玉米花粉转化方法的优化及其在玉米转化中的应用

以玉米自交系昌72的花粉作为遗传转化受体,分别采用超声波处理法、电击法进行转化,比较2种方法处理后花粉的萌发率,以及电击转化后的结实率,探索玉米花粉介导的转基因方法在玉米转化中的应用。结果显示,超声波处理花粉的萌发率为19.01%,电击法处理花粉的萌发率为31.88%,电击法处理花粉的萌发率明显高于超声波处理方法。后期结实统计显示,电击处理后结实株数比例为75%,平均每株结实4颗。

基于CRISPR-Cas9的拟南芥基因编辑后代鉴定技术的优化

利用CRISPR-Cas9(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats-CRISPR-associated nuclease 9)系统对植物进行定点编辑的技术已经日渐成熟,但对于被编辑植株后代的鉴定依旧费时费力,以拟南芥SDP1(Sugar-dependent 1)基因为编辑对象,优化编辑植株后代的鉴定方法。对SDP1基因序列进行分析表明,SDP1基因外显子上含有PAM(Protospacer adjacent motif)序列,且其上游合适的酶切位点有4个,选择第二外显子上含有最常见的SacⅠ酶切位点的20 bp序列作为基因敲除的靶位点,构建了CRISPR-SDP1-Cas9载体,实现对SDP1基因的定点编辑。对经过潮霉素筛选的T1株系DNA进行酶切鉴定和测序峰图分析,选出SacⅠ酶切为3条带的杂合编辑植株,随机挑选的71株T1植株中有24株发生了杂合编辑,编辑效率为16.9%。在48株T2转基因植株中有5株发生了纯合编辑,经测序编辑位点均为SacⅠ酶切位点上碱基插入。综上,选用待编辑基因上PAM序列附近合适的酶切位点作为编辑靶点,通过酶切和测序峰图分析来鉴定后代植株,相比于传统方法对后代植株提取DNA、PCR扩增靶位点、连接T载体后进行多次测序,此方法方便、快捷且经济实用,为CRISPR-Cas9基因编辑后代鉴定提供了简单、快捷的方法。

基于北斗LBS的测绘行业移动信息化平台设计与实现

随着河南省测绘工程院内部信息化建设的日益加强与信息化业务需求的逐渐扩大,GIS移动办公的实现已是迫在眉睫。通过分析河南省测绘工程院的出行办公需求,基于北斗的位置服务,依托ArcGIS API forAndroid和高德地图API,在移动端进行系统开发,实现生产管理、索引数据库综合管理、地理围栏服务等功能。平台的设计进一步提高了河南省测绘工程院的信息化水平,便捷了其职工出行办公的效率。

罗非鱼皮胶原蛋白改变菌体形态和细胞壁完整性实现抑菌作用研究

目的探讨罗非鱼皮酶溶性胶原蛋白(Pepsin soluble collagen peptide from Tilapia skin,PSCPT)、罗非鱼皮酸溶性胶原蛋白(Acid soluble collagen peptide from Tilapia skin,ASCPT)的制备及抗菌性能。方法罗非鱼皮经浸提、离心、透析和冷冻干燥等步骤获得干燥的PSCPT、ASCPT。采用含有PSCPT或ASCPT的胰蛋白胨大豆肉汤培养基振荡培养大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和白色念珠菌,定时测定细菌培养液的吸光度值、菌数、菌体细胞液电导率和细菌的形态特征。结果以牛胶原蛋白(Bovine skin collagen,BSC)为对照,PSCPT、ASCPT对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌均有不同程度的生长抑制作用,抑制率从22.97%±2.35%到65.21%±6.42%,其中PSCPT抑制铜绿假单胞菌作用显著,抑制率达到65.21%±6.42%;ASCPT抑制大肠杆菌作用微弱,抑制率只有22.97%±2.35%。血球计数板法得到的抑菌效果类似吸光度值得到的结果,但是抑制率存在差别。PSCPT、ASCPT造成大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌的菌体细胞液电导率从36.42±1.35μs/cm变化到185.80±4.70μs/cm,其中PSCPT使铜绿假单胞菌的电导率低至36.42±1.35μs/cm,ASCPT使白色念珠菌的电导率达到185.80±4.70μs/cm。电镜下观察到抑菌率高和电导率低的菌株出现菌体变形和细胞壁破裂等现象。结论与BSC相比,PSCPT、ASCPT从细菌抑制率、菌体细胞液电导率和细菌的形态特征体现出一定的抑菌特性。