金黄地鼠腹侧前列腺来源蛋白结合精子表面的实验研究

目的:探讨前列腺分泌蛋白是否可结合于精子表面。方法:以金黄地鼠作为研究对象,应用间接免疫荧光和亲和素标记的蛋白转印方法检测前列腺分泌蛋白是否可结合于精子。制备的抗前列腺粗提取物多克隆抗体,间接免疫荧光技术检测体外与前列腺分泌物孵育的附睾精子,以及体内分别与含前列腺及去除前列腺雄鼠交配后收集的子宫腔内和输卵管腔内精子的前列腺成分抗原。前列腺提取物经电泳分离转膜后和生物素标记附睾精子膜蛋白作用,测定在体外前列腺分泌蛋白能否与附睾精子膜结合。实验分为对照组、附属性腺全去组、腹侧前列腺组、去除腹侧前列腺组。结果:前列腺抗原成分的免疫反应局限在精子体中部表面,而精子头、颈部未见阳性反应。在体外(80±5)%附睾精子与前列腺分泌蛋白结合,在体内与对照组雄鼠交配后收集的子宫腔内精子与前列腺分泌蛋白结合精子阳性率为(30.0±4.6)%,与去除腹侧前列腺组(3.6±1.4)%比较差异有显著性(P<0.01),在体内与对照组雄鼠交配后收集的输卵管腔内精子与前列腺分泌蛋白结合精子阳性率为(16.0±3.6)%,与去除腹侧前列腺组精子(3.2±1.4)%比较差异有显著性(P<0.01)。前列腺分泌蛋白的电泳印记膜与生物素标记附睾精子膜蛋白孵育后显色分析结果可见5条阳性反应带。结论:金黄地鼠的前列腺分泌蛋白可结合于精子体中部表面,前列腺分泌蛋白中至少有5个组分可与精子膜蛋白结合。

加强医学生应对突发公共卫生事件能力的培养——“非典”对广东医学教育的启迪

SARS流行期间 ,广东省在治疗患者的过程中曾有多名医务人员感染 ,反映了医疗、防疫人员缺乏应对不明原因传染病的训练和对此类事件认识不足。对在校医学生及医疗人员进行生物医学相关突发事件应对能力的培训是十分必要的。就SARS事件的处理 ,对在校医学生进行了针对性培训 ,内容涉及可能病原的分离 ,传染途径的认识 ,相应的处理措施 ,使学生具备和加强了对此类事件处理的基本知识和技巧 。

人真皮原代成纤维细胞的培养、鉴定及蛋白酶活性受体的表达

目的探索和建立人真皮原代成纤维细胞培养并鉴定纯度,检测蛋白酶活性受体在该细胞的表达状态。方法用胰酶消化法分离人包皮成纤维细胞并培养人真皮原代成纤维细胞,用免疫细胞化学法鉴定纯度;用RT-PCR、流式细胞分析和免疫细胞化学染色法检测蛋白酶活性受体的表达。结果胰酶消化法成功培养出人真皮原代成纤维细胞,纯度达99%;人真皮成纤维细胞高表达PAR1、PAR3 mRNA及蛋白,微弱表达PAR2 mRNA及蛋白,不表达PAR4 mRNA及蛋白。结论用胰酶消化法成功培养高纯度原代人真皮成纤维细胞;蛋白酶活性受体1、3在人真皮成纤维细胞上高表达,提示可能存在于炎症及损伤修复功能作用,为进一步研究打下基础。

前列腺精子结合蛋白的二维凝胶电泳及质谱分析

【目的】应用精子膜蛋白亲和层析柱分离金黄地鼠前列腺精子结合蛋白,并用二维电泳和质谱对金黄地鼠前列腺精子膜结合蛋白进行初步分析。【方法】应用附睾精子膜亲和层析柱纯化前列腺精子结合蛋白,采用二维凝胶电泳对纯化的前列腺精子膜结合蛋白进行蛋白分离和图像分析,并结合基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱分析及数据库搜索从而鉴定部分蛋白质斑点;RT-PCR检测已鉴定蛋白在前列腺及未受精卵子中的mRNA的表达。【结果】附睾精子膜蛋白亲和层析柱可纯化出前列腺结合蛋白,前列腺附睾精子膜蛋白结合蛋白的二维凝胶电泳蛋白图谱。分离的蛋白质斑点为30个,质谱鉴定出2个蛋白点,一为热休克蛋白105,另一羰基还原酶(NADPH)-3。前列腺和未受精卵中均表达热休克蛋白105和羰基还原酶-3的mRNA。【结论】自前列腺分泌物中分离出精子膜结合蛋白,金黄地鼠前列腺中精子结合蛋白经双向电泳及飞行质谱分析鉴定出蛋白热休克蛋白和羰基还原酶。

