利用病毒诱导的基因沉默cDNA文库高通量筛选鉴定棉花功能基因

为快速、高通量研究棉花功能基因,本研究以陆地棉欣试17为材料,棉花GhCLA1为标记基因,利用棉花病毒诱导的基因沉默(virus induced gene silencing,VIGS)cDNA文库对幼苗生长和盐胁迫应答相关基因进行筛选和鉴定。VIGS转化7~14d观察植株长势和盐胁迫应答表型,共获得8个与幼苗生长相关以及4个与盐胁迫应答相关的基因。水培条件下,VIGS沉默GhANT17、GhSTP14、GhUSPA、GhFES1、GhS15-4、GhRBL8基因对植株地上部生长较对照植株有明显的抑制作用;VIGS沉默GhOIDO基因促进了植株生长;VIGS沉默GhRBCSC1基因抑制叶片中叶绿素的合成。盐胁迫处理条件下,与对照植株相比VIGS沉默GhATCYP1、GhSAC52基因提高了植株的耐盐性,VIGS沉默GhPSBW、GhRBCSC2的植株对盐胁迫更敏感。本研究建立了高通量筛选棉花功能基因的技术体系,为快速挖掘、研究棉花功能基因提供了可行技术手段。