二斑叶螨抗四螨嗪品系筛选及其解毒酶活力变化

【目的】筛选二斑叶螨对四螨嗪的抗性,并明确其解毒酶的变化。【方法】采用室内生物测定和生化分析方法,研究二斑叶螨对四螨嗪的抗性发展趋势及其解毒酶活力变化。【结果】室内用四螨嗪筛选二斑叶螨21代(Clo-R21品系),抗性倍数(RR)为122.26;Clo-R21品系对哒螨.四螨嗪和浏阳霉素具有较高的交互抗性,RR分别为21.80和10.66;对阿维菌素、甲氰菊酯、三氯氟氰菊酯、氯氰菊酯、三唑锡和苦皮藤生物碱具有低水平的交互抗性,RR分别为6.85、5.45、5.02、3.88、3.48、1.68;对苯丁锡、唑螨酯、噻螨酮具有负交互抗性,RR分别为0.72、0.65、0.55;增效剂磷酸三苯酯(TPP)、顺丁烯二酸二乙酯(DEM)、胡椒基丁醚(PBO)、增效磷(SV1)对抗Clo-R21品系的增效比值分别为1.39、1.70、6.78、1.64;Clo-R21品系体内羧酸酯酶(CarE)、酸性磷酸酯酶(ACP)、碱性磷酸酯酶(ALP)、谷胱甘肽-S-转移酶(GSTs)和多功能氧化酶(MFO)分别是敏感品系的2.25、2.04、1.91、1.98和26.68倍。【结论】二斑叶螨对四螨嗪的抗性主要受MFO介导,而CarE、ACP、ALP和GSTs也参与四螨嗪抗性的形成。

双氟磺草胺与2甲4氯异辛酯的联合作用及药效评价

为明确双氟磺草胺与2甲4氯异辛酯复配除草的联合作用类型及在小麦田应用的可行性,采用室内生物测定和田间药效试验,研究了双氟磺草胺与2甲4氯异辛酯对播娘蒿、荠菜的联合毒力,对当茬小麦的安全性及田间除草效果。结果表明,双氟磺草胺与2甲4氯异辛酯混用对播娘蒿、荠菜的杀灭活性均为加成作用,二者配比在1∶105附近比较适宜。42.4%双氟磺草胺·2甲4氯异辛酯油悬浮剂（混配比例为1∶105）对当茬作物小麦的安全性较好,不同剂量处理区小麦产量与人工除草区均无显著差异。该药剂有效剂量480~640 g/hm2对小麦田阔叶杂草防除效果较好,施药后40 d株防效和鲜质量防效均在90%以上。综合分析,双氟磺草胺与2甲4氯异辛酯复配效果显著,对小麦使用安全。

抗甲氰菊酯二斑叶螨种群对12种杀螨剂的抗药性及交互抗性

采用生物测定方法对室内选育的抗甲氰菊酯二斑叶螨种群和天水、静宁采集的抗性二斑叶螨即天水抗性种群（Tianshui-Resistance,Tsh-R）和静宁抗性种群（Jingning-Resistance,Jn-R）对12种杀虫杀螨剂交互抗性和抗药性进行了研究.结果表明：室内用甲氰菊酯药剂筛选二斑叶螨38代,抗性达到247.35倍;甲氰菊酯种群对三氯氟氰菊酯、苦皮藤生物碱、氯氰菊酯、三唑锡和四螨嗪有明显的交互抗性,抗性指数（RI）分别为19.53、19.02、12.13、8.80和5.13,而对克螨特、哒螨.四螨嗪、阿维菌素、哒螨灵、噻螨酮、毒死蜱的交互抗性指数均在5以下.Tsh-R和Jn-R二斑叶螨抗性种群对甲氰菊酯有很高的抗药性,RI值分别为103.76和92.30;对三氯氟氰菊酯、苦皮藤生物碱、氯氰菊酯、克螨特也有一定程度的抗药性,RI值的范围为5.04~29.76;对四螨嗪、哒螨.四螨嗪、阿维菌素、哒螨灵、噻螨酮、毒死蜱、三唑锡有轻微或无抗性,RI值均小于5.00.

