hsTnI、PTH及BNP水平与CKD5期患者高血压分级的相关性研究

目的:探讨血清高敏肌钙蛋白I(hsTnI)、甲状旁腺激素(PTH)及血浆钠尿肽(BNP)水平与慢性肾脏病(CKD)5期患者高血压分级的相关性及临床意义。方法:选取85例CKD5期并伴有不同程度高血压的患者作为研究组,其中高血压I级(甲组)17例,IⅡ级(乙组)26例,Ⅲ级(丙组)42例,30例同期入院体检的健康对象作为对照组。比较3组患者hsTnI、PTH及BNP水平与对照组的差异,并分析其与高血压分级的相关性。结果:甲、乙、丙组患者hsTnl、PTH及BNP水平均明显高于对照组(P<0.05);经Spearman相关性分析,hsTnl、PTH及BNP水平与高血压分级均为强正相关(P<0.001)。结论:血清hsTnI、PTH及血浆BNP水平与CKD5期患者高血压分级相关性强,对于CKD5期合并高血压患者的临床病情评估具有重要作用。

同种异体富血小板血浆用于慢性难愈性创面的临床研究

目的探讨同种异体富血小板血浆(PRP)治疗慢性难愈性创面(CRW)患者的临床疗效。方法选取2021年5月—2022年10月收治的无法采用自体PRP治疗的CRW患者40例,采用随机数字表法将患者随机分为治疗组和对照组各20例。两组患者均在入院或门诊就诊后进行彻底清创,在此基础上治疗组采用异体PRP进行创面外敷治疗,对照组采用常规创面换药治疗并定期换药,测定创面长度和宽度以判断疗效,采用视觉模拟评分法(VAS)对治疗第10 d、20 d的疼痛程度进行评价。结果异体PRP治疗10 d后创面见肉芽生长,后期肉芽组织较快生长、创缘上皮爬行,未见明显炎症反应;治疗30 d,治疗组创面愈合率达到95.90%,显著高于对照组的47.55%(t=–16.74,P<0.05);治疗30 d后,治疗组创面肉芽组织生长较快,治疗后创面大小明显缩减甚至愈合(Z=-4.32,P<0.05);治疗组创面中位愈合时间为34.50 d(31.25 d,36.00 d),明显短于对照组的50.00 d(45.25 d,64.50 d)(Z=–5.42,P<0.05)。治疗组创面痊愈4例,显效16例,较对照组治疗效果明显(χ^(2)=40.00,P<0.05)。疼痛评分显示在治疗第10、20天后,治疗组患者的疼痛明显减轻,差异具有统计学意义(Z=–5.52,P<0.05)。结论对于因年龄、基础疾病引起血小板减少或者血小板功能障碍等限制因素而无法采集自体PRP的患者,采用异体PRP作为辅助治疗方法,可明显加速慢性创面的愈合过程,临床疗效较好。

黄芩苷对小鼠巨噬细胞干扰素基因刺激因子通路活化的影响

目的:研究黄芩苷对小鼠骨髓源巨噬细胞(bone marrow-derived macrophages,BMDMs)中干扰素基因刺激因子(stimulator of interferon genes,STING)通路的效应。方法:将C57BL/6小鼠骨髓细胞经巨噬细胞集落刺激因子诱导,培养制备BMDMs,将细胞分为6组:对照组(二甲基亚砜)、黄芩苷组、环鸟苷酸-腺苷酸(cGAMP)组、黄芩苷+cGAMP组、脂多糖组、黄芩苷+脂多糖组。用显微镜观察各组BMDMs的细胞形态;流式细胞术检测各组BMDMs表面CD80、CD86的表达;Griess法检测BMDMs培养上清液中一氧化氮的含量;ELISA法检测BMDMs IL-6、TNF-α和IFN-β的分泌。结果:黄芩苷对BMDMs的形态和生长状态无明显影响;黄芩苷抑制活化BMDMs的一氧化氮产生,负向调控BMDMs表面CD80、CD86的表达水平,抑制STING通路活化后巨噬细胞IL-6、TNF-α和IFN-β的分泌。结论:黄芩苷抑制BMDMs中cGAMP激活的STING通路活化。

莫诺苷对小鼠T细胞体外活化与分化的影响

目的:探讨山茱萸提取物莫诺苷对小鼠T细胞功能的影响及可能的机制。方法:将C57BL/6小鼠脾脏制成单细胞悬液,采用抗CD3、抗CD28功能抗体模拟抗原刺激活化T细胞,分为对照组(不做任何处理)和莫诺苷组(10μmol/L莫诺苷处理)。采用流式细胞术分析CD4^+T和CD8^+T细胞表面分子CD69、CD25表达水平,以及其增殖、凋亡与分化为Th1、Th2、Treg等细胞的情况;利用实时荧光定量PCR检测细胞中Tbx21、Gata3、淋巴样增强因子1(lymphoid enhance factor 1,LEF1)等mRNA水平;应用ELISA法测定培养上清液中IFN-γ、IL-4以及TGF-β含量;运用蛋白质免疫印迹技术测定细胞β-连环蛋白表达量。结果:与对照组相比,莫诺苷组中活化T细胞向Th1、Th2、Treg分化比例增加(P <0. 05),CD25活化标志增强,T细胞增殖标志Ki67有所增强,但增殖和凋亡差异均无统计学意义;IL-4和Treg细胞相关的TGF-β因子水平增加(P <0. 05),但Th1细胞分泌的IFN-γ差异无统计学意义;Tbx21、Gata3、LEF1等mRNA水平均增加(P <0. 05);蛋白质印迹显示β-连环蛋白表达明显上调(P <0. 01)。结论:山茱萸提取物莫诺苷可促进小鼠T细胞分化,其机制可能与Wnt信号通路有关。