EB病毒和鼻咽癌

鼻咽癌 (NPC)是中国南部高发肿瘤。EB病毒与NPC密切相关 ,表现在NPC患者血清通常含高滴度抗EBVIgA及EBV的核心抗原抗体。应用PCR在NPC组织和外周血液可检测到EBV及相应基因。本文就EBV与NPC的关系 ,与NPC相关的EBV的生物学特性和进展 ,EB病毒和细胞增殖分化方面的信号转导关系作一综述。

鼻咽癌的遗传学研究

鼻咽癌 (NPC)是我国南方常见肿瘤之一 ,其发病的分子生物学机制目前仍不清楚。本文就鼻咽癌的体细胞遗传学与易感基因方面的研究作一综述。

金黄地鼠前列腺分泌蛋白对输卵管液糖蛋白的影响

目的:在整体水平探讨前列腺分泌蛋白对金黄地鼠输卵管液中糖蛋白的影响。方法:金黄地鼠雄鼠依据手术方式的不同分为3组,分别为假手术组(SH)、附属性腺全去组(TX)和腹前列腺组(VP)(仅存前列腺)。收集与各手术组交配后不同时间点(交配后0.5、2、4、6h)的输卵管液(每一时间点及每一组,n=3),输卵管液蛋白经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,考马斯亮蓝或阿仙蓝染色分析,应用蛋白电泳印迹后与系列某一种特异性糖基专一性结合凝集素反应,分析糖蛋白的变化。结果:不同组雄鼠交配及不同时间点收集输卵管液蛋白电泳谱类似,约15条主要条带。凝集素结合谱示,麦胚凝集素(WGA)结合的相对分子质量(Mr)为32000、35500、47000、52000糖蛋白见于6h VP组输卵管液,而6h TX组可见Mr为81000、128000条带;与豌豆凝集素(PSA)结合Mr为37500、32000糖蛋白仅见于6h VP组,而6h TX组缺乏;仅6h VP组可见与双花扁豆凝集素(DBA)结合Mr为52000、47000糖蛋白,而6h TX组缺乏。而0.5、2、4h时间点收集的输卵管液各凝集素结合谱相似。结论:前列腺分泌蛋白可影响修饰交配6h后的输卵管液中含乙酰氨基葡萄糖、N-乙酰半乳糖胺/半乳糖和甘露糖糖链的糖蛋白。这些糖蛋白可能在胚胎的发育过程中起作用。

金黄地鼠腹侧前列腺在体修饰精子膜蛋白作用研究

【目的】在整体水平探讨前列腺分泌蛋白对金黄地鼠精子膜蛋白的影响。【方法】雄性鼠手术分为4组,分别为附属性腺全去组,腹前列腺摘除组,去除其他附属性腺仅保留腹前列腺组和假手术组,每组动物6只。收集与保留前列腺及去除组的雄性鼠交配后的子宫腔精子,抽提精子膜蛋白,膜蛋白经聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)和二维电泳凝胶分析,比较前列腺存在与否精子膜蛋白组分的异同。【结果】与不同组雄鼠交配后收集的子宫腔精子膜蛋白SDS-PAGE电泳谱主要条带类似,含腹前列腺组的精子膜组分中相对分子质量15k、29k、38k、55k和91k多肽的量较去除腹前列腺组的子宫腔精子膜相应组分增加。二维电泳结果示与含腹前列腺组雄鼠交配后收集的子宫腔精子膜蛋白较无腹前列腺组的精子膜蛋白多出10个蛋白斑点(MM/IP分别为16k/8.60、16.5k/9.2、28k/5.88/6.10、29k/5.98、32k/6.35/6.50/7.20、61k/5.90、83k/6.40),另外蛋白斑点量增加有11个。【结论】腹前列腺可修饰和调节精子膜蛋白,进而这些蛋白可能对雄性生殖力及胚胎的发育起作用。

