胃Cajal间质细胞的分离和培养

目的探讨Balb/c小鼠胃Cajal间质细胞(ICC)的分离和培养方法,为进一步研究其生理特征及其与相关疾病的关系提供基础。方法无菌条件下取出小鼠胃组织,联合使用机械分离法和酶解法分离细胞,将细胞悬液接种于含有干细胞因子的M199培养基中进行培养。倒置显微镜下观察其形态,ICC特异的c-kit抗体进行免疫荧光染色后,用激光共聚焦显微镜进行鉴定。结果倒置显微镜下观察ICC有多个突起,突起较长并相互之间形成网络状。c-kit抗体荧光染色呈阳性。结论成功建立了一套小鼠胃ICC的分离培养方法。实验过程应当注意选择适当天龄的小鼠、尽量减小机械化学损伤、避免污染等问题。

美沙拉秦缓释颗粒联合康复新液保留灌肠治疗溃疡性结肠炎患者的疗效及安全性分析

目的分析美沙拉秦缓释颗粒联合康复新液保留灌肠治疗溃疡性结肠炎(UC)的疗效及安全性。方法选择2015年1月-2018年1月我院收治的UC患者60例,采用随机数字表法分为对照组和观察组,各30例。两组患者均给予补液、营养支持和纠正电解质、酸碱平衡紊乱等基础治疗,口服美沙拉秦缓释颗粒,1g/次,4次/d,连续治疗4周。在此基础上,观察组予以30ml康复新液加入150ml0.9%生理盐水稀释并加温至37℃后灌肠,每次灌肠时间30min,每2天灌肠1次,连续治疗4周。比较两组临床疗效及不良反应发生率,同时比较两组治疗前及治疗4周后血清炎性因子水平〔白介素-6(IL-6)、C-反应蛋白(CRP)〕变化情况。结果观察组、对照组总有效率分别为96.67%、80.00%,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前,两组患者血清CPR、IL-6水平无显著差异(P>0.05);治疗后,观察组血清IL-6、CRP水平低于对照组(P<0.05)。两组患者发生不良反应率无显著差异(P>0.05)。结论美沙拉秦缓释颗粒联合康复新液保留灌肠能够显著提高UC患者的治疗有效率,抑制肠道炎性反应,且不增加用药风险。

高糖对体外培养的Cajal间质细胞P2X7嘌呤能受体表达的影响

目的:观察P2X7嘌呤能受体在体外培养的Cajal间质细胞(ICC)的表达及高糖的影响,探讨P2X7嘌呤能受体在糖尿病胃肠功能紊乱的细胞机制.方法:以小鼠小肠组织为来源,联合使用机械分离法和酶解法分离ICC,培养在50mL/LCO2温箱里.同时应用ICC特异的c-Kit抗体和P2X7受体抗体进行免疫荧光染色,在激光共聚焦显微镜下进行鉴定,以确定P2X7受体是否表达于ICC.实验分组:正常对照组(葡萄糖浓度为5.5mmol/L),高糖组(葡萄糖浓度为33mmol/L).通过倒置显微镜观察细胞形态,RT-PCR对P2X7和c-Kit受体的表达进行比较.结果:激光共聚焦显微镜下P2X7受体在c-Kit抗体阳性的细胞上的免疫荧光染色是阳性的;与正常组比较,加入葡萄糖后的ICC细胞变大,突起变短,与周围细胞的网络连接减少;RT-PCR结果显示P2X7受体表达于ICC,加入高糖后的ICC的c-Kit受体表达减弱,而P2X7受体的表达是增强的.结论:P2X7受体表达于体外培养的ICC上,高糖使ICC的形态发生了改变、减弱了c-Kit的表达、加强了P2X7受体的表达.这可能在糖尿病胃肠功能紊乱的发生中发挥一定的作用.

