花椒乙醇提取物体外抗蓝氏贾第鞭毛虫的作用

目的观察花椒乙醇提取物对体外培养的蓝氏贾第鞭毛虫(简称贾第虫)滋养体的抑制作用和结构变化,探讨花椒体外抗贾第虫的作用效果。方法将7.5×10^(5)~2.5×10^(6)个/ml贾第虫滋养体分别给予不同浓度的花椒乙醇提取物和阿苯达唑,花椒乙醇提取物组的终浓度分别为0.05、0.50、5.00、50.00、250.00 mg/ml,阿苯达唑组终浓度分别为0.04、0.40、4.00、40.00、200.00 mg/ml,同时设空白对照组。采用改良TYI-S-33培养基37℃厌氧培养24 h,计数并观察两种药液对贾第虫的作用效果,每个浓度重复3次。采用SPSS 22.0软件计算花椒乙醇提取物和阿苯达唑的半抑制浓度(IC_(50))。取IC_(50)浓度的花椒乙醇提取物加入体外培养的贾第虫滋养体中,37℃分别培养1、3、7、15、24 h后观察虫体活力、形态结构变化,计算虫体致死率,另设空白对照组,每个时间点重复3次。扫描电镜观察虫体形态变化。结果空白对照组贾第虫生长状态良好,虫体饱满并且数量多,而不同浓度花椒乙醇提取物和阿苯达唑组的贾第虫生长均受到抑制。与空白对照组比,花椒乙醇提取物浓度为5~250 mg/ml,阿苯达唑为0.04~200 mg/ml时,虫体形态差异均有统计学意义(P<0.05)。SPSS统计得到花椒乙醇提取物的IC_(50)为4.57 mg/ml,阿苯达唑的IC_(50)为0.07 mg/ml。当给予两种药液IC_(50)浓度时,随着作用时间的延长,对虫体的抑制作用逐渐增强。给药后培养7 h,致死率均超过50%;给药后培养15 h,致死率均超过70%;给药后培养24 h,花椒乙醇提取物组致死率达(80.03±3.62)%;阿苯达唑组致死率达(91.70±4.91)%,与空白对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。扫描电镜观察发现,给予花椒乙醇提取物后7 h时,虫体变形,表面凹凸不平,但鞭毛还清晰可见;给药后12 h以上,整个滋养体停止生长,鞭毛受到明显损伤,腹吸盘表面细胞膜破裂,细胞内容物外溢,细胞失去支撑而变得扁平;给药后24 h,虫体表面破损严重,虫体表膜皱缩,进而导致虫体立体结构改变,胞质耗空,最后仅剩下躯壳而死亡。结论花椒乙醇提取物对体外培养的贾第虫生长有一定的抑制作用,并且随着药液浓度的增高,对虫体的抑制作用更加显著。