乳酸菌和抗生素对中华蜜蜂肠道消化酶活性、免疫基因表达及工蜂存活率的影响

本试验旨在通过在中华蜜蜂糖饲料中添加乳酸菌和抗生素,评价二者对中华蜜蜂肠道消化酶活性、免疫基因表达及工蜂存活率的影响,为其在蜜蜂养殖中的应用提供依据。试验选取0日龄的中华蜜蜂工蜂540只,随机分为3个组,每组3个重复,每个重复60只蜜蜂。对照组饲喂50%(质量分数,下同)蔗糖溶液,试验组分别饲喂添加1×108 CFU/mL植物乳杆菌的50%蔗糖溶液(乳酸菌组)和添加450μg/mL四环素的50%蔗糖溶液(抗生素组)。于15日龄,测定中肠消化酶活性和免疫基因相对表达量;于30日龄,测算工蜂存活率。结果表明:1)与对照组相比,乳酸菌组中华蜜蜂中肠淀粉酶活性显著提高(P<0.05),中肠Abaecin、Toll基因的相对表达量显著提高(P<0.05),中肠Cactus-1基因的相对表达量显著降低(P<0.05),工蜂的平均生存时间显著延长2.75 d(P<0.05)。2)与对照组相比,抗生素组中华蜜蜂中肠淀粉酶和蛋白酶活性均显著降低(P<0.05),中肠防御素-1(Defensin-1)、肽聚糖识别蛋白(PGRP)和Cactus-1基因的相对表达量显著降低(P<0.05),工蜂的平均生存时间显著缩短2.39 d(P<0.05)。由此可知,饲喂乳酸菌可提高中华蜜蜂肠道消化酶活性,增强肠道免疫功能,提高工蜂存活率;饲喂抗生素可降低中华蜜蜂肠道消化酶活性,降低工蜂存活率。

益生菌在蜜蜂养殖中的应用

益生菌是一类安全、高效、无污染、不产生抗药性的有益微生物,具有维持宿主肠道微生物动态平衡、促进宿主营养代谢及提高宿主健康水平的功能。本文阐述了益生菌的作用机制,介绍了蜜蜂养殖过程中常见益生菌种类,分析了蜜蜂养殖过程中益生菌应用问题,并进行了益生菌应用展望,以期进一步加快益生菌在蜜蜂养殖中的应用,促进蜜蜂养殖业绿色健康发展。

全基因组重测序解析重庆武隆中华蜜蜂遗传变异及种群分化特征

【目的】解析重庆武隆中华蜜蜂的遗传变异及种群分化特征,为该地区传粉昆虫的遗传多样性研究提供理论参考。【方法】对重庆武隆中华蜜蜂进行全基因组重测序,并结合我国其他地区57群中华蜜蜂的重测序原始数据进行种群遗传分化分析。【结果】测序共获得武隆中华蜜蜂有效数据(clean data)33.53 Gb,发现高质量单核苷酸多态性(SNP)位点共3886321个,小片段的插入与缺失(small indel)位点1392028个。在武隆中华蜜蜂样品中筛选出具有相同变异位点的非同义SNP突变基因589个,编码区发生small indel的基因214个。这些基因主要富集于赖氨酸降解、轴突导向、细胞外基质受体互作和丝裂原活化蛋白激酶信号通路。最终获得16个具有相同SNP和small indel的突变基因,其中包括嗅觉受体基因2个、细胞色素P450基因1个。武隆中华蜜蜂与我国其他地理型中华蜜蜂可能存在显著的遗传分化,与华中中蜂和北方中蜂(陕西安康)种群的亲缘关系较近。【结论】推测氨基酸代谢、神经系统发育、嗅觉进化、抗逆性能改善以及对温度偏好性的转变与武隆中华蜜蜂适应重庆本地自然环境有关。随意引种可能导致优质中华蜜蜂品种混杂,生产性能和抗逆性能下降。因此,需要保护本土优质中华蜜蜂种质资源。

