钙络合剂BAPTA-AM对胞外酸化诱导大鼠关节软骨细胞自噬作用的影响及其可能机制

目的观察BAPTA-AM对胞外酸化诱导大鼠关节软骨细胞自噬作用的影响,探讨其可能的作用机制。方法体外使用胰酶-Ⅱ型胶原酶消化法分离提取大鼠关节软骨细胞,分为正常组(p H 7.4)、酸化组(p H 6.0)、以及分别经BAPTA-AM处理的正常组和酸化组,激光共聚焦技术检测软骨细胞胞内钙离子变化,实时荧光定量PCR法检测细胞自噬基因Beclin-1、ULK1 mRNA的表达,Western blot法检测自噬蛋白LC3的表达,吖啶橙染色分析细胞自噬溶酶体形成情况。结果与p H 7.4正常组比较,p H 6.0酸化刺激明显增加大鼠关节软骨细胞内Ca2+的浓度,且自噬标志物Beclin-1、ULK1 mRNA及LC3Ⅱ蛋白表达均明显升高,酸性自噬溶酶体形成增多,同时酸化刺激能引起Ca MKKβ及pAMPK蛋白表达水平增高,磷酸化蛋白p-m TOR水平明显降低。BAPTA-AM酸化组自噬水平和Ca MKKβ及p-AMPK表达明显降低,p-m TOR表达明显升高。结论 BAPTA-AM能明显减弱胞外酸化诱导软骨细胞自噬作用,其机制可能与抑制胞内Ca2+有关。

鬼针草总黄酮部分化学成分研究

目的对鬼针草中的化学成分进行分离纯化,并筛选出具有抗肝纤维化活性的单体化合物。方法采用大孔树脂、硅胶、Sephadex LH-20、MCI小孔树脂、十八烷基硅烷键合硅胶柱等柱层析的方法进行分离纯化,并利用波谱技术进行化合物的鉴定。应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法体外检测单体化合物对肝星状细胞T6(HSC-T6)的抑制作用。结果从鬼针草中分离鉴定的化合物为3-羟基乙酰基吲哚(1)、山奈酚(2)、6,7,3',4'-四羟基橙酮(3)、槲皮素(4)、奥卡宁(5)、松脂素(6)、1,2,13-三羟基-3,11(E)-十三二烯-5,7,9-三炔(7)、异奥卡宁(8)、邻苯二甲酸-双(2'-乙基庚基)酯(9)、山奈酚-3-O-α-L-鼠李糖苷(10)、(2S/2R)-异奥卡宁-7-O-β-D-(2″,4″,6″-三乙酰基)吡喃葡糖苷(11/12)、2-O-β-D-吡喃葡萄糖苷-1,13-二羟基-3,11(E)十三二烯-5,7,9-三炔(13)。结论化合物6,9为首次从鬼针草种属中分离得到。其中黄酮类化合物2,4具有较强的体外抑制HSC-T6细胞的增殖作用。

莪术二酮对大鼠血瘀模型血液流变学指标的影响

目的观察莪术二酮(curdione)对大鼠血瘀模型血液流变学与纤溶指标的影响,同时研究其体外溶栓作用,从而探讨其活血化瘀功效的作用机制。方法以肾上腺素与冰水刺激为致瘀因素复制大鼠血瘀证动物模型,观察莪术二酮对血瘀证模型全血黏度及血浆黏度变化,检测纤维蛋白降解产物(FDP)和D-二聚体(DD);体外测定对不同时间大鼠血栓的溶解百分率,观察莪术二酮溶栓作用。结果莪术二酮可减低血瘀模型大鼠全血黏度和血浆黏度,改善血液循环(P<0.05);能降低DD水平;但对FDP水平无影响(P>0.05),且对体外血栓的溶栓作用不显著。结论莪术药材的"行气破血"作用与莪术二酮改善血液流变学指标有关,但实验剂量下莪术二酮溶栓作用不显著。

4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯对人乳腺癌细胞株MDA-MB-231诱导分化作用及可能的机制研究

