银杏叶提取物对肝纤维化大鼠肝组织COX-2表达的影响

目的:观察银杏叶提取物(GbE)对肝纤维大鼠肝组织环氧合酶-2(COX-2)、Ⅰ型胶原表达的影响,探讨其抗肝纤维化的作用机制。方法:采用40%的CCl4皮下注射6周建立大鼠肝纤维化模型,以200、100、50mg.kg-1.d-1的GbE干预,原位杂交检测肝组织COX-2mRNA表达,免疫组化检测肝组织Ⅰ型胶原、COX-2蛋白表达。结果:模型组大鼠肝组织Ⅰ型胶原蛋白、COX-2mRNA和蛋白表达均较正常组明显增强,应用GbE干预后,大鼠Ⅰ型蛋白、COX-2mRNA和蛋白表达均明显减少。结论:GbE抗肝纤维化作用的机制之一可能与其下调肝组织中COX-2的表达,减少胶原的产生,改善肝脏微循环有关。

大肠杆菌甘露糖异构酶(MI)基因克隆及功能研究

甘露糖异构酶(EC5.3.1.7,Mannose isomerase,简称MI)能够催化果糖和甘露糖之间的异构转化。甘露糖加氢催化形成甘露醇,因此甘露糖异构酶的研究为工业生产甘露糖和甘露醇提供了新的可能途径。本研究以Escherichia coliJM109基因组DNA为模板,PCR扩增mi基因。结果表明,所克隆的mi基因与E.colistr.K-12substr.MG1655的MI基因序列一致性为99.9%,氨基酸序列一致性为99%。该基因能够在E.coliBL21(DE3)中进行高效诱导表达,诱导出51.4kD的特异性融合蛋白。酶学研究表明,该酶最适反应温度为37℃,最适pH为7.5,甘露糖为最佳反应底物,反应平衡时果糖与甘露糖的比值约为2.7。

醒脾养儿颗粒辅助治疗婴幼儿抗生素相关性腹泻临床研究

目的:观察婴幼儿抗生素相关性腹泻时加用醒脾养儿颗粒后的临床疗效。方法:收集因肺炎、化脓性扁桃体炎住院而引起的抗生素相关性腹泻165例。采用随机对照法分为观察组85例和对照组80例。对照组给予酪酸梭菌二联活菌散治疗,观察组同时给予醒脾养儿颗粒联合酪酸梭菌二联活菌散治疗,比较两组的临床治疗效果。结果:观察组的腹泻次数、体温正常时间、止泻时间、住院时间均明显低于对照组(P<0.05)。治疗后3d和5d,观察组二胺氧化酶水平低于对照组(P<0.05)。观察组治疗有效率达97.7%,高于对照组86.3%(P<0.05)。结论:醒脾养儿颗粒辅助治疗婴幼儿抗生素相关性腹泻效果较好,与肠道益生菌制剂酪酸梭菌二联活菌散联合使用,临床效果良好,可提高益生菌制剂单用的治疗效果,更加快速的缩短腹泻病程及住院时间。

基于结构比较的阜新市产业结构评价

为了从评价产业结构为阜新市发展提供可行性的思路,利用hamming贴近度方法,将阜新市产业结构与"标准结构"和"参照结构"进行比较,探索了阜新市产业结构问题,提出对阜新市产业结构优化、升级的一些方法,为阜新市能尽快实现产业结构调整,拥有主导产业提供了可参考的依据。

寄生柑橘的根腐线虫种类鉴定

从福建省的柑橘根部发现根腐线虫侵染,经形态学鉴定有咖啡根腐线虫(Pratylenchus coffeae)和玉米根腐线虫(P.ze-ae),咖啡根腐线虫为优势种。

pGEM-8Hepc克隆载体的构建与序列分析

hepcidin是一种由肝脏合成的富含半胱氨酸的小分子肽,它的主要生物学功能是维持机体铁稳态,并且具有抗菌活性。本实验从大鼠肝脏组织克隆出hepcidin基因,用同尾酶法构建多拷贝串联基因克隆载体pGEM-nHepc(n=1,2,4,8)(单个hepcidin基因之间用一段连接肽的DNA连接),分别含有不同拷贝首尾串连的hepcidin cDNA,并在大肠杆菌DH5α中扩增。重组体经双酶切和PCR鉴定后进行序列测定,所得结果与genbank中的大鼠序列比对,结果完全正确,为后续进一步的表达纯化奠定了基础。