设施草莓促成栽培中灰霉病防治药剂筛选试验初报

为筛选出河南省设施草莓促成栽培中安全、高效的草莓灰霉病防治药剂,特选取不同类型的药剂进行了相关防治效果试验。结果表明,供试6种药剂对草莓灰霉病均有一定的防效,在第2次施药后7 d,6种药剂对草莓灰霉病的防效在51.42%~71.13%之间。其中,新型复配化学药剂30%啶酰·咯菌腈悬浮剂、38%唑醚·啶酰菌水分散粒剂对草莓灰霉病的防效较高,其次是生物药剂3亿CFU/g哈茨木霉菌可湿性粉剂、1000亿CFU/g枯草芽孢杆菌可湿性粉剂,而常规化学药剂50%腐霉利可湿性粉剂、40%嘧霉胺悬浮剂对草莓灰霉病的防效较低。

二斑叶螨对甲氰菊酯的抗性选育及解毒酶活力变化

为了明确二斑叶螨Tetranychus urticae Koch对甲氰菊酯产生抗性的机理,在室内模拟田间药剂的选择压力,用甲氰菊酯对二斑叶螨敏感品系(S)进行逐代汰选,选育至38代时,获得了抗性倍数(resistance ratio,RR)为247.35的抗甲氰菊酯品系(Fe-R)。对S和Fe-R解毒酶活性的分析表明,Fe-R_(38)体内羧酸酯酶(carboxylesterase,CarE)、酸性磷酸酯酶(acid phosphatase,ACP)、碱性磷酸酯酶(alkaline phosphatase,ALP)、谷胱甘肽-S-转移酶(glutathione stransferase,GSTs)和多功能氧化酶(mixed function oxidase,MF0)较S体内相应酶的活力显著升高(p<0.05),其相对比值(R/S)分别为1.822,13.941,3.789,4.262和17.386。此外,筛选至第9,19,25,32代时,除Fe-R_(25)和Fe-R_(32)的MFO活性与S相比有显著性差异(P<0.05)外,其余解毒酶(CarE,ACP,ALP,GSTs)的活性与S相比均无显著性差异(P>0.05)。筛选至第38代时,5种解毒酶的活力与S相比均差异显著(P<0.05)。结果说明二斑叶螨Fe-R随着筛选代数的增加(第25代后),MFO活性的上升可能是二斑叶螨对甲氰菊酯产生抗性的主要原因。

河南省麦田猪殃殃对苯磺隆的抗性及ALS基因突变研究

为明确河南省部分地区麦田猪殃殃对苯磺隆的抗性水平及抗性靶标分子机制,对18个猪殃殃种群进行了乙酰乳酸合成酶(acetolactate synthase,ALS)离体活性测定和ALS基因突变分析。结果表明,种群PDS-1、ZK-1、LH-1对苯磺隆产生了较高的抗性,ALS离体活性测定所得I_(50)分别为11.27、10.26、8.19μmol·L^(-1),抗性指数分别为93.92、85.50、68.25。种群ZK-1的6个检测株中,ALS基因第590位的C突变为T,ALS酶第197位脯氨酸(CCC)突变为亮氨酸(CTC);种群PDS-1的6个检测株中,ALS基因第1 128位的T突变为A,ALS酶第376位天冬氨酸(GAT)全部突变为谷氨酸(GAA);种群LH-1的6个检测株中,3株未检测到突变,另外3株的ALS基因第1 128位的T突变为G,ALS酶第376位天冬氨酸(GAT)突变为谷氨酸(GAG)。靶标ALS基因突变可能是猪殃殃对苯磺隆产生高抗性的重要原因之一。

河南省猪殃殃对苯磺隆的抗性检测

为了明确河南省猪殃殃对苯磺隆的抗性水平及分布现状,通过温室整株生物测定法,测定了河南省境内36个猪殃殃种群对苯磺隆的敏感性。结果表明,河南省大部分猪殃殃种群已经对苯磺隆产生了不同程度的抗性,所测样品中,高抗种群3个,中抗种群9个,低抗种群13个,共25个,占总采样数的69.44%;敏感种群11个,占30.56%。说明苯磺隆在河南多地存在高抗性风险,同类乙酰乳酸合成酶抑制剂类除草剂需科学施用。

