苯乙双胍对体内外胰腺癌血管生成的抑制作用

目的检测苯乙双胍对胰腺癌及血管生长的抑制作用,分析其抗恶性肿瘤的可能作用机制。方法不同剂量(0.001~10μmol/L)苯乙双胍处理人脐静脉内皮细胞(HUVECs)、人胰腺正常导管上皮细胞系HPDE6-C7和胰腺癌细胞系PANC-1后,CCK-8法检测苯乙双胍对细胞活力的影响;小管形成实验测定苯乙双胍对HUVECs体外血管新生能力的影响;Western blot实验测定血管内皮生长因子A(VEGFA)、p-VEGFR2和p-ERK表达水平。建立原位移植裸鼠胰腺癌模型,检测苯乙双胍对裸鼠胰腺癌生长的作用;明胶-氧化铅血管造影法检测裸鼠体内胰腺肿瘤单位体积血管密度,免疫组化检测CD34和VEGFA的阳性表达。结果0.01~1μmol/L的苯乙双胍可明显抑制PANC-1细胞活力,但对HUVECs和HPDE细胞活力无显著影响;苯乙双胍可抑制HUVECs小管新生,VEGFA可拮抗苯乙双胍对HUVECs小管新生的抑制作用;苯乙双胍可下调PANC-1细胞中VEGFA和p-ERK的表达,可抑制HUVECs中p-VEGFR2的表达。苯乙双胍对裸鼠无明显毒副作用,但可抑制体内胰腺肿瘤的血管新生,并抑制体内胰腺癌增殖及胰腺肿瘤组织中CD34和VEGFA的阳性表达。结论苯乙双胍可明显拮抗体内外胰腺癌生长和血管新生,ERK/VEGFA/VEGFR2可能是其主要抗癌作用机制。

卵泡抑素样蛋白1在维持结肠癌细胞生长中的作用

目的研究卵泡抑素样蛋白1(FSTL1)在结肠癌细胞表达及其功能。方法体外通过蛋白质印迹法测定FSTL1在结肠癌细胞株(HT29、HCT116、DLD1)及人正常结肠上皮细胞株HCEC-1CT表达量;将靶向FSTL1基因的小干扰RNA(siRNA)慢病毒(LV-siRNA-FSTL1)和阴性对照慢病毒(LV-siRNA-NC)分别感染DLD1细胞,将两组细胞系通过皮下注射法建立结肠癌异种移植瘤裸鼠模型,同时设置未感染细胞作为空白对照(BC)组,观察接种4周后三组异种移植瘤重量,Tunel法测定体内结肠癌细胞凋亡;免疫组织化学法检测FSTL1和Ki-67在异种移植瘤组织表达;Western blot检测细胞外调节蛋白激酶(ERK1/2)、氨基末端激酶(JNK)、蛋白激酶B(Akt)和核因子κB抑制蛋白(IκB)表达。结果FSTL1蛋白在三种结肠癌细胞株表达较HCEC-1CT细胞明显上调(P均<0.01);siRNA-FSTL1组、siRNA-NC组和BC组FSTL1蛋白相对表达量分别为(0.12±0.03)、(0.97±0.19)和(1.05±0.18),差异有统计学意义(P均<0.01),干扰效率88.42%;siRNA-FSTL1组裸鼠异种移植瘤重量(0.53±0.07)g显著低于siRNA-NC组(0.84±0.15)g和BC组(1.15±0.26)g,差异有统计学意义(P均<0.01),抑瘤率53.91%;siRNA-FSTL1组细胞凋亡率(16.82±2.33)%明显高于siRNA-NC组(2.93±0.44)%和BC组(3.51±0.32)%,差异均有统计学意义(P均<0.01);与siRNA-NC组比较,siRNA-FSTL1组异种移植瘤FSTL1、Ki-67、p-ERK1/2和p-Akt相对表达量分别降低(58.42±4.53)%、(61.61±6.82)%、(43.23±3.92)%和(47.52±5.14)%,差异有统计学意义(P均<0.05);与siRNA-NC组比较,p-JNK和IκB在siRNA-FSTL1组异种移植瘤表达无显著改变(P>0.05)。结论FSTL1在结肠癌细胞表达显著上调,敲除FSTL1基因可显著抑制结肠癌裸鼠异种移植瘤生长,其作用机制可能与ERK1/2和Akt通路相关,FSTL1有望成为结肠癌基因治疗新的作用靶点。

单操作孔胸腔镜下胸膜纤维板剥脱术治疗慢性结核性脓胸的可行性分析

目的探讨单操作孔胸腔镜下胸膜纤维板剥脱术治疗慢性结核性脓胸的可行性。方法回顾性分析绍兴市立医院2013年1月-2016年5月微创治疗慢性结核性脓胸52例,其中50例在单操作孔胸腔镜下行胸膜纤维板剥脱术,2例改胸腔镜辅助小切口。结果围手术期无死亡,手术时间60~240 min,平均160 min,术中出血150~2 000 ml,平均350 ml,术后放置胸管时间3~21 d,平均7 d,术后持续漏气3例,局限性肺不张3例,切口感染1例,胸腔渗血1例,心律失常3例,均经过相应治疗后痊愈。失访3例,其余49例随访3~36个月,肺复张良好,效果满意。结论严格选择适应证的条件下单操作孔胸腔镜下胸膜纤维板剥脱术治疗慢性结核性脓胸安全可行,值得应用推广。