实验室饲养对中华蜜蜂雄蜂精液及转录水平基因表达的影响

为探索中华蜜蜂Apis cerana cerana Fabricius种用雄蜂的高效培育方法,本研究利用实验室和蜂群条件培育中华蜜蜂性成熟雄蜂,比较各实验组雄蜂的体重、可采集精液比例及精子活力,利用转录组测序技术解析实验室饲养对雄蜂基因表达的影响。结果表明,与蜂群饲养组相比,实验室饲养组中华蜜蜂性成熟雄蜂的精子活力无显著差异,但雄蜂的体重和可采集精液比例显著降低。转录组测序共筛选获得实验室饲养组雄蜂的差异表达基因602个,其中上调表达186个,下调表达416个。上调的差异表达基因显著富集于蛋白质结合、核质、淘汰的核质组分和胞内细胞器等19个GO功能分类;下调的差异表达基因显著富集于ATP合成耦合质子转运、线粒体内膜、呼吸体和碳水化合物代谢过程等22个GO功能分类,以及氧化磷酸化、碳代谢、脂肪酸降解和三羧酸循环等6条KEGG通路。表明实验室饲养可作为培育中华蜜蜂种用雄蜂的备选方法进行深入研究。实验室饲养可能通过抑制机体能量代谢和干扰线粒体功能影响雄蜂的生长和精子发生。研究结果为进一步研发中华蜜蜂种用雄蜂的工厂化培育技术提供了科学参考,有助于加速我国本土蜜蜂的良种选育进程。

基于模糊评判的蜂蜜感官评价及阈值分析

为选择合适的蜂蜜作为复合甜味剂,对蜂蜜产品进行感官评价,并确定评价较高蜂蜜的甜度阈值及风味阈值。实验以香气、甜味、综合风味为评价因素,采取模糊评判法对蜂蜜产品进行评价。结果表明:含糖量为质量分数9%的柑橘蜂蜜综合评价最高,其次为质量分数9%的紫云英蜂蜜;柑橘蜂蜜的甜度阈值和风味阈值含糖量分别是质量分数0.75%和0.50%,紫云英蜂蜜为质量分数0.50%和0.50%。可将柑橘蜂蜜和紫云英蜂蜜作为复合甜味剂用于饮料研发中。

意大利蜜蜂授粉对柑橘生长发育及品质的影响

【目的】应用意大利蜜蜂(Apis melliferaL.)为柑橘授粉,以研究意大利蜜蜂的传粉行为对柑橘果实生长发育及其品质的影响。【方法】设置蜜蜂授粉组和对照组,观测两组柑橘果实纵、横径生长动态,落果波相及坐果率,检测果实可溶性固形物、总糖、总酸和维生素C含量等指标。【结果】在花谢70d后的发育过程中,授粉组柑橘果实的纵横径均超过对照组(P<0.05)。在落蕾落花期及第1次生理落果期,授粉组落果率(落蕾落花率)显著低于对照组(P<0.05);第2次生理落果期,授粉组与对照组的落果率无显著差异(P>0.05)。经意大利蜜蜂授粉的柑橘果实的维生素C含量、总糖及糖酸比与对照组差异显著(P<0.05),果实单果重显著增加(P<0.05),畸形果率显著降低(P<0.05)。【结论】意大利蜜蜂授粉可提高柑橘坐果率、单果重,改善果实品质,降低畸形果率,从而达到增产提质的目的。

不同蜂花粉对意大利蜜蜂蜂群繁殖和工蜂发育的影响

本试验旨在研究不同蜂花粉对意大利蜜蜂蜂群繁殖和工蜂发育的影响,为蜂农选择蜜蜂饲粮提供参考。选用群势相当的本地意大利蜜蜂15群,随机分为5组(每组3群),其中4组为不同蜂花粉试验组,1组为空白对照组。4个蜂花粉试验组蜜蜂分别持续饲喂荷花粉、玉米花粉、茶花粉、油菜花粉36 d,空白对照组蜜蜂不进行饲喂。结果表明:第36天,与荷花粉和玉米花粉相比,茶花粉和油菜花粉对蜂群群势具有显著的促进作用(P<0.05)。第36天,茶花粉组的封盖子量显著高于其他3个蜂花粉试验组(P<0.05),且油菜花粉组显著高于荷花粉组(P<0.05)。在饲喂的36 d期间,油菜花粉组和茶花粉组蜂群的采食量均显著高于荷花粉组(P<0.05)。在12:00—12:05和14:00—14:05时间段,茶花粉和油菜花粉组工蜂的采集活性显著高于其他蜂花粉试验组和空白对照组(P<0.05)。茶花粉组、油菜花粉组的6日龄工蜂幼虫虫体蛋白质含量显著高于其他组(P<0.05)。与玉米花粉相比,油菜花粉、荷花粉及茶花粉均可显著提高意大利蜜蜂工蜂的寿命(P<0.05)。结果显示,不同蜂花粉对意大利蜜蜂蜂群繁殖和工蜂发育有很大影响,在春繁期间,补饲茶花粉和油菜花粉较有利于促进意大利蜜蜂蜂群发展。