二斑叶螨内参基因的筛选及解毒酶基因的表达水平

【目的】筛选二斑叶螨(Tetranychus urticae)敏感(SS)和抗甲氰菊酯品系(Fe-R)中合适的内参基因,并通过基因相对表达定量PCR研究二斑叶螨抗性品系解毒酶基因表达水平的变化。【方法】采用实时荧光定量PCR(quantitative real time PCR,RT-qPCR)技术,分析二斑叶螨5.8S rRNA、α-tubulin、β-actin、ELF、GAPDH、RPL13a、SDHA和TBP共8个候选内参基因mRNA表达水平的稳定性,并分析二斑叶螨酯酶(Carboxyl/cholinesterases,CCEs)、谷胱甘肽转移酶(Glutathione s-transferase,GSTs)及细胞色素P450单加氧酶(Cytocheome P450 monooxygenases,P450s)等主要解毒酶基因相对表达量。用GeNorm和NormFinder软件进行内参基因稳定性评估,通过比较Ct值的方法进行基因相对表达量计算。【结果】8个内参基因中稳定性最高的为α-tubulin;以α-tubulin为内参基因,二斑叶螨Fe-R品系GSTs基因TuGSTo1、TuGSTd1及P450s基因CYP3D2相对表达量均显著高于SS品系,而CCEs基因TuCCE1的表达量有所降低。【结论】在二斑叶螨SS和Fe-R品系中α-tubulin为理想的内参基因,RT-qPCR研究表明TuGSTo1、TuGSTd1和CYP3D2相对表达量的升高可能是二斑叶螨对甲氰菊酯产生高抗性的分子机理。

不同杀菌剂对小麦纹枯病和赤霉病的防治效果

为明确不同杀菌剂对小麦纹枯病、赤霉病的防治效果,在大田条件下以‘开麦21’为试验材料研究了12种杀菌剂对小麦纹枯病、11种杀菌剂对赤霉病的防治效果及对小麦产量的影响。结果表明:30%己唑醇悬浮剂76.5g/hm2、75%肟菌·戊唑醇水分散粒剂168.75g/hm2处理对小麦纹枯病的防效较好,拔节期病指防效(乳熟期枯白穗防效)分别为62.77%(56.21%)和60.58%(53.45%),小麦产量较对照分别增加27.65%和21.30%;48%氰烯·戊唑醇悬浮剂432g/hm2、25%氰烯菌酯悬浮剂750g/hm2处理对小麦赤霉病的防效较好,病指防效(病穗防效)分别为70.78%(56.57%)和68.84%(46.86%),小麦产量较对照分别增加25.44%和24.40%。综合分析,以上药剂可做田间大面积推广应用。

二斑叶螨对螺螨酯抗药性及对18种杀螨剂交互抗性

采自甘肃兰州兴隆山公园的二斑叶螨(Tetranychus urticae Koch),用雌雄单系培养敏感品系(S),用螺螨酯处理二斑叶螨种群培养抗性品系(SP-R),用室内生测法对二斑叶螨S和SP-R品系进行室内毒力测定。结果表明,二斑叶螨对螺螨酯抗性发展初期较慢,中期稳定,后期较快,选育至26代抗性指数(RI)达58.83。SP-R对甲氰菊酯、氯氰菊酯有一定的交互抗性,RI分别为11.54和10.03;对苯丁锡、四螨嗪、苦皮藤生物碱、阿维菌素、氯氟氰菊酯、哒螨.四螨嗪、哒.水胺硫磷、三唑锡、三氯杀螨醇、哒螨灵、氧化乐果无交互抗性(1<RI<5.00);对浏阳霉素、毒死蜱、噻螨酮、柴油、哒螨灵、唑螨酯可能存在负交互抗性(RI<1)。

