可注射封闭性水凝胶力学性质与其止血性能的相关性

目的探究封闭性水凝胶力学性质与其止血性能之间的关系。方法通过测量透明质酸/明胶水凝胶凝固时间、弹性模量、黏性模量、顶破强度和止血性能,与医用纤维蛋白胶止血剂对比,提出凝固时间和力学参数,用于判断封闭性水凝胶应用于临床止血的可行性。结果凝固时间长以及弹性模量、黏性模量和顶破强度小的水凝胶只可能对小出血量起控制作用,凝固时间短、弹性模量、黏性模量和顶破强度大的水凝胶能有效减少大出血量情况下的血液损失。结论水凝胶的凝固时间、弹性模量、黏性模量以及顶破强度与其止血性能有关,如果水凝胶封闭止血要达到纤维蛋白胶的止血水平,其凝固时间应小于120 s,弹性模量大于600 Pa,黏性模量大于120 Pa;对于直径2 mm的组织模型破损,顶破强度要不低于10.7 kPa,最好高于16.0 kPa。

过氧乙酸/乙醇对异体皮性能的影响

背景:过氧乙酸/乙醇是一种理想的动物源及同种异体组织病毒灭活试剂,其对病原微生物杀灭效果显著,但是未见其对异体皮其他性能影响的研究报道。目的:研究过氧乙酸/乙醇处理对异体皮性能的影响。方法:配制3种不同浓度的过氧乙酸/乙醇溶液,2.3 g/L过氧乙酸+体积分数24%乙醇(设为P/E-1)、1.8 g/L过氧乙酸+体积分数4.8%乙醇(设为P/E-2)、15.33 g/L过氧乙酸+体积分数24%乙醇(设为P/E-3)。采用不同浓度的过氧乙酸/乙醇溶液分别处理异体皮15,30,45,60 min,通过外观、组织学染色、力学性能、糖胺聚糖含量检测等评价皮肤结构性能变化,并检测经处理后皮肤的化学试剂残留情况和细胞毒性。结果与结论:①各浓度过氧乙酸/乙醇溶液处理不同时间的异体皮外观无明显差异;②苏木精-伊红染色显示,与未处理的异体皮相比,P/E-1与P/E-2处理15 min后的皮肤细胞外基质结构无明显变化,处理15 min以上的皮肤细胞外基质结构相对疏松,但保留了结构的完整性;P/E-3处理15 min时,皮肤真皮层中出现大孔,处理15 min以上后真皮层出现较多孔洞,细胞外基质结构被严重破坏;③同一浓度溶液处理下,处理时间越长,皮肤的糖胺聚糖含量、拉伸强度和弹性模量越低;相同处理时间下,P/E-1处理组拉伸强度最大、P/E-3处理组最小,P/E-2处理组断裂伸长率最大、P/E-3处理组最小,P/E-3处理组韧性最小;④试剂残留检测显示,过氧乙酸和乙醇可从异体皮去除,残留量在规定的限度要求内,无明显的细胞毒性;⑤结果显示在相同的处理时间下,P/E-1组皮肤的性能及结构与原材料最接近。

夹带剂对超临界萃取技术处理肌腱的影响

[目的]研究不同夹带剂对超临界萃取技术(supercritical CO2 fluid extraction, SCCO2)处理肌腱的影响。[方法]将同种异体肌腱随机分为4组,A组为未经SCCO2处理的同种异体肌腱;B组为以无水乙醇作为夹带剂经SCCO2处理的同种异体肌腱;C组为以无水乙醇+1%乙二胺四乙酸(EDTA)作为夹带剂经SCCO2处理的同种异体肌腱;D组为以(环氧乙烷/环氧丙烷)共聚醚二醇(EO/PO)作为夹带剂经SCCO2处理的同种异体肌腱。对4组肌腱行力学测试、组织学观察和体外细胞增殖毒性试验。[结果] 4组同种异体肌腱的最大载荷差异无统计学意义(P>0.05);与A组相比,D组的抗拉强度变小(P>0.05),且弹性模量显著变小以及断裂伸长率显著增大(P<0.05),而B组和C组上述指标无显著变化(P>0.05)。组织学观察显示,D组肌腱细胞外基质完整且无可见细胞核。体外细胞增殖试验显示经SCCO2处理的同种异体肌腱在B组、C组和D组均未抑制体外细胞增殖。[结论]在添加(环氧乙烷/环氧丙烷)共聚醚二醇作为夹带剂的SCCO2处理方法能获得理想的无细胞毒性脱细胞同种异体肌腱材料。

脱钙骨基质中BMP-2含量与其体内/外成骨活性的相关性研究

目的探讨脱钙骨基质(demineralized bone matrix,DBM)中BMP-2含量与其体内/外成骨活性的相关性,以期选择一种简易、便捷的评价DBM成骨活性的方法。方法取9具人尸体左侧股骨中段组织,采用动态脱钙工艺制备DBM(S1~S9),同时制备灭活DBM(对照)。分别采用蛋白酶抑制剂法、胶原酶法、盐酸胍/EDTA法、RIPA裂解液法提取S1~S9以及灭活DBM中BMP-2,测量比较不同DBM间BMP-2含量差异。取S1~S9以及灭活DBM,分别与小鼠胚胎成骨细胞MC3T3-E1共培养,采用MTT法及荧光染色检测细胞增殖,同时检测ALP活性。取30只BALB/c雄性裸小鼠分为10组,分别为S1~S9 DBM组(S1~S9组)以及灭活DBM组(对照组),每组3只。于各组小鼠双侧后肢大腿中部制备肌袋,植入对应DBM材料,术后4周取材行HE染色观察并半定量评价(新骨形成评分)。结果不同供体骨制备的DBM,其BMP-2含量存在差异;同一供体骨制备的DBM,经不同提取方法获得的BMP-2含量也不同,其中盐酸胍/EDTA法提取效率最高。体外成骨性能评价,共培养后各时间点S4、S6组细胞增殖、ALP活性均较其他组明显增高(P<0.05),且7 d时S4组细胞增殖最显著(P<0.05);荧光染色示各组成骨细胞状态均良好,但S1、S2、S3、S4、S6组成骨细胞多于其他组。体内异位成骨诱导实验示,术后4周S1~S6组植骨区域均可见软骨和新骨生成,并且随着BMP-2含量增加,材料诱导新骨生成越多,新骨形成评分较高(P<0.05);其中S4、S6组骨新生区域含有大量软骨细胞和成骨细胞。结论 BMP-2定量检测结合体外成骨细胞增殖分化实验可用于评估DBM成骨活性。