〔B25－Trp〕去B链C端五肽胰岛素酰胺的合成及性质

去Ｂ链Ｃ端八肽胰岛素（ＤＯＩ）与Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｔｒｐ－ＮＨ２通过胰蛋白酶催化缩合后，经分离纯化得到聚丙烯酰胺凝胶电泳均一的Ｂ２５－Ｔｒｐ取代的去Ｂ链Ｃ端五肽胰岛素酰胺（〔Ｂ２５－Ｔｒｙ〕ＤＰＩ－ＮＨ２）．酶促缩合率大于８５％，回收率为３６．２％。用小白鼠惊厥法测得〔Ｂ２５－Ｔｒｐ〕ＤＰＩ－ＮＨ２的体内活力约为天然胰岛素的７０％，用人胎盘细胞膜测得的其胰岛素受体结合能力为天然胰岛素的７２．５±２．４％；利用色氨酸和酪氨酸的内源荧光研究了此类似物的溶液构象．

猪流行性腹泻病毒通用实时荧光定量RT-PCR方法的建立与初步应用

以猪流行性腹泻病毒(PEDV)一段保守的M基因序列为靶标,建立可匹配96.93%现有毒株的PEDV实时荧光定量RT-PCR检测方法。优化反应条件后绘制标准曲线,相关系数R2=0.9995,线性关系良好。该方法与猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪轮状病毒、猪链球菌、猪圆环病毒、猪细小病毒、伪狂犬病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪丁型冠状病毒无交叉反应,特异性良好。灵敏度和重复性试验结果显示对PEDV的最低检测限为2.10 copies/μL,且批内、批间重复试验的变异系数均小于2%。用该方法与本病原行业标准方法对162份临床样本进行同批对比检测,结果与行业标准方法的阳性符合率为100%。结果表明,本方法特异性、灵敏度、重复性好,能够有效检测病毒GⅠ和GⅡ基因型,能对导致猪群腹泻的PEDV进行早期确诊。