蜜蜂蜂毒主要成分与功能研究进展

蜜蜂蜂毒(honeybee venom)作为重要的蜂产品之一,其中的很多蛋白在抗炎、抗癌、抗菌、抗辐射和杀虫等方面具有很好的效果。20世纪40年代以来,国内外在蜂毒活性成分分析、作用机理、重要基因克隆和毒蛋白功能等方面进行广泛地研究,取得了重要的进展。本文的目的是总结蜜蜂蜂毒主要成分磷脂酶A2、透明质酸酶、蜂毒肽、蜂毒明肽、肥大细胞脱粒肽和镇静肽等毒蛋白的基因结构、生化特性及功能等方面的研究进展,为蜂毒基因的研究和利用提供一定的理论基础。

小峰熊蜂蜂毒磷脂酶A2基因的克隆及表达分析

磷脂酶A2(phospholipase A2,PLA2)是蜂毒主要成分,也是蜂毒的主要过敏原,在熊蜂个体和群体防御方面具有重要功能。为了探究熊蜂A2基因的生物学功能,本研究以小峰熊蜂Bombus hypocrita为材料进行了蜂毒PLA2基因的克隆、鉴定了与表达特性分析。结果表明:该基因全长为2 272 bp,GenBank登录号为KF214771,由4个外显子和3个内含子组成,编码区(CDS)长为543 bp,共编码180个氨基酸残基。氨基酸序列相似分析显示,成熟的小峰熊蜂PLA2(含有136个氨基酸)与其他蜂类PLA2的氨基酸序列相似性较高,均包含10个保守的半胱氨酸残基、1个保守的Ca^(2+)结合位点和1个酶活性中心。基于PLA2氨基酸序列的系统进化树分析表明,熊蜂属Bombus与蜜蜂属Apis在不同分支上,属单系群,且蜜蜂属分化较早。荧光定量PCR结果表明,PLA2基因在小峰熊蜂各日龄均有表达,且随日龄增长,表达量呈先上升后下降的趋势,10日龄时出现峰值,其表达量显著高于其他日龄(P<0.05)。半定量PCR结果表明,PLA2基因在毒腺、卵巢、中肠中表达量较高,在足、触角、食道腺中表达量较低,在脂肪体、肌肉、神经、气管、复眼、脑中未表达。本研究探明了小峰熊蜂PLA2的基因结构及其表达特性,丰富了熊蜂PLA2的生物学基础,为进一步深入研究熊蜂PLA2生物学功能和作用机制以及开发蜂毒生物制剂等鉴定了基础。

泡腾片在食品业中的研究进展

泡腾片具有崩解迅速、口感良好、服用方便、质量稳定等特点。在食品业中泡腾片主要是固体饮料,例如茶泡腾片、维生素泡腾片、果蔬泡腾片等。本文概述了我国泡腾片在食品业中的研究进展,并展望了泡腾片在食品业的应用前景,以期为泡腾片的开发利用提供参考。

中华蜜蜂为梁平柚授粉的效果及梁平柚蜂蜜品质研究

应用中华蜜蜂Apis cerana cerana(简称“中华蜜蜂”)为梁平柚Citrus maxima(Burm.)Merr.Cv.Liangping Yu授粉,以研究中华蜜蜂的访花行为及对梁平柚的授粉效果,并评价粱平柚蜂蜜的品质。结果显示:(1)中华蜜蜂访问梁平柚花朵的数量随时间的增加呈先上升后下降的趋势,13:00~14:00时间段中华蜜蜂访问梁平柚花朵的数量显著高于其他时间段(P<0.05);(2)与自花授粉相比,蜜蜂授粉可显著提高梁平柚的单果重、维生素C含量、糖含量(P<0.05);(3)梁平柚蜂蜜感官要求、微生物限量、理化指标完全符合国家标准和行业标准,是品质非常优良的蜂蜜。利用中华蜜蜂授粉可提高梁平柚单果重,改善果实品质,从而达到增产提质的目的,建议在梁平柚生产中采用蜜蜂授粉技术。