皮肤垢着病1例

报道1例皮肤垢着病。患者女,19岁,双面颊出现垢样物,无明显自觉症状2个月。皮肤科检查见双面颊不规则斑块,附黄褐色油腻性痂;取鳞屑真菌直接镜检发现圆形孢子。给予伊曲康唑治疗取得良效。

汕头市石风景区及其周边地区蚊虫种类及生境调查(Diptera:Culicidae)

对汕头市主要旅游景点石风景区进行蚊虫调查 ,采集到 1 1种蚊虫 ,分别为伊蚊属中复蚊亚属的白纹伊蚊 ,纷蚊亚属的东乡伊蚊 ;库蚊属中路蚊亚属的贪食库蚊和褐尾库蚊 ,库蚊亚属二带喙库蚊、三带喙库蚊、致倦库蚊、拟态库蚊 ,真黑蚊亚属的马来库蚊 ,库状蚊亚属白胸库蚊。按蚊属中按蚊亚属的嗜人按蚊。其中白纹伊蚊为登革热的重要媒介 ,嗜人按蚊为疟疾和马来丝虫病的重要媒介 ,致倦库蚊为班氏丝虫病的重要媒介 ,三带喙库蚊为日本乙型脑炎的重要媒介。其它蚊种是鸟类和野生动物疾病的媒介或可能媒介。由于汕头地区蚊虫资料甚少 。

约氏疟原虫与伯氏疟原虫侵入期抗原的初步研究

目的 用针对鼠约氏疟原虫 (Plasmodium yoelii)侵入期的 8种单克隆抗体 ,对约氏疟原虫和伯氏疟原虫(P .berghei )侵入期即动合子、裂殖子和子孢子棒状体和表面抗原检测分析。 方法 间接免疫荧光实验 (IFA)对各侵入期抗原进行亚细胞结构定位 ,SDS PAGE及Western印迹对两种鼠疟原虫的不同侵入期进行抗原组分分析。 结果 经上述两种方法检测发现 ,顶端复合体抗原成分复杂 ,约氏疟原虫和伯氏疟原虫的棒状体有共同的抗原表位 ,约氏疟原虫的动合子与其自身的裂殖子有类似成分 ,也有各自独特的抗原。两种鼠疟原虫动合子抗原有类似成分。约氏疟原虫的子孢子具有与裂殖子、动合子不同的抗原成分。 结论 疟原虫侵入期棒状体和表面抗原在同一虫种的不同侵入期和不同虫种中有共同的抗原表位 ,也有各自的独特组分。

应用ELISA和IHA法检测精神分裂症患者血清弓形虫抗体

应用ＥＬＩＳＡ和ＩＨＡ法检测精神分裂症患者血清弓形虫抗体汕头大学医学院寄生虫学教研室（５１５０３１）王绍渠，许世锷，骆建民，陈静卿汕头大学医学院精神卫生中心朱少毅，肖少雄，林勇强我们应用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）法同时采用间接红细胞凝集试验（ＩＨ...

华支睾吸虫病血清循环抗原的检测及动态观察

应用华支睾吸虫生虫抗原、代谢抗原以I-ELISA及双夹心ELISA法检测兔感染华支睾吸虫病血清中的循环抗原(CA)。结果显示,兔感染囊蚴后第3～10天血清中可检测出CA,以后CA量及检出阳性率逐渐增加,于38～45天达高峰,以后很快下降,呈一锐峰型,然后维持在一定水平。实验表明ELISA检测CA较为敏感、特异、简便,可用于早期诊断。

