达调控区一起从质粒pMT-70中切出,经末端修饰后装入大肠杆菌-分枝杆菌穿梭质粒pBCG-2000中,构建成新的重组质粒pBCG-TB70,并用以转化耻垢分枝杆菌及大肠杆菌,用Westernblot检测表达的HSP70;以重组耻垢分枝杆菌分别经皮下及腹腔免疫小鼠,用淋巴细胞刺激指数(SI)反映细胞增殖能力,以NO法检测巨噬细胞吞噬活性,并检测血清中特异性抗TBHSP70的抗体。结果TBHSP70能在分枝杆菌中表达,表达量占菌体总蛋白量的10%,不能在大肠杆菌中表达;重组耻垢分枝杆菌以106CFU的剂量经皮下免疫小鼠后,可使小鼠脾淋巴细胞刺激指数(SI)和腹腔巨噬细胞吞噬活性增高(P<0.05),并能刺激机体产生特异性抗TBHSP70的抗体,腹腔免疫激发的抗体滴度较皮下免疫为低,而SI无明显改变。结论构建的表达质粒pBCG-TB70能在耻垢分枝杆菌中表达HSP70,该重组菌具有较强的免疫原性。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 基因转移 免疫原性 表达
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