Rb荧光素酶报告基因检测系统构建及检测能力评估

目的构建Rb荧光素酶报告基因检测系统并检测Rb基因的活化和抑制水平,为多种肿瘤的靶向治疗药物筛选提供实验基础。方法通过双酶切将人工合成的Rb反应原件基因序列连接到报告基因载体pGL6-TA的多克隆位点区,并转化E.coli DH5α感受态细胞构建载体pGL6-Rb-Luc。将基因测序序列正确的pGL6-Rb-Luc质粒和对照pGL6-TA质粒分别转染人肾上皮细胞系HEK293,通过抗性基因筛选,可获得稳定表达Rb荧光素酶报告基因的HEK293-Rb-Luc单克隆细胞株和对照细胞株,再分别通过血清刺激和CDK4/6抑制剂Palbociclib来检测报告基因检测系统HEK293-Rb-Luc的激活作用以及抑制作用。结果分析载体的测序结果并进行比对,确定构建的载体pGL6-Rb-Luc中Rb反应元件基因序列已正确插入载体多克隆位点区。HEK293-Rb-Luc细胞株经无血清培养同步后,恢复血清培养6、12、24 h细胞中荧光素酶的活性均显著升高(P<0.001),对照细胞未发生显著变化。相比于0 nmol/L Palbociclib组,25、50、75、100 nmol/L的CDK4/6抑制剂Palbociclib使Rb活性的抑制率分别达6.90%、40.23%、50.57%、52.07%(P<0.05)。结论已成功构建并筛选出Rb荧光素酶报告基因检测系统HEK293-Rb-Luc且能够有效地检测Rb的活化水平。

人KIBRA基因真核表达载体的构建及生物信息学分析

目的构建人的肾脏脑蛋白(human kidney and brain protein, KIBRA)编码区全长的真核表达载体,为在乳腺癌细胞水平研究KIBRA生物学功能提供模型。方法提取人乳腺癌细胞系MCF7总RNA,反转录后再通过PCR扩增KIBRA(NM001161661.2)编码区全长,并克隆至真核表达载体pCMV-Blank上,鉴定正确后命名为pCMV-KIBRA。将其转染MCF7细胞,48 h后实时定量PCR和Western blotting检测KIBRA的表达。结合生物信息学软件分析KIBRA的一级、二级、三级结构和转录后修饰位点。结果菌液PCR、双酶切和测序结果均表明载体pCMV-KIBRA中插入的KIBRA序列正确。载体转染MCF7细胞可使KIBRA的mRNA和蛋白水平显著增高。生物信息学分析KIBRA由1 119个氨基酸组成,存在52个磷酸化位点、1个乙酰化位点和5个泛素化位点,且二级结构主要为α-螺旋和无规则卷曲。结论成功构建人KIBRA编码区全长的真核表达载体,并在乳腺癌细胞系MCF7中过表达,为在乳腺癌中研究KIBRA的生物学功能奠定了基础。

ISO9000族理念下体育与健康课程质量管理体系研究

创新学校体育管理,改革传统管理方式,优化管理流程,打造适应深化体育与健康课程改革与发展需要的升级版管理方法,这不仅是一个复杂的理论问题,也是一个棘手的实践问题。本文以ISO9000为方法论基础,运用文献资料法、专家访谈法、逻辑归纳法等方法对体育与健康课程质量管理体系进行研究。

基于立体视觉与激光雷达的车辆目标外形位置融合算法研究

环境感知技术是智能汽车的关键技术之一,单独使用视觉传感器或激光雷达在目标检测和目标定位方面存在局限性。本文在图像和激光雷达目标检测的基础上,提出了一种基于立体视觉与激光雷达的车辆目标外形位置融合算法。首先,采用深度学习方法对图像和点云数据进行目标检测,再通过基于目标三维点和目标种类的目标外形位置估计方法确定目标的外形和位置,最后在数据关联后对同一时刻的图像目标及点云目标进行融合处理,获取目标的外形和位置。在KITTI数据集以及实际道路场景上验证了本文算法,实验结果表明,本文方法在检测精度上分别比YOLOv3网络、Point-GNN网络提高了5.72%和1.8%。另外,在20 m内目标外形及位置平均误差分别为4.34%和4.52%。

