黄芪-丹参对LPS诱导的小鼠巨噬细胞焦亡的影响

目的:研究药对黄芪-丹参对LPS诱导的小鼠巨噬细胞炎症的影响,并探讨与焦亡相关的可能性的机制。方法:CCK-8法细胞增殖检测筛选诱导RAW264.7巨噬细胞活力值的最佳LPS浓度。用最佳的LPS浓度复制炎症模型,根据文献得到最佳的含药血清浓度干预造模后的巨噬细胞,24h后收集细胞上清做ELISA检测RAW264.7巨噬细胞炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β),提取细胞蛋白用蛋白免疫印迹法(Western blot)测定TNF-!、NF-κB的水平。结果:CCK-8结果显示10μg/mL LPS作用时,细胞活力值显著最强,20%为最佳含药血清浓度。ELISA结果显示:模型组IL-1β浓度显著高于空白组(P<0.01),与模型组比较,黄芪-丹参药对组可降低IL-1β的水平(P<0.05,P<0.01)。Western blot结果显示:模型组TNF-!、NF-κB蛋白表达量均高于空白组(P<0.05,P<0.01),与模型组相比较,黄芪-丹参药对组可降低TNF-!、NF-κB蛋白表达量(P<0.05)。结论:药对黄芪-丹参抗LPS诱导巨噬细胞活化可能是通过抑制TNF-!/NF-κB信号通路的焦亡相关指标的表达水平。

中药厚朴发汗过程中微生物群落结构及特征的分析

目的分析厚朴鲜树皮直接“发汗”的前中后3个时期的微生物群落结构及特征。方法将厚朴鲜皮直接堆放“发汗”后,分别取“发汗”第0、3、6 d的样品进行高通量测序,运用美吉生信云分析平台(https://cloud.majorbio.com)进行微生物群落结构及特征分析。结果“发汗”前中后3个时期共检测到6个真菌菌门,子囊菌门Ascomycota在“发汗”整个过程中处于绝对优势地位。担子菌门Basidiomycota、未分类的真菌门Unclassified_k_Fungi和接合菌门Zygomycota在“发汗”中丰度明显升高。壶菌门Chytridiomycota和隐真菌门Rozellomycota仅在“发汗”中出现,且丰度极小。共检测到10个门水平细菌,变形菌门Proteobacteria在整过“发汗”过程中处于绝对优势地位且在中后期丰度进一步提高。浮霉菌门Planctomycetes、酸杆菌门Acidobacteria、装甲菌门Armatimonadetes及Saccharibacteria门在“发汗”中后期消失,且整过“发汗”过程中无新增优势菌门出现。结论真菌物种丰度和多样性在整个“发汗”过程中均为先上升后下降,且“发汗”后真菌物种丰度和多样性在整个“发汗”过程中最低。除变形菌门Proteobacteria在中后期丰度有所增加外,细菌物种丰度和多样性在整个“发汗”过程中均呈下降趋势,甚至部分菌门接近消失。实验结果支持真菌在“发汗”过程中发挥作用,对进一步寻找厚朴“发汗”过程中发挥作用的菌属具有一定参考价值。