成对比较检验法在蜂蜜感官评价中的应用

为了对编号825、613两种蜂蜜进行感官评价,试验采用成对比较检验法对两个样品进行了分析研究。蜂蜜样品的成对比较检验分析结果显示在感官上825和613两个蜂蜜样品差异显著,在喜好程度上825和613两个蜂蜜样品也有显著差异,825样品比613样品更受人青睐;定向成对比较检验结果分析显示825和613两个蜂蜜样品在色泽、组织状态、透明度和甜味上无显著差异,但是在香味、综合风味上有显著差异,825样品的香味、综合风味优于613样品。因此,人们对于825的喜好程度优于613。

不同水平亮氨酸对繁殖期意大利蜜蜂蜂群群势及工蜂发育的影响

【目的】评价日粮中不同水平亮氨酸对繁殖期意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica蜂群群势及工蜂发育的影响。【方法】选取重庆荣昌本地繁殖期意大利蜜蜂21群,随机分为7组,分别饲喂添加0,15.30,17.50,26.25,35.00,43.75和52.5 g/kg亮氨酸的试验日粮,每12 d测定各组蜂群群势、封盖子量、蜂群取食量和营造王台情况,24 d后测定蜂群采集行为、工蜂初生重、工蜂虫体蛋白质含量及工蜂寿命。【结果】当亮氨酸添加水平为43.75和52.50 g/kg时能够显著提高繁殖期意大利蜜蜂的蜂群群势、封盖子量、蜂群取食量及采集行为(P<0.05)。与空白对照组相比,基础日粮组及各亮氨酸添加组的新出房蜂和6日龄幼虫体蛋白质含量较高(P<0.05);各亮氨酸添加组的工蜂初生重显著高于空白组(P<0.05);不同亮氨酸添加水平对意大利蜜蜂工蜂寿命影响较小。此外,亮氨酸添加水平26.25,35.00和43.75 g/kg能够在饲喂0-24 d时促进蜂群营造自然王台,刺激蜂群分蜂。【结论】配方日粮中43.75和52.5 g/kg的亮氨酸能够显著促进繁殖期意大利蜜蜂蜂群发展,其中43.75 g/kg的亮氨酸饲喂量还能刺激蜂群营造自然王台,激发蜂群分蜂。

不同蜂授粉对重庆设施草莓产量、品质及效益的影响

【目的】为比较不同蜂对重庆设施草莓的授粉效果与效益。【方法】本研究于重庆市荣昌区开展授粉效果试验,评价中华蜜蜂(Apis cerana cerana)、意大利蜜蜂(Apis mellifera ligustica)及地熊蜂(Bombus terrestris)授粉对设施草莓产量、果形、畸形果率、果实品质及效益的影响。【结果】与当地主要授粉昆虫中华蜜蜂相比,意大利蜜蜂及地熊蜂能够提高重庆设施草莓产量50.12%和41.33%(P<0.05);意大利蜜蜂授粉组草莓果实单果重显著高于其他试验组(P<0.05),其果高显著高于地熊蜂及自然授粉组(P<0.05);中华蜜蜂授粉组果实维生素C含量明显高于地熊蜂组及自然授粉组(P<0.05);地熊蜂授粉组果实糖酸比显著高于中华蜜蜂及自然授粉组(P<0.05);蜂授粉能够显著降低草莓的畸形果率(P<0.05)。采用国际通用的生物经济评价方法推算出意大利蜜蜂及地熊蜂授粉能够为重庆设施草莓种植业带来更大的经济效益。与中华蜜蜂相比,可实际提高每公顷产值51.15%和41.33%。【结论】参考重庆地区授粉蜂获取难易程度及成本,本研究推荐意大利蜜蜂更适宜于为重庆设施草莓授粉。