稻水象甲监测防治技术综述

稻水象甲是一种检疫性害虫,自2013年入侵以来,严重威胁达州水稻生产安全。通过对近年来稻水象甲的监测防治技术研究情况进行综合分析,介绍了稻水象甲的多种防控措施,为全面防治稻水象甲提供了科学依据。

稀土铈盐钝化对X70碳钢大气腐蚀行为的影响

针对稀土铈盐钝化在大气环境中的腐蚀影响,采用失重法、电化学阻抗谱(EIS)、动电位极化曲线(DP)测试以及扫描电子显微镜(SEM)、能谱仪(EDS)观察等研究了X70碳钢表面不同浓度稀土铈盐制得的转化膜的大气腐蚀行为。结果表明:适当的铈盐钝化可以有效提高X70碳钢的腐蚀电位,降低腐蚀电流密度,增大容抗弧半径,提高耐大气腐蚀性能;当稀土铈盐浓度为0.09 g/L时,X70碳钢的耐大气腐蚀效率最高为62.3%,原因在于适量的稀土铈盐可以增加钝化膜的致密性,形成自愈性修复及大量消耗腐蚀阴极区的氧气。

野生型p27和核定位信号缺失型p27真核表达载体的构建及表达

目的构建人野生型p27(p27WT)和核定位信号缺失型p27(p27△NLS)的真核表达载体,并在HEK293T细胞中进行表达,为细胞中p27核浆定位的变化及其不同的生物学功能研究提供细胞基础。方法提取人乳腺癌细胞系MCF7总RNA,反转录cDNA后,分别进行p27全长和非NLS区片段的PCR扩增,获得p27WT全长(CDKN1B,NM_004064.5)和p27△NLS编码区序列,分别将其克隆至真核表达载体pCMV-Blank,经菌液PCR、双酶切和测序鉴定。电穿孔法转染HEK293T细胞,48 h时分别提取胞核蛋白和胞质蛋白,Western blotting检测p27在细胞质和细胞核中的蛋白表达。结果测序结果显示,真核表达载体pCMV-Blank中插入的p27WT序列和p27△NLS序列均与NM_004064.5序列相一致。pCMV-p27WT转染HEK293T细胞后,细胞总p27蛋白表达显著增加,核浆分离检测发现其在细胞质和细胞核中均表达;而pCMV-p27△NLS转染HEK293T细胞的总p27蛋白表达也显著增加,核浆分离检测发现其主要在细胞质中表达。结论成功构建人p27WT和p27△NLS的真核表达载体,并在HEK293T细胞中成功表达,为p27蛋白在肿瘤细胞周期中的功能研究提供了细胞基础。

小议低年级识字教学

识字能力是小学低年级学生学习能力的基础。一年级学生年龄偏小,一打开课本就是大量的抽象的归类识字,这就决定了识字教学是小学低年级语文教学的重点,也是难点。为了使学生在愉快轻松的气氛中主动地识字,教师要根据儿童年龄特点,有意识地激发他们的识字兴趣,

论初中语文教学中如何培养学生积极参与课外阅读的方法

在初中语文教学中,教师除了要对教材知识进行详细讲授以外,还要高度重视课外阅读教学,不仅能够拓宽学生视野,同时也能深化学生对所学知识的理解。而对于初中学生而言,其本身的课外阅读兴趣与动机并不强烈,所以教师需要找到培养学生参与课外阅读积极性的方法,以此作为课外阅读教学的基础,从而提高学生课外阅读质量与效率。

如何活跃小学语文的课堂气氛探索

受身心发展水平的影响,小学生对于知识内容很难形成持续性的关注度,这就对小学语文教学造成一定程度的影响,为了吸引学生的注意力,语文教师必须营造活跃的课堂气氛,激发学生的学习兴趣,本文就如何活跃小学语文的课堂气氛进行研究和探索。

