基于网络药理学和分子对接技术探讨蒙药新黑苏嘎乌日勒治疗脑缺血再灌注损伤机制

目的:探究蒙药新黑苏嘎乌日勒治疗脑缺血再灌注损伤的作用机制。方法:通过TCMSP、BATMAN和GeneCards等数据库分别对药物及疾病靶点进行预测。利用Venny得到其共同靶点,并使用STRING软件构建PPI网络。运用David数据库开展GO生物及KEGG通路富集研究,并利用Cytoscape软件构建活性成分-关键靶点-重要通路网络。最后,利用Autodock等软件展开分子对接。结果:获得蒙药新黑苏嘎乌日勒治疗脑缺血再灌注损伤的关键靶点30个,重要生物过程15条,核心KEGG通路20条和主要活性成分10个。分子对接结果显示,主要活性成分与关键靶点结合能力值≤-1.2 kcal/mol。结论:网络药理学分析表明,蒙药新黑苏嘎乌日勒主要通过β-胡萝卜素、黄芩素、胡椒碱、金合欢素等有效成分作用于雌激素受体α(estrogen receptor 1,ESR1)、核因子-κBp65(uclear factor-κBp65,RELA)、肿瘤蛋白p53(tumor protein p53,TP53)和蛋白激酶B1(protein kinase B1,AKT1)等靶点,调节细胞凋亡、肿瘤坏死因子α(Tumor Necrosis Factorα,TNF-α)、低氧诱导因子-1(hypoxia-inducible factor-1,HIF-1)、磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol-3 kinase,PI3K)-AKT、雌激素等信号通路,参与细胞凋亡的正负调控、炎症反应、血管生成、缺氧反应等生物过程,从而达到治疗脑缺血再灌注损伤的作用。

基于TLR4/NF-κB通路研究蒺藜总皂苷对周围神经病理性疼痛的镇痛作用

目的:基于TLR4/NF-κB通路研究蒺藜总皂苷(gross saponins from tribulus terrestris,GSTT)对大鼠慢性坐骨神经损伤(chronic constriction injury,CCI)所引起的周围神经病理性疼痛是否具有镇痛作用。方法:选取雄性SD大鼠40只,随机分为假手术组(SHAM组)、CCI组、GSTT 100 mg/kg+CCI组、GSTT 200 mg/kg+CCI组、普瑞巴林+CCI组(阳性对照)5组,每组8只。除SHAM组,其余各组均制备CCI大鼠模型,分别以药物处理后,检测各组大鼠机械缩足反射阈值(paw withdrawal mechanical threshold,PWMT)、热敏潜伏期;以HE染色检测各组大鼠脊髓及背根神经节组织病理形态变化;免疫组化检测脊髓及背根神经节组织中NF-κB的表达。结果:与SHAM组相比,CCI组大鼠PWMT、热敏潜伏期明显降低(P<0.05);损伤侧脊髓背角及背根神经节的神经元、胶质细胞染色较深,并出现肿胀、萎缩等损伤,细胞核浓缩、丢失;损伤侧脊髓背角及背根神经节中NF-κB表达水平明显增高(P<0.05)。与CCI组相比,GSTT 100 mg/kg+CCI组、200 mg/kg+CCI组,普瑞巴林+CCI组大鼠PWMT、热敏潜伏期升高(P<0.05),上述病理变化也明显改善,损伤侧脊髓背角及背根神经节中NF-κB水平降低。结论:GSTT对CCI大鼠引起的周围神经病理性疼痛具有镇痛作用,可能与TLR4/NF-κB通路有关。

过表达阿尔茨海默病细胞模型中lncRNA SNHG16后DNA甲基转移酶1的变化

目的:探讨过表达阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease,AD)细胞模型中lncRNA SNHG16后DNA甲基转移酶1(DNMT1)的变化,为治疗阿尔茨海默病提供新的思路。方法:实验分为SH-SY5Y组;SH-SY5Y+Aβ1-42组;SH-SY5Y+Aβ1-42+pcDNA3.1(+)组;SH-SY5Y+Aβ1-42+pcDNA3.1(+)-SNHG16组进行,采用CCK 8检测法检测各实验组细胞的存活率;应用Real-time PCR实时荧光定量PCR检测各个实验组细胞中SNHG16和DNMT1的mRNA表达情况;用免疫细胞化学检测法检测各个实验组细胞中DNA甲基化转移酶1(DNMT1)蛋白的表达量。结果:通过比较SH-SY5Y组和SH-SY5Y+Aβ1-42组,后者SNHG16和DNMT1的mRNA表达降低;SH-SY5Y+Aβ1-42+pcDNA3.1(+)-SNHG16组较SH-SY5Y+Aβ1-42组DNMT1蛋白表达增加。结论:过表达lncRNA SNHG16可能提高阿尔茨海默病细胞模型中DNA甲基化转移酶1的表达量。