三种库蚊核糖体DNA第二内转录间隔区(ITS2)序列测定与系统进化分析

对广东省野外采集的库蚊属中2个亚属中的3种库蚊,褐尾库蚊Culex fuscanus(Lutzia、路蚊亚属)、二带喙库蚊Cx.bitaeniorhynchus和致倦库蚊Cx.pipiens quinquefasciatus(Culex、库蚊亚属)进行核糖体DNA第二内转录间隔区(ITS2)序列测定,并与GenBank中已知库蚊属中路蚊亚属、库蚊亚属、新库蚊亚属和黑蚊亚属的11种和伊蚊属1种蚊虫的ITS2进行序列分析。结果表明:褐尾库蚊与同亚属的非洲蚊种(Culex tigripes)亲缘关系最近,基因同源性为65.27%;库蚊亚属的二带喙库蚊与伪杂鳞库蚊基因同源性为75.87%;致倦库蚊与尖音库蚊复合组内淡色库蚊的基因同源性97.13%。在所选库蚊中,黑蚊亚属与伊蚊最接近,其次是新库蚊亚属和路蚊亚属的蚊虫。在库蚊属4个亚属中,路蚊亚属与库蚊亚属有更近的亲缘关系,这也印证了库蚊亚属某些幼虫与路蚊亚属幼虫具有相似习性的遗传基础。系统进化关系分析结果与经典分类学分类系统接近一致,但库蚊亚属的进化可能更具多样性。

CD105和Flk1在尖锐湿疣组织中的表达

目的:研究CD105和Flk1(fetal liver kinase-1)在尖锐湿疣(condyloma acuminatum,CA)组织中的表达及其可能作用。方法:采用鼠抗人CD105单克隆抗体和兔抗人Flk1多克隆抗体,应用免疫组化方法检测CD105和Flk1在27例CA组织和17例正常包皮组织中的表达。结果:CD105在血管内皮细胞膜上表达,CA组织中CD105标记的血管数比正常包皮组织明显增多,有显著差异(t=10.601,P<0.001);Flk1在CA组织的角质细胞胞浆和血管内皮细胞膜上均有表达,而正常包皮组织中仅在角质细胞胞浆呈弱表达,差别也有显著意义。结论:CD105和Flk1在CA组织中有过度的表达,可能与血管生成有关。

对同一项目采取多种形式开展继续医学教育的新模式

基于承办继续医学教育项目后的调查分析,提出在同一项目内,同一操作过程中对不同要求的学员采取多种形式开展继续医学教育的新模式。这完全不同于以往的继续医学教育形式多样化,是一种新的尝试,有待于在今后的实践中检验。

内外合治扁平疣的疗效观察

目的 :研究中药方剂治疗扁平疣的临床疗效。方法 :中药方剂治疗扁平疣 5 4例 ,并与病毒灵治疗扁平疣 5 3例进行比较。结果 :总有效率 88 8% ,与西药相比显著差异。结论 :中药方剂治疗扁平疣疗效较好 ,其机制尚需进一步研究。

包装工艺过程中的包装精度

包装工艺过程中的包装精度西安理工大学潘松年骆建民许文才ＡｃｕｒａｃｙｏｆＰａｃｋａｇｉｎｇＱｕａｎｔｉｔｙＢｙＰａｎＳｏｎｇｎｉａｎ，ＬｕｏＪｉａｎｍｉｎａｎｄＸｕＷｅｎｃａｉＡｐｐｌｙｉｎｇｔｈｅｂａｓｉｃｔｈｅｏｒｙｏｆｍａｔｈｅｍａｔｉｃａｌｓ...

明胶酶谱实验方法的优化

目的:优化明胶酶谱实验方法,并检测不同浓度凝血酶刺激人皮肤成纤维细胞分泌的明胶酶B(MMP-9)活性的变化。方法:用含明胶的聚丙烯酰胺凝胶电泳分开上清中各蛋白条带,经2.5%Triton X-100洗脱、明胶酶缓冲液孵育、考马斯亮蓝染色液染色及脱色液脱色后,经光密度扫描记录,应用ImageJ软件进行密度计量分析。结果:凝血酶刺激人皮肤成纤维细胞分泌MMP-9具有浓度依赖性。结论:利用优化的明胶酶谱实验方法可做出高质量的明胶酶谱图片,对检测明胶酶活性有重要意义。

皮肤科住院医师规范化培训刍议

皮肤科在许多综合性医院规模不大 ,住院医师规范化培训条例往往忽略了对皮肤科住院医师规范化培训。汕头医学院结合实际情况和皮肤科特点 ,对皮肤科住院医师试行了一些细则 ,取得一定成效 ,但仍有很多方面尚待完善 。