植物受害排查与修复

本文对植物受害的类别、排查、消除及修复进行了综述。

南京地区2010～2011年度呼吸道感染患儿腺病毒的流行病学研究

本研究为了解南京地区儿童腺病毒(ADV)感染的流行特点及型别,收集2010年8月至2011年7月南京医科大学附属南京儿童医院住院及门诊呼吸道感染患儿的鼻咽抽吸物(NPA)及咽拭子(NPS)共644例,采用巢氏聚合酶链反应法(Nested-PCR)检测ADV hexon基因,将阳性PCR扩增产物进行测序、同源性和进化分析。同时对12种其他呼吸道相关病毒进行PCR检测,包括人博卡病毒(HBoV),呼吸道合胞病毒(RSV),人鼻病毒(HRV),副流感病毒1～4型(PIV1-4),流感病毒A和B(IFVA/B),人偏肺病毒(HMPV),冠状病毒NL63和HKU1(HCoV-NL63和HCoV-HKU1)。结果显示:644例标本中共检出ADV阳性扩增产物171份,检出率为26.55%,3型120例(70.18%,120/171),7型16例(9.36%,16/171),1型12例(7.02%,12/171),2型10例(5.85%,10/171),5型6例(3.51%,6/171),6型3例(1.75%,3/171),57型3例(1.75%,3/171),41型1例(0.58%,1/171)。ADV感染呈全年散发,其发病高峰主要在4～7月。以7岁以下儿童多见(96.49%)。171例ADV感染患儿中有99例(57.89%)存在混合感染,其中以呼吸道合胞病毒(RSV)、人鼻病毒(HRV)多见。ADV阳性患儿诊断以下呼吸道感染为主(63.16%),肺炎占30.41%。结论:ADV是2010年8月到2011年7月南京地区儿童呼吸道感染的重要病原之一,其优势流行株为3型,长期监测其流行型别具有重要意义。

脾氨肽冻干粉对儿童反复呼吸道感染的临床疗效及对免疫功能的影响

目的探讨脾氨肽冻干粉对儿童反复呼吸道感染的治疗效果以及药物对患儿免疫功能产生的影响。方法自2012年1月至2016年12月间，将西安市中心医院儿科收治的小儿反复呼吸道感染者116例作为研究对象，按照数字随机表法分为研究组和对照组各58例，对照组患儿给予常规抗感染治疗，研究组患儿在常规治疗的基础上联合使用脾氨肽冻干粉进行治疗，观察两组患儿的临床效果以及免疫功能变化情况。结果研究组患儿临床总有效率为94.83%，明显高于对照组的77.59%，差异具有统计学意义（P〈0.05）；治疗后两组患儿免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）A、IgG、IgM和C3等指标水平均明显升高，其中研究组患儿升高水平均明显优于对照组，差异具有统计学意义（P〈0.05）；治疗后研究组患儿CD3＋、CD4＋、CD4＋/CD8＋明显升高，CD8＋明显降低，改变程度明显优于对照组，差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论在常规治疗的基础上联合脾氨肽冻干粉治疗儿童反复呼吸道感染可提高患儿临床治疗总有效率，改善患儿免疫功能各项指标，效果明显，可在临床范围内推广使用。

122例重症肺炎患儿支气管肺泡灌洗液的病毒检测分析

目的了解湖南长沙地区重症肺炎患儿中呼吸道病毒的感染状况。方法2011年1月至2011年12月，收集重症肺炎儿童的肺泡灌洗液标本122份，采用巢氏或普通逆转录聚合酶链反应（nested-PCR或RT—PCR）对腺病毒（ADV）、博卡病毒（HBoV）及副流感病毒1、2和4（PIV1、2、3、4）、呼吸道合胞病毒（RSV）、鼻病毒（HRV）、流感病毒A、B（IFVA—B）、人偏肺病毒（HMPV）、冠状病毒HKUl及NL63（HCoV-HKU1、HCoV．NL63）进行检测。结果122份重症肺炎患儿肺泡灌洗液标本中，60份病毒阳性（49．1％），其中ADV检出率最高（40．98％，50／122），其次为RSV（7．37％，9／122），HBoV（7．37％，9／122）。2种病毒混合感染有21例，占35％（21／60），40％（20／50）的ADV阳性存在混合感染。结论2011年，腺病毒感染是长沙地区重症肺炎的重要病因，其中腺病毒的混合感染在重症肺炎中常见。