Caspase-3抑制剂所致氧化应激状态下肾小管上皮细胞差异表达基因的筛选及功能验证

目的:研究caspase-3抑制剂引起的氧化应激状态下肾小管上皮细胞基因表达特点,筛选潜在的候选基因,为揭示caspase-3调控活性氧(reactive oxygen species,ROS)损伤肾小管上皮细胞的机制奠定基础。方法:将人肾小管上皮细胞HK-2用H2O2(300μmol/L)处理6 h后,随机分为对照组和caspase-3抑制剂组(Ac-DEVD-CHO,15μmol/L),运用Illumina Hiseq 2500测序平台完成基因测序,筛选差异基因并进行相关富集分析,用定量PCR对筛选到的前10位差异表达基因(differentially expressed gene,DEG)进行验证。将H2O2(300μmol/L)处理6 h后的HK-2细胞随机分为对照组、caspase-3抑制剂组(Ac-DEVDCHO,15μmol/L)、CTNNB1组[pcDNA3.1(+)-CTNNB1]、caspase-3抑制剂+CTNNB1组[Ac-DEVD-CHO,15μmol/L+pcDNA3.1(+)-CTNNB1]以及caspase-3抑制剂+CTNNB1 NC组[Ac-DEVD-CHO,15μmol/L+pcDNA3.1(+)-CTNNB1 NC],MTT法检测细胞增殖,流式细胞技术检测细胞凋亡和ROS水平,Western blot检测细胞凋亡相关蛋白表达。结果:芯片共筛选出185个DEG,经定量PCR验证,显著性差异排名前10的基因中FIS1、EZR、COL7A1、RPL5、MAP4、CEBPB和CTNNB1 mRNA在caspase-3抑制剂组细胞中低表达(P均<0.05),SNRPB mRNA高表达(P<0.05)。Caspase-3抑制剂组增殖率高于对照组(P<0.05),CTNNB1组增殖率低于对照组(P<0.05),caspase-3抑制剂+CTNNB1组增殖率低于caspase-3抑制剂组(P<0.05),但仍高于对照组(P<0.05)。Caspase-3抑制剂组细胞凋亡率、cleaved-caspase-3和cleaved-PARP蛋白水平低于对照组(P均<0.05),CTNNB1组细胞凋亡率、cleaved-caspase-3和cleaved-PARP蛋白水平高于对照组(P均<0.05),caspase-3抑制剂+CTNNB1组细胞凋亡率、cleaved-caspase-3和cleaved-PARP蛋白水平均较caspase-3抑制剂组高(P<0.05),但仍低于对照组(P<0.05)。caspase-3抑制剂组ROS较对照组降低(P<0.05),CTNNB1组ROS较对照组升高(P<0.05),caspase-3抑制剂+CTNNB1组ROS较caspase-3抑制剂组高(P<0.05),但仍低于对照组(P<0.05)。结论:Caspase-3抑制剂引起的肾小管上皮基因异常表达与氧化应激状态下的肾损伤有关;氧化应激对肾小管上皮细胞的损伤具有caspase-3依赖性,抑制caspase-3对肾损伤有保护作用,CTNNB1参与了这一过程。

腹泻儿童非伤寒沙门菌感染的病原学及耐药性分析

目的探究苏州地区腹泻儿童非伤寒沙门菌(NTS)感染的病原学特征及耐药性变迁。方法回顾性收集2016年至2021年苏州大学附属儿童医院收治的1265例NTS感染相关腹泻患儿的临床数据并进行统计分析。结果本研究共分离得到1265株NTS,平均检出率为11.79%,主要以5岁以下低龄儿童为主,夏季为高发流行季节(20.00%),优势血清群为B群(63.95%)和D群(17.00%),其中以鼠伤寒沙门菌(54.47%)和肠炎沙门菌(15.18%)为主;药敏结果显示,苏州地区腹泻患儿分离得到的NTS对广谱合成类青霉素敏感性较低(耐药率均>70%),而对含酶抑制剂的青霉素复合制剂较为敏感(耐药率均<10%),对三代头孢菌素及其复合制剂、碳青霉烯类抗生素敏感性也较好;不同血清型沙门菌的耐药性也存在差异,D群沙门菌环丙沙星和复方新诺明总体耐药率均低于其他血清群(χ^(2)值分别为20.71、147.24,P<0.05);2020—2021年分离的NTS对三代头孢菌素和氟喹诺酮类药物的耐药率较往年明显下降(χ^(2)值分别为29.02、11.55,P<0.05)。结论NTS是导致苏州地区儿童感染性腹泻的主要病原菌,临床医生应认识到NTS的病原学特征及耐药性改变,帮助早期诊断和合理使用抗菌药物,延缓耐药菌株的产生。

儿童血液病患者血流感染革兰阴性杆菌的构成及耐药性监测

血流感染是临床严重的感染疾病，病情严重，病死率高。血液病患儿由于自身疾病的原因和大量使用免疫抑制剂和激素治疗使得自身免疫功能低下，并且器官移植和大量侵入性诊疗技术的应用，极易造成机体感染。大量使用抗菌药物也使得多重耐药革兰阴性杆菌增多。因此，了解血液病患儿血流感染病原菌的分布及耐药情况，对临床合理应用抗生素，更好地控制感染等都有重要意义。

脱敏疗法对支气管哮喘患儿外周血Ⅱ型固有淋巴细胞的影响及临床意义

目的探讨脱敏疗法对支气管哮喘患儿外周血Ⅱ型固有淋巴细胞(ILC2s)的影响和临床意义。方法选取2014年1月至2015年12月该院收治的30例支气管哮喘患儿,随机分为单纯药物治疗组(n=15)和药物联合脱敏治疗组(n=15),同时选取15例健康体检儿童作为对照组,分别用流式细胞术和酶联免疫吸附试验检测治疗前后外周血ILC2s、IL-13、IL-15、IL-33表达水平。结果单纯药物治疗组、药物联合脱敏治疗组外周血ILC2s水平明显高于对照组(P<0.05);单纯药物治疗组治疗1年后外周血ILC2s水平仍高于对照组(P<0.05);药物联合脱敏治疗组治疗2个月后外周血ILC2s水平较治疗前降低(P<0.05),治疗1年后与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。单纯药物治疗组、药物联合脱敏治疗组外周血IL-5、IL-13、IL-33水平明显高于对照组(P<0.05);单纯药物治疗组治疗1年后外周血IL-5、IL-13、IL-33水平仍高于对照组(P<0.05);药物联合脱敏治疗组治疗2个月后外周血IL-5、IL-13、IL-33水平较治疗前降低(P<0.05),治疗1年后与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论脱敏疗法能通过改变支气管哮喘患儿过度活跃的固有免疫应答,使外周血中高表达的ILC2s及细胞因子IL-5、IL-13水平恢复至正常,降低哮喘的气道反应性和炎性反应,达到缓解和治疗哮喘的目的。

某火力发电厂脱硫区域暖通空调设计

介绍了火力发电厂脱硫区域暖通空调设计,对区域内建筑供暖系统,空气调节系统,通风系统及除尘系统进行了总结。