除草剂作用机制研究进展

阐述了光合作用抑制型、色素合成抑制型、氨基酸生物合成抑制型和脂类合成抑制型四大类除草剂作用机制的研究现状,并对未来除草剂研究开发的前景予以展望。

不同缓解处理对玉米烟嘧磺隆药害的缓解效果研究

以郑单958玉米杂交种为供试作物,研究了除草剂烟嘧磺隆对夏玉米的药害情况以及不同缓解剂对药害的缓解作用。结果表明,120g/hm2烟嘧磺隆对玉米生长产生了严重影响,株高下降8.69%,产量下降11.18%。定量喷施氨基酸、萘乙酸、奈安、丙酰芸苔素内酯均能改善烟嘧磺隆对玉米株高的抑制,效果相对较好;萘乙酸、胺鲜酯可缓解烟嘧磺隆对玉米叶绿素的影响;药害出现前、后喷施各种缓解剂均能缓解烟嘧磺隆对玉米丙二醛含量的影响;药害后期喷施宝叶可缓解烟嘧磺隆对玉米可溶性糖含量的影响。测产表明,烟嘧磺隆药害出现后喷施奈安的处理玉米产量最高,较120g/hm2烟嘧磺隆对照产量提高24.47%。综合分析,1.2g/hm2奈安对玉米烟嘧磺隆药害的缓解效果最好。

不同缓解处理对氟磺胺草醚大豆药害的缓解效果研究

为了研究氟磺胺草醚对大豆的药害情况以及不同缓解剂对药害的缓解作用,在大田大豆喷施氟磺胺草醚后,分2个时期分别喷施8种缓解剂,然后在特定时间分别调查大豆的株高、地上鲜重、叶绿素含量、单株荚数和产量。结果表明:高剂量氟磺胺草醚对大豆药害明显,大豆株高、地上鲜重分别降低16.89%、49.39%,叶绿素含量下降43.75%,单株荚数和产量也分别减少30.0%、14.24%。药害前期喷施宝叶、萘乙酸、赤霉酸和磷酸二氢钾或药害后期喷施宝叶、奈安、芸苔素内酯和氨基酸对大豆产量均有较好的缓解效果。综合分析,药害前期喷施萘乙酸、磷酸二氢钾更有利于大豆增产,其产量较未喷施氟磺胺草醚对照分别增加36.22%和29.88%,可用于修复药害对大豆生长发育造成的影响。

二斑叶螨对甲氰菊酯和螺螨酯的抗性选育及增效剂的增效作用

[目的]探索二斑叶螨对甲氰菊酯和螺螨酯种群的抗性机理和抗性治理途径。[方法]采用室内生物测定法,以采自兰州兴隆山自然保护区的二斑叶螨为敏感种群(S),在室内用甲氰菊酯和螺螨酯分别对二斑叶螨进行抗性选育;用增效醚(PBO)、顺丁烯二酸二乙酯(DEM)、磷酸三甲苯酯(TPP)、有机硅、噻酮进行增效作用研究。[结果]二斑叶螨经室内甲氰菊酯和螺螨酯抗性选育45代和30代后,抗性倍数分别达到314.50倍和77.92倍。TPP、PBO、DEM 3种增效剂对二斑叶螨抗甲氰菊酯种群的抗敏增效比分别为12.15、7.78和3.09,推测其抗性机理涉及的主要解毒酶是羧酸酯酶和多功能氧化酶;DEM对二斑叶螨抗螺螨酯种群的抗敏增效比大于TPP和PBO,分别为4.87、3.67和1.91,二斑叶螨对螺螨酯产生抗性机理可能与谷胱甘肽转移酶和羧酸酯酶活性增强有关。有机硅和噻酮对二斑叶螨抗甲氰菊酯和螺螨酯种群的抗敏增效指数比分别为1.38、1.42和1.18、0.92,说明二斑叶螨的抗性与表皮通透性改变关系不密切。[结论]上述结果可以为二斑叶螨的抗性治理提供依据。

二斑叶螨对甲氰菊酯抗药性选育及其对17种常用杀螨剂的交互抗性

采用玻片浸渍法,用甲氰菊酯对二斑叶螨敏感种群进行抗性选育,经过19代的汰选,获得抗性指数为88.37倍的抗甲氰菊酯二斑叶螨种群.对17种常用杀螨剂的交互抗性测定结果表明,该种群对三氯氟氰菊酯、甲基异柳磷、双甲脒和苦皮藤生物碱有明显交互抗性,抗性指数分别达12.21、11.91、39.54、10.82;对氧化乐果、苯丁锡、唑螨酯、氯氰菊酯及三唑锡交互抗性次之,抗性指数分别为6.35,7.54、6.878、9.79、6.65;而对哒螨灵、三氯杀螨醇、克螨特、阿维菌素、噻螨酮、四螨嗪、哒螨.四螨嗪及哒.水胺硫磷(抗性指数<5.00倍)等杀螨剂无明显的交互抗性.