目的观察4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯(4-anino-2-trifluoromethyl-phenyl retimate,ATPR)对人乳腺癌细胞株MDA-MB-231抑制增殖诱导分化作用,探讨其可能的作用机制。方法体外培养人乳腺癌细胞株MDA-MB-231,MTT检测细胞增殖,绘制细胞生长曲线,瑞氏-吉姆萨染色观察细胞形态变化,酶联免疫法检测粘蛋白MUC-1活性,流式细胞术检测细胞周期,实时荧光定量PCR法和Western blot法检测维甲酸受体(retinoic acid receptors,RAR)RARα、RARβ、RARγ和维甲类受体(retinoid X receptors,RXR)RXRα、RXRβ、RXRγ基因和蛋白的表达。结果 ATPR能够抑制MDA-MB-231细胞的增殖,具有浓度-时间依赖性,染色后镜下观察MDA-MB-231细胞生长密度降低,形态趋于正常。ELISA结果显示,ATPR作用后明显降低MDA-MB-231细胞培养上清中MUC-1的浓度;流式细胞术结果显示,MDA-MB-231细胞中G0/G1期表达量增加,S期表达量减少,细胞阻滞在G0/G1期比例增加。q-RT-PCR和Western blot结果显示,ATPR作用后,RARγ的mRNA和蛋白表达水平降低,RXRs mRNA和蛋白水平无明显变化。结论 ATPR可以抑制人乳腺癌细胞株MDA-MB-231增殖并诱导其分化,其机制可能与RARγ的表达有关。

酸性条件下神经生长因子对大鼠关节软骨细胞酸敏感离子通道1a表达的影响

目的:pH 6.0培养条件下观察神经生长因子(NGF)对大鼠关节软骨细胞酸敏感离子通道1a(ASIC1a)基因和蛋白表达的调控作用及其机制。方法:体外提取培养原代大鼠膝关节软骨细胞,酸性环境下观察细胞NGF高亲和力受体TrkA的表达情况;不同浓度NGF刺激观察ASIC1a的表达变化;10 ng/m L NGF刺激不同时间胞外信号调节激酶(ERK1/2)及c-fos磷酸化的时效关系,阻断ERK1/2(PD98059 30μmol/L)后观察cfos磷酸化水平和ASIC1a的表达;RT-PCR检测ASIC1a基因的表达,Western Blot检测Trk-A、ASIC1a、ERK1/2、p-c-fos蛋白的表达。结果:在酸性环境下NGF的高亲和力受体Trk-A表达比正常环境可高出3倍,ASIC1a的表达随着NGF的浓度升高而升高,10 ng/m L时趋于稳定;NGF刺激后,ERK1/2及c-fos活化增强,4 h达到最大水平;阻断了ERK1/2之后,p-c-fos和ASIC1a蛋白表达下降,差异具有显著性(P<0.01)。结论:在酸性环境下,NGF促进了大鼠关节软骨细胞ASIC1a表达的上调,并且ERK1/2信号通路的活化可能参与了这一过程。

锂盐联合喹硫平与氯氮平应用于双相躁狂发作的药物经济学评价

目的:对锂盐联合二代抗精神病药喹硫平与氯氮平的治疗方案做药物经济学评价,为双相躁狂发作患者临床合理用药提供参考。方法:选取2015年1月~2019年10月于安徽某三级精神专科医院就诊的双相躁狂患者的病历资料进行回顾性分析。在综合考虑患者治疗前后贝克-拉范森躁狂量表(BRMS)评分以及不良反应发生情况的基础上,对锂盐联合喹硫平与锂盐联合氯氮平这两种治疗方案进行药物经济学评价。结果:锂盐联合喹硫平组共纳入有效病例88例,锂盐联合氯氮平组纳入病例43例。两组药物治疗的缓解率差异无统计学意义(P>0.05),锂盐联合喹硫平组的不良反应发生率更低。最小成本分析结果显示锂盐联合喹硫平组住院成本低于锂盐联合氯氮平组。敏感性分析结果与基本分析保持一致。结论:锂盐联合氯氮平药物成本低,但是住院总成本显著高于锂盐联合喹硫平组。故锂盐联合喹硫平相对于锂盐联合氯氮平治疗双相情感障碍躁狂发作更具有经济性。

精神专科医院基本药物使用情况分析

目的对医院2018年1-6月基本药物使用情况进行分析,为基本药物制度的落实提供参考。方法通过信息管理系统提取医院2018年1-6月基本药物使用情况和销售金额,用Excel软件对医院基本药物使用情况进行分析统计。结果 2018年1-6月,医院基本药物配备占基本用药目录比例为49.34%(西药占比50.59%,中成药占比38.46%);基本药物总销售额占全部药物销售额比例为33.85%(西药占比33.71%,中成药占比46.71%);药物缺货率为3.90%(基本药物为6.10%,非基本药物为2.39%);销售金额排名前5位,西药多为精神科用药,中成药多为辅助性用药。结论医院基本药物配备率和使用比例有待进一步提高,以促进临床合理用药。