黄芪甲苷促进高糖受损的内皮祖细胞向内皮细胞分化的实验研究

目的:研究黄芪甲苷(AS-Ⅳ)诱导高糖损伤内皮祖细胞(EPCs)向内皮细胞(ECs)分化的作用。方法:体外分离出单个核细胞,通过4,6二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)核染法、FITC-UEA-I联合Dil-ac-LDL双荧光染色法鉴定EPCs,将鉴定成功的EPCs用30 mmol/L的葡萄糖干预120 h制成高糖受损模型,并随机分为高糖对照组及高糖AS-Ⅳ组,同时设置正常组。高糖AS-Ⅳ组加入100 mg/L的AS-Ⅳ干预,高糖对照组及正常组加入同等体积的PBS液培养。3组均培养48 h后采用荧光免疫检测内皮细胞标志物血小板-内皮细胞黏附分子(CD31)、血管性血友病因子(vWF)的表达情况,并通过Matrigel成管实验研究AS-Ⅳ干预EPCs成管分化的影响。结果:成功培养鉴定出EPCs,EPCs在光镜下形态呈中间圆形、外周梭形的“铺路石”样形态;双荧光染色荧光镜下EPCs呈双染橙黄色改变;免疫荧光检测显示,高糖AS-Ⅳ组CD31和vWF免疫荧光强度高于高糖对照组,差异有统计学意义(P<0.01);Matrigel成管实验显示,高糖AS-Ⅳ组EPCs成管能力高于高糖对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:AS-Ⅳ可诱导高糖受损人内皮祖细胞向内皮细胞分化而发挥体外成管作用。