二斑叶螨乙酰辅酶A羧化酶基因全长cDNA克隆及其生物信息学分析

【目的】克隆二斑叶螨(Tetranychus urticae)的乙酰辅酶A羧化酶(Acetyl-CoA carboxylase,ACCase)基因,对其进行生物信息学分析并研究其在二斑叶螨敏感和抗性品系中的表达量。【方法】利用RT-PCR技术克隆ACCase基因的cDNA全长,采用生物信息学软件分析克隆基因的编码蛋白特性;利用实时荧光定量PCR方法分析ACCase基因在二斑叶螨敏感和抗螺螨酯品系中的表达差异。【结果】ACCase基因(GenBank登录号:JX424763)的开放阅读框长度为7 068 bp,编码2 235个氨基酸,分子量约为266.35 kD,理论等电点为6.38,包含典型的生物素羧化酶(biotin carboxylase,BC)、生物素羧基载体蛋白(biotin carboxyl carrier protein,BCCP)和羧基转移酶(carboxyltransferase,CT)3个结构域。结合其它物种ACCase基因构建系统发育树表明,该基因与体虱(Pediculus humanus corporis)ACCase基因具有较高的同源性。实时荧光定量PCR结果表明,ACCase基因在抗螺螨酯品系中的相对表达量较高,与明感品系间存在显著差异。【结论】利用RT-PCR技术在二斑叶螨中克隆到ACCase基因,ACCase基因的过量表达可能与二斑叶螨对螺螨酯的抗性形成有关,为二斑叶螨的抗性治理提供了依据。

甲酯化植物油基烟嘧磺隆·乙草胺混配制剂高效液相色谱分析

采用高效液相色谱法分析甲酯化植物油基烟嘧磺隆·乙草胺混配制剂,使用C18反相柱和紫外可变波长检测器,以乙腈、水和乙酸为流动相,用外标法对有效成分进行分析和定量。烟嘧磺隆、乙草胺标准差分别为0.031 1、0.042 1,变异系数分别为0.31%、0.11%,平均回收率分别为99.83%、99.81%。

葡萄全生育期病虫害防治年历

为推进葡萄产业结构调整,使产品供给与市场需求更加协调有效、产业发展与效益提高更加健康持续,笔者根据多年实践经验撰写了葡萄全生育期病虫害绿色防治年历,从"公共植保"和"绿色植保"的理念角度,在对葡萄生长时期、气候特征和病虫害发生规律等进行观察的基础上,重点介绍了葡萄栽培中常见的病虫害种类及各个生育期防治措施和要点,推行关键节点用药和全程综合防控技术,为葡萄产业的绿色、安全发展提供有效的技术参考。

阻隔涂抹剂防治果树叶螨的药效试验

对甘肃省静宁地区果园的调查表明,害螨越冬场所从枝干向叶片迁移的高峰期在3月中、下旬,在距地面1m以下、1～2m、2m以上的果树枝干翘皮中,秋末应用阻隔涂抹剂在果树树干及主枝上涂10cm宽的药环,相对防治效果达77.88%。

不同除草剂对麦田看麦娘和牛繁缕杂草群落田间防效试验

看麦娘、牛繁缕是我国稻茬麦田恶性杂草,随着其对常用除草剂抗药性的上升,其防除难度逐年加大,成为影响小麦安全生产的重要因素之一,而抗药性上升带来的除草剂超剂量使用问题亦受到广泛关注。最终筛选出4项技术,可为解决看麦娘-牛繁缕杂草群落的防除和除草剂减量施用提供技术支撑。