2种蜂对黄沙白柚的访花行为及授粉效果研究

【目的】评价意大利蜜蜂 Apis mellifera ligustica (简称“意蜂”)及中华蜜蜂 Apis cerana cerana (简称“中蜂”)对黄沙白柚 Citrus maxima (Burm) Merr. cv. huangsha Yu的访花行为及授粉效果。【方法】于重庆市垫江县开展2种蜂对黄沙白柚的访花行为及授粉效果试验,比较2种蜂访问黄沙白柚花朵的行为及其与环境因素和花朵泌蜜规律的相关性,并评价意蜂与中蜂授粉对黄沙白柚座果率、产量及果实品质的影响。【结果】意蜂与中蜂访问黄沙白柚花朵的数量呈先上升后下降的趋势,在13:00-17:00时间段中蜂访问黄沙白柚花朵的数量显著高于意蜂( P <0.05),但意蜂的单花访问时间显著高于中蜂( P <0.05);意蜂访问黄沙白柚花朵的数量受花朵泌蜜量和光照显著影响( P <0.05),中蜂的访花数量受花蜜糖浓度和光照显著影响( P <0.05)。经意蜂与中蜂授粉的黄沙白柚果实座果率、单果重、果型及果实品质显著高于自花授粉组( P <0.05),且意蜂授粉组的座果率及2种蜂授粉组的总糖含量和糖酸比均显著高于人工授粉组( P <0.05);意蜂授粉组和中蜂授粉组总果重无显著差异( P >0.05),但意蜂授粉组显著高于人工授粉组与自花授粉组( P <0.05);与中蜂授粉相比,意蜂授粉能够显著提高黄沙白柚的果实座果率。【结论】综合比较2种蜂对黄沙白柚的访花行为及授粉效果,黄沙白柚可采用蜜蜂授粉代替人工授粉,且意蜂授粉效果更好。

Ti_3Al和Ti_2AlNb合金扩散连接界面的组织及力学性能

采用直接扩散连接Ti3Al和Ti2AlNb合金,研究了连接压力、连接温度、保温时间等工艺参数对接头界面组织形貌及性能的影响。利用扫描电镜、能谱分析和X射线衍射等方法观察分析了界面组织结构,并测试了接头的力学性能。结果表明:直接固相扩散连接接头的典型组织为Ti3Al/O相+α2相过渡层/富B2层/Ti2AlNb。当连接温度为1000℃,保温时间60min,连接压力为5MPa时获得的接头室温抗剪强度为635MPa,室温抗拉强度为795MPa,均断裂于Ti3Al母材一侧。经1000℃/60min热循环后Ti3Al母材的抗拉强度下降至原始母材的76%。连接温度低于950℃或保温时间小于60min会导致未焊合等缺陷;温度高于1050℃或保温时间超过120min则导致Ti3Al发生相变。

小麦品系西农1163-4抗叶锈病基因的遗传分析和分子作图

【目的】小麦品系西农1163-4高抗小麦叶锈、条锈和白粉病,综合农艺性状良好。明确该小麦品系中所含的抗叶锈病基因及遗传特点,找到与其紧密连锁的分子标记,有利于抗病基因利用和培育抗病新品种。【方法】将西农1163-4与感病品种Thatcher杂交,获得F1、F2代群体,利用中国叶锈菌优势小种THTT进行苗期抗性鉴定和抗性遗传分析;采用SSR技术对西农1163-4所携带的抗叶锈基因进行分子标记研究,共筛选了1 273对SSR引物。【结果】小麦品系西农1163-4对多个叶锈菌小种具有良好的抗病性,对THTT的抗性是由1个显性基因控制,该基因暂命名为LrXi。获得了与LrXi紧密连锁的3个微卫星分子标记Xbarc8、Xgwm582、Xwmc269和1个STS标记(ω-secali/Glu-B3),将LrXi定位于小麦1BL染色体上。距离最近的2个微卫星位点是Xgwm582、Xbarc8,与抗叶锈基因间的遗传距离分别为2.3 cM和3.2 cM。【结论】LrXi位于1BL染色体,抗叶锈表现不同于所有已知抗叶锈病基因,该基因的发现将有利于丰富中国抗叶锈病基因资源,为培育持久抗病品种奠定基础。

