吡虫啉对大鼠卵巢颗粒细胞孕酮合成的影响

目的探究新烟碱类杀虫剂吡虫啉(IMI)对大鼠卵巢颗粒细胞孕酮合成的影响。方法使用不同浓度(0、100、200、500、1000μmol/L)的IMI分别处理大鼠卵巢颗粒细胞48 h,收集细胞及细胞培养液上清,电化学发光法检测孕酮和雌二醇(E_(2))水平;Western Blot法检测IMI处理后颗粒细胞孕酮合成关键酶甾体激素合成急性调节蛋白(StAR)的相对表达量;使用PI3K/AKT通路抑制剂LY294002与1000μmol/L IMI共处理颗粒细胞48 h后,收集细胞培养液上清检测孕酮水平。结果IMI处理大鼠卵巢颗粒细胞48 h,与对照组相比,随着IMI浓度的增加,细胞培养上清液中孕酮水平呈剂量依赖性增加(P<0.05),E_(2)水平无显著变化(P>0.05);Western Blot结果显示,与对照组相比,不同浓度的IMI处理颗粒细胞48 h后,StAR蛋白的相对表达量均显著升高(P<0.01)。PI3K/AKT通路抑制剂LY294002与1000μmol/L的IMI共处理颗粒细胞48 h后,与对照组相比,LY294002显著降低颗粒细胞基础孕酮的合成水平(P<0.01);与IMI共处理能显著抑制IMI刺激孕酮合成的效果(P<0.001)。结论IMI影响大鼠卵巢颗粒细胞孕酮的合成,其机制可能与PI3K/AKT信号通路的激活有关。

新烟碱类杀虫剂吡虫啉对大鼠卵巢功能的影响

目的 探讨新烟碱类杀虫剂吡虫啉(IMI)对大鼠卵巢功能的影响。方法 将30只21日龄的雌性SD大鼠随机分为3组,每组10只,根据IMI暴露的浓度分为低浓度组(19 mg·kg^(-1)·d^(-1))和高浓度组(38 mg·kg^(-1)·d^(-1)),对照组则给予同等体积的生理盐水。连续灌胃30 d,对动物状态进行记录;采用电化学发光法测定大鼠血清中孕酮和雌二醇(E_(2))的含量,Western Blot法检测大鼠卵巢中胆固醇侧链裂解酶(P_(4)50scc)和芳香化酶(Aromatase)的表达量,行卵巢组织切片苏木精-伊红(HE)染色以观察卵泡形态、统计各级卵泡数量,同时进行抗苗勒管激素(AMH)免疫组化染色观察其表达量的变化。结果 各组大鼠灌胃期间毛发、进食情况、活动情况均无明显异常。随IMI暴露剂量增加,大鼠血清孕酮和E_(2)水平也逐渐增加;与对照组相比,低浓度组和高浓度组孕酮水平略增高,但均无显著性差异(P>0.05);与对照组相比,高浓度组血清中E_(2)水平显著升高(P<0.05)。Western Blot结果显示,IMI暴露后大鼠卵巢组织中P_(4)50scc和Aromatase表达量随IMI浓度增加而升高,与对照组相比,低浓度组中P_(4)50scc和Aromatase的表达量虽有增加但无显著性差异(P>0.05),高浓度组中P_(4)50scc和Aromatase的表达量显著增加(P<0.01)。卵泡计数结果显示,与对照组相比,低浓度组和高浓度组大鼠卵巢中总卵泡数均显著减少(P<0.001);与对照组相比,高浓度组原始卵泡比例显著降低(P<0.001),低浓度组生长卵泡比例显著增加(P<0.05)。免疫组化染色结果显示,与对照组相比,低浓度组和高浓度组的AMH表达均下降,IMI高浓度组AMH下降更明显。结论 IMI暴露后会导致大鼠卵巢甾体激素的生成增加,并改变卵泡发育的进程。