13例肝豆状核变性家系致病基因突变的检测和分析

为了研究Wilson病(wilson disease,WD)基因突变的类型和发生情况,探讨WD疾病的病因、临床特点,通过采用变性高效液相色谱(denaturing high performance liquid chromatography,DHPLC)方法结合DNA测序方法对13例无亲缘关系的患者及33位亲属进行ATP7B基因所有外显子及5′端非转录区突变检测.33例DNA标本确认11种基因突变,其中包括9种错义突变(p.R778L、p.R919G、p.T1178A、p.T977M、p.K1010Q、p.C490TERM、p.A874P、p.G943S、p.G943D),1种缺失突变(2790delCAT),1种剪切位点改变(c.1708-1G>C(intron 4+1 G>C)).在13个家系中,发现4例R778L突变,2例2790delCAT,均为杂合型突变,涉及17个等位基因,本组检出率为70.8%(17/24).DHPLC-测序法是WD疾病基因突变筛查较为快捷、全面而且敏感的方法.WD基因突变存在热点区分别为3、8、12号外显子.2790delCAT、p.K1010Q、c.1708-1G>C(intron 4+1 G>C)是ATP7B基因新突变类型,p.S406A、p.V456L、p.V1140A、p.R952K是中国人比较常见的多态类型.

肝豆状核变性新突变p.I930del的基因诊断和产前诊断

目的:通过研究一个肝豆状核变性特殊家系的基因突变情况,探讨新突变p.I930del诱发肝豆状核变性的分子机制.方法:采用变性高效液相色谱(DHPLC Denaturing high performance liquid chromatography)方法结合DNA测序方法对1个WD家系进行ATP7B基因所有外显子及5'UTR区突变检测.结果:该家系WD由p.I930del,p.T977M,p.G943S 3个基因突变引起,p.I930del源自父方,100个正常人测序结果没有发现该位点的缺失;p.T977M,p.G943S分别来自不同的母方.产前诊断结果表明胎儿没有携带致病基因.结论:位于跨膜区的p.I930del为一个新的肝豆状核变性致病突变;该缺失可能通过影响跨膜区结构的形式影响该蛋白的功能.

2号染色体单亲二体和STR基因座突变干扰亲子鉴定1例

1案例1.1简要案情因法定父亲怀疑孩子(3岁男孩)非亲生,要求进行亲子鉴定。经被鉴定人知情同意后,采集法定父亲、孩子、母亲、外公和外婆的指尖血,根据《法庭科学DNA实验室检验规范》(GA/T 383—2014)采用Chelex-100法提取DNA。1.2检验过程1.2.139个常染色体及X染色体STR(X-STR)基因座基因分型对所提取的样本DNA采用PowerPlex®21系统(美国Promega公司)和AmpFℓSTRTM IdentifilerTM Plus PCR扩增试剂盒(美国Thermo Fisher Scientific公司)在9700型PCR仪(美国Applied Biosystems公司)上共扩增20个常染色体STR基因座和Amelogenin基因座,对提取的样本DNA采用Goldeneye®DNA身份鉴定系统22NC[基点认知技术(北京)有限公司]扩增另外19个常染色体STR基因座。