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拟南芥逆境响应蛋白SEP1的初步研究
1
作者
董文丹
高复旦
《上海师范大学学报(自然科学版)》
2023年第4期461-467,共7页
为了研究拟南芥逆境响应蛋白SEP1的生物学功能,通过CRISPR/Cas9基因编辑技术获得了SEP1基因缺失的拟南芥突变体sep1-1.和从诺丁汉拟南芥种子库(NASC)购买的SEP1基因敲降突变体sep1-2一样,sep1-1在正常条件下与野生型没有明显差异.但是在...
为了研究拟南芥逆境响应蛋白SEP1的生物学功能,通过CRISPR/Cas9基因编辑技术获得了SEP1基因缺失的拟南芥突变体sep1-1.和从诺丁汉拟南芥种子库(NASC)购买的SEP1基因敲降突变体sep1-2一样,sep1-1在正常条件下与野生型没有明显差异.但是在1200μmol photos∙m^(-2)∙s^(-1)高光处理8 h后,两个突变体新生叶片的叶绿体光系统Ⅱ(PSⅡ)的最大量子产量(Fv/Fm)和野生型(WT)相比有着不同程度的下调,说明PSⅡ的活性降低.亚细胞和叶绿体精细定位结果表明,SEP1是叶绿体基质类囊体膜蛋白.通过蓝绿温和凝胶电泳(BN-PAGE)和二向(2D)SDS-PAGE/蛋白免疫印迹分析发现:SEP1与某些未知蛋白结合形成一个分子质量约为100 ku的复合物,它们可能共同参与了PSⅡ的组装或修复.
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关键词
拟南芥
SEP1
高光胁迫
叶绿体光系统Ⅱ(PSⅡ)损伤修复
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职称材料
集胞藻6803藻胆体藻蓝蛋白多克隆抗体制备及其初步应用
被引量:
1
2
作者
张劲松
陈李萍
+3 位作者
高复旦
杜玲瑜
王全喜
马为民
《广东农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第11期1-5,9,共6页
通过PCR扩增出集胞藻6803 C-PC编码基因cpcA,构建表达质粒pET32a(+)-cpcA,转化大肠菌株BL21(DE3)pLysS,用IPTG诱导表达、经His-tag纯化后免疫日本大耳白兔获得多克隆抗体。间接ELISA法揭示该抗体效价可高达1∶1 025 000;蛋白免疫印迹确...
通过PCR扩增出集胞藻6803 C-PC编码基因cpcA,构建表达质粒pET32a(+)-cpcA,转化大肠菌株BL21(DE3)pLysS,用IPTG诱导表达、经His-tag纯化后免疫日本大耳白兔获得多克隆抗体。间接ELISA法揭示该抗体效价可高达1∶1 025 000;蛋白免疫印迹确定该抗体具有高度特异性。应用该抗体进行蛋白免疫印迹检测,结果发现C-PC蛋白在生长光与高光培养条件下的数量,以及与2个光系统间的连结数量均存在显著差异,为进一步研究藻胆体的杆在响应与适应机制中所承担的重要角色奠定了生化基础。
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关键词
藻蓝蛋白
多克隆抗体
集胞藻6803
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职称材料
集胞藻6803NdhO蛋白多克隆抗体制备及其初步应用
3
作者
赵娇红
高复旦
+2 位作者
魏兰珍
王全喜
马为民
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第6期64-69,共6页
蓝藻NADPH脱氢酶(NDH-1)是一种重要的光合膜蛋白复合体,参与CO2吸收、围绕光系统I的循环电子传递和细胞呼吸。迄今为止,人们在蓝藻细胞中已鉴定出17种NDH-1复合体亚基(NdhA-NdhQ)。最近,人们还获得了NdhO亚基的缺失突变株。然而,人们对N...
蓝藻NADPH脱氢酶(NDH-1)是一种重要的光合膜蛋白复合体,参与CO2吸收、围绕光系统I的循环电子传递和细胞呼吸。迄今为止,人们在蓝藻细胞中已鉴定出17种NDH-1复合体亚基(NdhA-NdhQ)。最近,人们还获得了NdhO亚基的缺失突变株。然而,人们对NdhO亚基的研究还不充份,至今仍不清楚它的功能角色。通过PCR扩增出集胞藻6803 NdhO亚基编码基因ndhO,构建表达质粒pET32a(+)-ndhO,转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS,用IPTG诱导表达、经His-tag纯化后免疫日本大耳白兔获得多克隆抗体。间接ELISA法揭示NdhO抗体效价可高达1∶1 025 000;蛋白免疫印迹确定该抗体具有高度特异性。应用该抗体进行蛋白免疫印迹检测,结果发现NdhO亚基仅存在于NDH-1活性复合体中。因此,NdhO多克隆抗体的获得将为进一步阐明该亚基所担任的功能角色奠定了生化基础。
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关键词
NdhO蛋白
多克隆抗体集
胞藻6803
原文传递
题名
拟南芥逆境响应蛋白SEP1的初步研究
1
作者
董文丹
高复旦
机构
上海师范大学生命科学学院
出处
《上海师范大学学报(自然科学版)》
2023年第4期461-467,共7页
文摘
为了研究拟南芥逆境响应蛋白SEP1的生物学功能,通过CRISPR/Cas9基因编辑技术获得了SEP1基因缺失的拟南芥突变体sep1-1.和从诺丁汉拟南芥种子库(NASC)购买的SEP1基因敲降突变体sep1-2一样,sep1-1在正常条件下与野生型没有明显差异.但是在1200μmol photos∙m^(-2)∙s^(-1)高光处理8 h后,两个突变体新生叶片的叶绿体光系统Ⅱ(PSⅡ)的最大量子产量(Fv/Fm)和野生型(WT)相比有着不同程度的下调,说明PSⅡ的活性降低.亚细胞和叶绿体精细定位结果表明,SEP1是叶绿体基质类囊体膜蛋白.通过蓝绿温和凝胶电泳(BN-PAGE)和二向(2D)SDS-PAGE/蛋白免疫印迹分析发现:SEP1与某些未知蛋白结合形成一个分子质量约为100 ku的复合物,它们可能共同参与了PSⅡ的组装或修复.