间充质干细胞培养上清液抑制成纤维细胞的衰老

目的:探讨人脐带间充质干细胞培养上清液对人皮肤成纤维细胞的抗衰老作用。方法:将原代人皮肤成纤维细胞分为正常对照组、H_2O_2组、培养上清液组和H_2O_2+培养上清液组。其中,H_2O_2组和H_2O_2+培养上清液组中细胞皆采用200μmol/L H_2O_2预先处理,以诱导细胞衰老模型。采用β-半乳糖苷酶染色试剂盒检测细胞β-半乳糖苷酶活性; DAPI染色检测细胞核体积变化;采用实时荧光定量PCR法(RT-qPCR)检测细胞中P53和P21的mRNA转录水平;蛋白质印迹检测P53蛋白表达。结果:与正常对照组相比,H_2O_2处理后与细胞衰老相关的β-半乳糖苷酶活性明显增强、β-半乳糖苷酶阳性细胞百分比明显增多(P <0. 05);细胞核体积明显变大,衰老细胞明显增多(P <0. 05); P53和P21 mRNA转录水平明显升高(P <0. 05),并且P53蛋白表达增强。经间充质干细胞培养上清液处理后,上述衰老相关指标均明显改善(P <0. 05)。结论:人脐带间充质干细胞培养上清液可抑制H_2O_2诱导的成纤维细胞衰老进程。

结直肠恶性肿瘤患者围手术期输血和术后感染并发症的相关性研究

目的研究结直肠恶性肿瘤患者围手术期输血和术后感染并发症的相关性。方法收集2019年2月~2021年6月行结直肠肿瘤手术且病理确诊为恶性肿瘤的病例,对患者围手术期是否输血以及血液检测结果、改良的格拉斯哥预后评分(modified Glasgow Prognostic Score,mGPS)、手术方式、手术时间、肿瘤体积大小、肿瘤部位、TNM分期、住院天数、术后是否有感染并发症等进行分类统计分析。结果共643例患者符合纳入、排除标准,其中术前贫血201例(31.3%),非贫血442例(68.7%);围手术期输血156例(24.3%),未输血487例(75.7%);术后115例(17.9%)发生感染并发症。倾向评分匹配后对围手术期输血组(81例)和未输血组(81例)进行对照分析,结果输血组的感染并发症发生率显著高于未输血组(分别为32.1%、17.3%,P=0.029),且中位住院天数更长(分别为23、20.5 d,P=0.008);单因素logistic回归分析显示围手术期输血是术后感染并发症的独立危险因素(OR=2.262,95%CI 1.078~4.747,P=0.031)。结论在接受结直肠恶性肿瘤手术的患者中,围手术期输血与术后感染并发症相关。

莫诺苷对小鼠骨髓源树突状细胞表型及功能的影响

目的:探究莫诺苷对小鼠骨髓源树突状细胞(bone-marrow derived dendritic cells,BMDCs)分化、表型和功能的影响。方法:体外培养C57BL/6小鼠BMDCs,分为对照组(RPMI 1640)、莫诺苷组、脂多糖组和莫诺苷+脂多糖联合处理组。用光学显微镜以及流式细胞术分别确认BMDCs形态变化和羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)的荧光强度;流式细胞术检测BMDCs表面CD80、CD86、MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ类分子的表达情况以及激活抗原特异性CD4^+T细胞活化、增殖和分化的能力;ELISA法检测BMDCs培养上清液中细胞因子IL-6和IL-12的含量。结果:与对照组相比,莫诺苷处理后BMDCs诱导分化过程中的增殖效率无明显差异;与脂多糖组相比,莫诺苷+脂多糖联合处理后上调成熟BMDCs表面CD80、CD86、MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ类分子的表达和IL-12的分泌,并促进BMDCs激活OVA323-339抗原特异性T细胞的活化、增殖以及向Th1分化。结论:莫诺苷促进小鼠BMDCs的成熟,上调其对OVA特异性CD4^+T细胞的抗原提呈功能。

Sel1L对小鼠骨髓源树突状细胞的影响

目的:研究Sel1L(Suppressor/enhancer of Lin-12-like)基因对小鼠骨髓源树突状细胞(BMDCs)分化及其功能的影响。方法:利用Cre-Loxp重组系统构建Sel1L基因敲除小鼠模型,用ELISA和实时荧光定量法检测BMDCs分泌细胞因子IL-6、IL-12的表达;用免疫印迹法(Western bolt)检测BMDCs细胞中Sel1L蛋白的表达;用流式细胞术检测BMDCs细胞CFSE、细胞表面分子CD80、CD86、MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ及其对特异性CD4^+T细胞抗原提呈能力的影响。结果:Sel1L的缺失抑制BMDC诱导分化过程中的增殖效率,上调DCs分泌因子的能力和MHC-Ⅰ的表达,减少MHC-Ⅱ的表达,并抑制BMDCs细胞对OVA_(323-339)抗原特异性T细胞的增殖。结论:Sel1L缺失可以抑制小鼠骨髓源树突状细胞的分化,下调DC对OVA特异性的CD4^+T细胞的抗原提呈功能。