构象锁定蜂毒肽联合光热疗法增强三阴性乳腺癌的溶瘤免疫治疗

构建共递送构象锁定蜂毒肽-3(stapled anoplin peptide-3,A3)与光能转化材料氧化石墨烯(graphene oxide,GO)的纳米载药系统A3@GMH,评价其对三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)的溶瘤免疫治疗作用。通过乳液模板法制备A3@GMH,并表征其理化性质。红外热成像仪考察A3@GMH的体内外光热转换能力。综合细胞增殖检测(cell counting kit-8,CCK-8)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放、活死细胞染色和超高分辨显微镜等实验考察A3@GMH对TNBC 4T1细胞的溶瘤活性。高内涵成像系统和流式细胞仪评价A3@GMH的4T1细胞靶向性质。体内外研究A3@GMH联合光热通过诱导4T1细胞免疫原性死亡(immunogenic cell death,ICD)发挥抗肿瘤的作用机制。结果显示,该研究所制备的A3@GMH具有明显的介孔和涂层结构,平均粒径为(308.9±7.5)nm,表面电势为(-6.79±0.58)mV,A3的包封率和载药率分别为23.9%±0.6%和20.5%±0.5%,并有良好的光热转换能力和生物安全性。A3@GMH可主动介导4T1细胞裂解及LDH释放等溶瘤特征与ICD效应,联合光热疗法(photothermal therapy,PTT)时具有更好的体外抗肿瘤活性。A3@GMH在体内联合2次光热治疗即可高效诱导ICD效应,激活机体的抗肿瘤免疫,有效抑制4T1荷瘤小鼠原位乳腺癌的肿瘤生长,实现88.9%的抑瘤率且无明显毒副作用。该研究提示A3联合PTT可显著增强TNBC的溶瘤免疫治疗,亦为中药来源抗肿瘤肽在TNBC治疗中的创新应用提供依据。