关键词
拟南芥
SEP1
高光胁迫
叶绿体光系统Ⅱ(PSⅡ)损伤修复
Keywords
Arabidopsis thaliana
SEP1
high-light stress
chloroplast photosystemⅡ(PSⅡ)damage repair
分类号
Q94 [生物学—植物学]
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职称材料
题名
集胞藻6803藻胆体藻蓝蛋白多克隆抗体制备及其初步应用
被引量:
1
2
作者
张劲松
陈李萍
高复旦
杜玲瑜
王全喜
马为民
机构
上海师范大学生命与环境科学学院
出处
《广东农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第11期1-5,9,共6页
基金
国家自然科学基金(30770175)
国家"973"计划项目(2009CB118500)
+1 种基金
教育部重点项目(209045)
上海市教委科研创新重点项目(08ZZ67)
文摘
通过PCR扩增出集胞藻6803 C-PC编码基因cpcA,构建表达质粒pET32a(+)-cpcA,转化大肠菌株BL21(DE3)pLysS,用IPTG诱导表达、经His-tag纯化后免疫日本大耳白兔获得多克隆抗体。间接ELISA法揭示该抗体效价可高达1∶1 025 000;蛋白免疫印迹确定该抗体具有高度特异性。应用该抗体进行蛋白免疫印迹检测,结果发现C-PC蛋白在生长光与高光培养条件下的数量,以及与2个光系统间的连结数量均存在显著差异,为进一步研究藻胆体的杆在响应与适应机制中所承担的重要角色奠定了生化基础。
关键词
藻蓝蛋白
多克隆抗体
集胞藻6803
Keywords
C-phycocyanin
Polyclonal antibody
Synechocystis sp.strain PCC 6803
分类号
Q949.2 [生物学—植物学]
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职称材料
题名
集胞藻6803NdhO蛋白多克隆抗体制备及其初步应用
3
作者
赵娇红
高复旦
魏兰珍
王全喜
马为民
机构
上海师范大学生命与环境科学学院
出处
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第6期64-69,共6页
基金
国家自然科学基金(30770175)
国家"973"计划(2009CB118500)
+1 种基金
教育部重点项目(209045)
上海市教委科研创新重点项目(08ZZ67)资助项目
文摘
蓝藻NADPH脱氢酶(NDH-1)是一种重要的光合膜蛋白复合体,参与CO2吸收、围绕光系统I的循环电子传递和细胞呼吸。迄今为止,人们在蓝藻细胞中已鉴定出17种NDH-1复合体亚基(NdhA-NdhQ)。最近,人们还获得了NdhO亚基的缺失突变株。然而,人们对NdhO亚基的研究还不充份,至今仍不清楚它的功能角色。通过PCR扩增出集胞藻6803 NdhO亚基编码基因ndhO,构建表达质粒pET32a(+)-ndhO,转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS,用IPTG诱导表达、经His-tag纯化后免疫日本大耳白兔获得多克隆抗体。间接ELISA法揭示NdhO抗体效价可高达1∶1 025 000;蛋白免疫印迹确定该抗体具有高度特异性。应用该抗体进行蛋白免疫印迹检测,结果发现NdhO亚基仅存在于NDH-1活性复合体中。因此,NdhO多克隆抗体的获得将为进一步阐明该亚基所担任的功能角色奠定了生化基础。
关键词
NdhO蛋白
多克隆抗体集
胞藻6803
Keywords
NdhO Polyclonal antibody Synechocystis sp. strain PCC 6803
分类号
Q819 [生物学—生物工程]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
拟南芥逆境响应蛋白SEP1的初步研究
董文丹
高复旦
《上海师范大学学报(自然科学版)》
2023
0
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职称材料
2
集胞藻6803藻胆体藻蓝蛋白多克隆抗体制备及其初步应用
张劲松
陈李萍
高复旦
杜玲瑜
王全喜
马为民
《广东农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2010
1
下载PDF
职称材料
3
集胞藻6803NdhO蛋白多克隆抗体制备及其初步应用
赵娇红
高复旦
魏兰珍
王全喜
马为民
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011
0
原文传递
已选择
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