隆突性皮肤纤维肉瘤1例

隆突性皮肤纤维肉瘤(DFSP)起源于真皮中一种可向多方向分化的间质细胞,是一种生长缓慢且局限的低度恶性肿瘤。我院收治隆突性皮肤纤维肉瘤患者1例,现报道如下:1病历摘要患者男,47岁,因"右腹股沟区肿物1年"于2019年5月就诊于我院。患者就诊前1年无意中发现右腹股沟肿块,无疼痛不适,无周围皮肤红肿。1年来肿块缓慢增大,无明显瘙痒。入院查体:右腹股沟可触及一5cm×4cm大小的分叶状包块,色红偏紫,质地偏硬,表面光滑,活动度差,无压痛,无溃破流脓。双侧腹股沟区未触及肿大的淋巴结,全身其他部位未见肿块。患者既往有高血压病史4年,自服苯磺酸左旋氨氯地平片,平素控制可。

miR-342-3p通过靶向Bcl-2上调TP53蛋白表达抑制甲状腺癌细胞增殖

目的探讨miR-342-3p对甲状腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其潜在的作用机制。方法采用qRT-PCR检测人甲状腺癌细胞系(FTC-133、TPC-1、BCPAP和SW1736)和人甲状腺滤泡上皮细胞(Nthy-ori3-1)中miR-342-3p表达水平。采用Lipofectamine 2000向对数生长期的FTC-133细胞转染miR-342-3p模拟物(miR-343-3p mimics组),阴性对照(miR-NC组)及不进行任何转染的FTC-133细胞为对照组(Control组)。采用qRT-PCR法检测转染后各组的miR-342-3p的mRNA水平以验证转染效率,CCK-8实验检测细胞增殖活性,划痕实验和transwell实验评估细胞迁移和侵袭情况,双荧光素酶报告基因实验验证miR-342-3p对Bcl-2的靶向调控作用,qRT-PCR和Western blot法检测Bcl-2的mRNA和蛋白表达水平。结果与Nthy-ori3-1细胞相比,甲状腺癌细胞系中miR-342-3p表达水平均显著降低(F=5.732,P=0.011)。与Control和miR-NC组比较,miR-342-3p mimics组miR-342-3p表达水平显著增加(F=8.613,P=0.003),细胞活性显著降低(P<0.05),细胞迁移速度和侵袭数目显著降低(F=38.542,P<0.001),pcDNA3.0-Bcl-2组的细胞48~96 h的增殖活性显著增强(F=11.257,P<0.001),pcDNA3.0-Bcl-2组的TP53蛋白水平明显下降(F=9.872,P=0.004),miR-342-3p mimics组TP53蛋白水平显著上升(F=12.548,P<0.001)。结论miR-342-3p mimics通过靶向抑制Bcl-2表达从而抑制FTC-133细胞增殖,迁移和侵袭,有望作为甲状腺癌诊断和治疗的新靶点。

苯乙双胍对体内胰腺癌生长的作用

抗糖尿病药物-苯乙双胍在多种恶性肿瘤中表现出良好的抗癌活性,其抗肿瘤作用强于二甲双胍[1]。本研究旨在观察苯乙双胍对裸鼠体内胰腺癌生长的影响。

卵泡抑素样蛋白1在维持结肠癌细胞生长和凋亡中的作用

目的观察卵泡抑素样蛋白1(FSTL1)在结肠癌细胞生长和凋亡中的作用。方法将FSTL1小干扰RNA(siRNA)瞬时转染体外结肠癌DLD1细胞后,细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测细胞活力;克隆形成实验观察单个DLD1细胞形成细胞克隆的能力;流式细胞术检测细胞周期和凋亡;蛋白质印迹法(Western blot)试验检测细胞周期相关蛋白(Cyclin E、E2F-1、p-Rb、p53和p73)、细胞凋亡相关蛋白[Cytochrome C、B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3和聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)]和细胞通路蛋白[磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)、磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)和κB抑制蛋白(IκB)]的表达。结果空白对照(BC)组、siRNA阴性对照(NC)组和FSTL1 siRNA组细胞吸光度A值分别为1.124±0.157、1.243±0.161和0.708±0.114,组间差异有统计学意义(F=11.172,P<0.01);DLD1细胞经转染FSTL1 siRNA后,细胞克隆形成数目为(42.3±6.5),与BC组(154.7±16.2)或siRNA NC组(183.8±12.6)比较,差异有统计学意义(F=24.694,P<0.001);BC组和siRNA NC组DLD1细胞凋亡率分别为(1.62±0.24)%和(1.84±0.27)%,与FSTL1 siRNA组(12.321.96)%比较,差异有统计学意义(F=19.687,P<0.001);沉默FSTL1的表达后可下调Cyclin E、E2F-1和p-Rb的表达,上调p53和p73的表达(F=5.214、21.953、10.842、22.264、18.062,P<0.05);干扰FSTL1的表达后可促进细胞中Cytochrome C、bax、cleaved-PARP和cleaved-Caspase 3的表达,并抑制bcl-2的表达(F=18.694、31.481、28.043、34.875、39.746,P<0.01);敲除FSTL1的表达后可导致DLD1细胞中p-ERK1/2和p-Akt表达下调(F=35.184、15.274,P<0.01)。结论FSTL1与结肠癌细胞生长和凋亡密切相关。