慢性鼻炎鼻黏膜中一氧化氮合酶表达与中医证型相关性研究

目的:研究通过比较正常对照组(鼻中隔偏曲患者)和慢性鼻炎中医各证型患者下鼻甲黏膜中一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)的表达,以探讨NOS表达与慢性鼻炎中医各证型间的相关性。方法:取符合诊断标准的慢性鼻炎患者及鼻中隔偏曲患者的部分下鼻甲,并将慢性鼻炎组患者按照中医辨证分为肺虚邪滞(气虚证)和气滞血瘀(血瘀证)两型,应用免疫组织化学方法,观察内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在正常对照组和慢性鼻炎气虚组、慢性鼻炎血瘀组下鼻甲黏膜中的分布和表达。结果:HE染色显示:慢性鼻炎组表层上皮细胞增厚,基底膜增厚,腺体增生,血管扩张,而正常组无此表现。eNOS免疫组化显示阳性染色为棕黄色,正常鼻黏膜和慢性鼻炎鼻黏膜均有表达,主要集中于表层上皮细胞、腺体上皮细胞胞质中,血管内皮细胞胞浆中也有少量表达;iN0S免疫组化则显示慢性鼻炎表层上皮细胞、腺体上皮细胞、血管内皮细胞胞质,部分炎性细胞呈阳性反应;而正常鼻黏膜iNOS i无此表达。每张切片在高倍镜下随机取5张图片,经过图像分析及SPSS11.5统计显示,慢性鼻炎组和正常对照组eNOS表达无明显差异,慢性鼻炎组iNOS表达高于正常组,慢性鼻炎组中血瘀组iNOS表达高于气虚组。结论:正常人鼻黏膜中存在NOS的表达,eNOS在正常鼻黏膜和慢性鼻炎患者鼻黏膜中均有表达,运用统计方法计算显示三者间无明显差异;慢性鼻炎鼻黏膜中iNOS表达明显高于正常,提示iNOS在慢性鼻炎发病机制中有重要作用,可能与慢性鼻炎的黏膜水肿、增生、腺体分泌有关。慢性鼻炎组中血瘀组iNOS表达高于气虚组,且两者间存在相关性,提示iNOS一定程度上对中医辨证有一定参考意义。

NO/NOS在鼻科学中的病理生理作用研究进展

一氧化氮合成酶(NOS)催化L-精氨酸(L-Arg)生成一氧化氮(NO)参与人体多种病理生理作用,本文就NO/NOS在鼻科学中的生理作用,其表达与多种鼻疾病的关系,及其在中医辨证方面的参考意义做一个综述。

皂术茵陈方对非酒精性脂肪性肝炎大鼠IRE1α-XBP1-STAT1信号通路的影响

目的观察皂术茵陈方对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠的作用特点及其对肝脏内质网应激肌醇需求酶1α(IRE1α)-X-盒结合蛋白1(XBP1)-信号转导与转录激活因子1(STAT1)信号通路的影响,探讨其治疗NASH的作用机制。方法大鼠适应性喂养1周后,按随机数表法随机分成4组,即模型组、正常组、皂术茵陈方组、吡格列酮组,每组8只。采用高脂饮食16周建立大鼠NASH模型,在造模第9周开始给药,皂术茵陈方组每天给予皂术茵陈方10 g/kg灌胃;吡格列酮组每天给予盐酸吡格列酮10 mg/kg灌胃;正常组和模型组给予10 mL/kg双蒸水灌胃;共8周。观察大鼠一般状态;生化法检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性和肝组织甘油三酯(TG)、丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)含量;苏木精-伊红(HE)染色观察肝组织病理学变化;实时荧光定量聚合酶链式反应法(RT-PCR)和酶联免疫吸附测定法(ELISA)分别检测肝组织IRE1α、XBP1、STAT1等的基因与蛋白表达。结果与正常组比较,模型组大鼠显示出典型的NASH组织学特征,经过皂术茵陈方治疗后,肝细胞脂肪变性、炎症浸润较模型组减轻。模型组大鼠肝湿重、血清ALT、AST活性、肝脏TG、MDA、GSH含量均显著升高(P<0.01),同时,肝组织IRE1α、XBP1、STAT1的蛋白及基因表达亦显著升高(P<0.01)。经过皂术茵陈方治疗后,上述指标均显著降低(P<0.05)。结论皂术茵陈方具有改善NASH大鼠肝细胞脂肪变性、气球样变性、炎症以及内质网应激损伤的药理效应,同时可显著降低肝组织IRE1α、XBP1、STAT1表达,提示皂术茵陈方治疗NASH的作用机制与调控内质网应激IRE1α-XBP1-STAT1信号通路有关。

