运用NMR研究白蛋白与脂肪酸的相互作用

脂肪酸在哺乳动物的能量代谢中发挥着至关重要的作用,同时也是合成细胞膜磷脂和其他生物活性化合物的重要物质.脂肪酸在血液中的溶解度很低,主要以与蛋白质结合状态存在,白蛋白是游离脂肪酸的主要运输者和储存者.因此,研究脂肪酸和白蛋白的相互作用具有非常重要的医学和生物学意义.本文主要利用基于核磁共振(NMR)的组氨酸选择性检测技术T_2W-RD-Water LOGSY研究天然同位素丰度人血清白蛋白(HSA)与脂肪酸的相互作用,结果发现脂肪酸结合前后,HSA的特征组氨酸谱图变化明显,部分组氨酸信号的相对强度随脂肪酸浓度的增加而不断减小,相应的滴定曲线分析表明HSA表面有两个强的脂肪酸结合位点.此外,部分谱线的化学位移变化说明HSA和脂肪酸的强结合还会引发HSA相应的构象变化.

JAK/STAT通路抑制剂对C57BL/6小鼠血清代谢组影响的1HNMR研究

JAK/STAT通路抑制剂已被应用于多种疾病的临床试验,但其全身性用药对机体组织细胞功能活性的影响目前尚不明确.本研究运用基于核磁共振氢谱(~1H NMR)的代谢组学方法分析了JAK/STAT通路抑制剂WP1066(20 mg/kg.bw,2天一次,持续2周)对C57BL/6小鼠血清代谢组的影响.首先采用~1H NMR技术检测了WP1066处理组和对照组小鼠血清的代谢物,然后对所得的图谱数据进行了主成分分析(PCA)以及正交偏最小二乘法分析(OPLS).研究结果表明,抑制JAK/STAT通路可明显下调小鼠血清中的N-甲基烟酰胺(N-methylnicotinamide)水平,而上调顺乌头酸(cis-aconitate)、草酰乙酸(oxaloacetate)和乙酰胺(acetamide)水平,这些代谢物改变均与能量代谢密切相关.该结果提示代谢失衡相关指标可能作为JAK/STAT通路抑制剂治疗的临床监测参考指标.