Ti_3Al/Ti/Ti_2AlNb扩散连接工艺及性能

采用钛箔作为中间层扩散连接Ti3Al与Ti2AlNb,利用SEM,EDS和XRD等分析方法发现,接头界面组织结构为Ti3Al/α+β双相组织/富B2相/Ti2Al Nb.分别研究了中间层厚度,连接温度,保温时间等工艺参数对接头界面组织形貌以及力学性能的影响.结果表明,当钛箔厚度10μm,T=900℃,t=120 min,p=5 MPa时,接头组织性能最佳.钛箔厚度增加会导致Ti,Al,Nb等元素扩散不均匀;Ti3Al/Ti2Al Nb直接固相扩散连接温度为1 000℃,加入钛中间层可将其降低至900℃,减小了高温热循环对母材性能的损伤,接头整体抗拉强度从795 MPa提升至906MPa;保温时间90~120 min可保证扩散充分连接可靠.

蜂王浆-β-环糊精包合物的主要营养成分及抗氧化活性

为评价蜂王浆-β-环糊精包合物的营养价值及功能活性,对蜂王浆及其包合物的10-羟基-2-癸烯酸(10-hydroxy-2-de-cenoic acid,10-HDA)含量、氨基酸含量和组成以及抗氧化活性进行测定及分析.结果表明,蜂王浆-β-环糊精包合物的10-HDA含量及17种氨基酸含量和组成与新鲜蜂王浆无显著差异(P>0.05);除蛋氨酸、胱氨酸以外,蜂王浆及其包合物的其它必需氨基酸比例均优于FAO/WHO推荐的氨基酸模式谱;β-环糊精包合技术能够明显提高蜂王浆抑制亚油酸氧化的能力,其中包合物0~3 ku的肽类物质抑制能力最强且更持久;包合物清除DPPH(2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl,DPPH)自由基的能力及总抗氧化能力显著低于蜂王浆(P<0.05),但包合物的缓释性能可延长其抗氧化活性.综上,β-环糊精包合技术可用于制备具有高抑制亚油酸氧化活性的蜂王浆制品,其主要营养价值与新鲜蜂王浆无显著差异.

意大利蜜蜂对两种油菜花朵气味的偏爱性

【目的】明确意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica(简称"意蜂")对两种油菜(甘蓝型胜利油菜Brassica napus cv.Shengli和芥菜型马尾油菜B.juncea cv.Mawei)的气味偏爱性及选择行为特征。【方法】本研究开展大田访花偏爱性试验、室外群体气味偏爱性试验以及室内"Y"型嗅觉仪行为反应和学习记忆试验,测定意蜂蜂群及青年采集蜂对甘蓝型胜利油菜和芥菜型马尾油菜两种油菜花朵的选择次数,并通过采集蜂训练时及训练后的喙伸反应率分析两种油菜花朵气味对采集蜂学习记忆能力的影响,最终评估意蜂蜂群及个体对这两种油茶花朵气味的选择性。【结果】大田试验12:00-13:00时间段,访问胜利油菜的意蜂数量显著高于访问马尾油菜的数量(P<0.05)。群体气味偏爱性试验14:00-15:00时间段意蜂访问胜利油菜的数量显著高于访问马尾油菜的数量(P<0.05)。行为反应试验结果显示意蜂选择胜利油菜的次数(3.86±2.83)显著高于访问马尾油菜的次数(2.28±1.87)(P<0.05)。在学习记忆试验中,随着训练次数的增加,意蜂对两种油菜花朵气味的喙伸反应率逐渐升高,相同的训练次数,意蜂对两种油菜气味的学习能力差异不显著(P>0.05);训练结束后,随着时间的增加,意蜂对胜利油菜及马尾油菜的气味记忆逐渐下降,在24 h对胜利油菜的气味记忆明显高于对马尾油菜的气味记忆(P<0.05)。【结论】本研究证明意蜂较偏爱胜利油菜的花朵气味,花朵气味是影响其采集偏爱的重要因素,气味响应性试验可定量分析蜜蜂对花朵气味的嗅觉敏感性。