基于内源性大麻素探讨康氏抗纤方治疗肝纤维化大鼠的作用机制

目的研究康氏抗纤方对肝纤维化大鼠的药理效应及对内源性大麻素的作用机制。方法将40只Wistar雄性大鼠随机分为正常组、模型组、康氏抗纤方组和安络化纤丸组,每组10只。造模8周期间,正常组给予普通饲料喂养,模型组、康氏抗纤方组和安络化纤丸组给予四氯化碳(CCl_4)腹腔注射复制肝纤维化模型。从第5周开始,康氏抗纤方组、安络化纤丸组分别给予康氏抗纤方、安络化纤丸灌胃治疗4周。检测大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)活性;ELISA检测肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量;HE染色法观察大鼠肝组织的病理变化;采用高效液相色谱-质谱联用法(LC/MS)检测肝组织内源性大麻素N-花生四烯酸氨基乙醇(AEA)、2-花生四烯酸甘油(2-AG)含量变化;通过real-time PCR法检测大鼠肝组织内源性大麻素水解酶脂肪酰胺水解酶(FAAH)和单酰基甘油酯酶(MGL)m-RNA表达水平变化。结果与正常组比较,模型组大鼠的肝组织内出现明显肝纤维化状态,血清ALT、AST活性及肝组织Hyp、AEA、2-AG含量升高(P<0.01),FAAH、MGL m-RNA表达降低(P<0.01)。治疗4周后,与模型组比较,康氏抗纤方组、安络化纤丸组肝细胞炎症坏死及胶原纤维增生明显减轻,血清ALT、AST活性、肝组织Hyp含量均显著降低(P<0.01),康氏抗纤方组、安络化纤丸组血清大麻素AEA、2-AG含量明显降低(P<0.01,P<0.05),FAAH、MGL的m-RNA表达显著升高(P<0.01,P<0.05)。结论康氏抗纤方对肝纤维化具有良好的治疗作用,其作用机制与抑制内源性大麻素密切相关。

基于内源性大麻素探讨皂术茵陈方治疗非酒精性脂肪性肝炎的作用机制

目的研究皂术茵陈方对非酒精性脂肪性肝炎大鼠的药理效应及对内源性大麻素的作用机制。方法30只Wistar雄性大鼠随机分为正常组、模型组和治疗组,每组10只。造模12周期间,正常组给予普通饲料喂养,模型组和治疗组给予高脂饲料以复制非酒精性脂肪性肝炎模型。从第7周开始,治疗组给予皂术茵陈方灌胃治疗6周。检测大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)活性,肝组织甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC);HE染色法观察大鼠肝组织的病理变化;采用高效液相色谱-质谱联用法(LC/MS)检测肝组织2-花生四烯酸甘油(2-AG)含量;通过Real-time PCR法检测大鼠肝组织脂肪酰胺水解酶(FAAH)和单酰基甘油酯酶(MGL)mRNA表达水平。结果与正常组比较,模型组大鼠肝组织内出现明显脂肪沉积和炎症损伤,血清ALT、AST活性明显升高(P<0.01),肝组织TG、TC含量升高(P<0.01);肝组织大麻素2-AG含量显著升高(P<0.01),FAAH、MGL mRNA表达降低(P<0.01)。治疗组与模型组比较,治疗6周后血清ALT、AST活性、肝组织TG、TC、大麻素2-AG含量明显降低(P<0.05),FAAH、MGL mRNA表达升高(P<0.01)。结论皂术茵陈方对非酒精性脂肪性肝炎具有良好的治疗作用,其作用机制与抑制内源性大麻素密切相关。