P2嘌呤受体与胃肠感觉的研究进展

P2受体是嘌呤受体,它在胃肠道的感觉中发挥着重要的作用,下面就P2受体在胃肠道的分布、感觉功能及其与相关疾病的关系做一综述。

干细胞因子对糖尿病小鼠小肠Cajal间质细胞的影响

目的探讨外源性干细胞因子(stem cell factor,SCF)对糖尿病(diabetes mellitus,DM)小鼠小肠Cajal间质细胞的影响。方法将雄性Balb/c小鼠随机分为正常对照组、糖尿病组(DM组)、糖尿病+外源性SCF组(DM+SCF组),DM组和DM+SCF组一次性腹腔注射(ip)链脲佐菌素(STZ,150 mg/kg)造模,选取成功模型;DM+SCF组再ip SCF 0.2μg/(kg.d);正常组和DM组每天ip等量的磷酸盐缓冲液(pH=7.4)。所有小鼠干预6周结束后,给予印度墨水灌胃测定小肠传输速率,免疫组化观察小肠c-kit的表达,Western blot观察c-kit蛋白的表达。结果饲养6周后,DM+SCF组的体质量(g)、推进率、c-kit阳性细胞数(个/hpf)、c-kit蛋白的表达均比DM组明显增加(P均<0.05),仍低于正常组(P均<0.05);DM+SCF组的血糖(mmol/L)比DM组明显降低(P<0.01),仍高于正常组(P<0.05)。结论外源性SCF可以逆转Cajal间质细胞的异常改变,并对糖尿病小鼠的小肠动力障碍有一定的改善作用。

突触在胃起搏调控胃慢波活动中的作用

目的研究胃窦肌间神经丛中突触素(synaptophysin,Syn)分布及其mRNA和蛋白的表达,探讨突触素在胃起搏机制中的作用。方法通过手术建立Wistar大鼠胃起搏模型(近远端胃各缝制一对电极),分为起搏组(GES组,n=10)和对照组(n=6)。应用免疫组化染色观察GES组和对照组胃窦间神经丛中突触素分布,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot分别检测GES和对照组胃窦肌间神经丛中Syn mRNA和蛋白的表达量,以恒定表达的β-actin作为内参照。分别计算Syn mRNA与β-actinmRNA、Syn蛋白与β-actin蛋白表达积分光密度值的比值(Syn/β-actin),以反映组织中Syn mRNA和蛋白的相对表达量。结果与对照组相比,GES组肌间神经丛中Syn免疫反应阳性产物分布显著增多(806.421±342.135vs448.3±261.467,P<0.05;0.019±0.008vs0.010±0.005,P<0.05)。RT-PCR研究显示GES组Syn mRNA表达显著强于对照组,GES组syn/β-actin比值明显较对照组增加(0.146±0.0 28vs0.082±0.025,P<0.05);Western blot研究显示GES组Syn蛋白表达也较对照组明显增强,两组Syn/β-actin比值比较差异有统计学意义(0.502±0.098vs0.298±0.018,P<0.05)。结论胃起搏后胃肌间神经丛内突触素分布增多,突触素mRNA和蛋白表达量明显增加,表明胃窦肌间神经丛内突触可能在胃起搏中发挥了重要作用。

干细胞因子对糖尿病小鼠小肠平滑肌细胞慢波的影响

目的:探讨外源性干细胞因子(stem cell factor,SCF)对糖尿病(diabetes mellitus,DM)小鼠小肠动力障碍时小肠平滑肌细胞慢波的影响.方法:♂Balb/c小鼠一次性腹腔注射(ip)链脲佐菌素(STZ,150mg/kg)造模,将小鼠分为正常组、DM组、DM+外源性SCF组(DM+SCF组);DM+SCF组ipSCF0.20μg/(kgd),正常组和DM组每天ip等量的磷酸盐缓冲液(pH7.40).所有小鼠干预6wk结束后,给予印度墨水灌胃测定小肠传输速率,用微电极细胞内记录仪记录各组小鼠十二指肠平滑肌细胞内慢波的变化.结果:DM组小肠推进率比正常组的明显降低(44.05%±5.48%vs82.75%±6.56%,P<0.01);DM+SCF组比DM组的小肠推进率显著增加(75.89%±3.61%vs44.05%±5.48%,P<0.01),但比正常组的降低(75.89%±3.619%vs82.75%±6.56%,P<0.05);DM组与正常小鼠相比,十二指肠平滑肌细胞内慢波频率明显减慢(13.33±4.27vs30.67±3.33,P<0.01),波幅明显减小(15.17±3.71vs35.17±3.71,P<0.01),且波形杂乱不规则.DM+SCF组小鼠十二指肠平滑肌细胞内慢波频率和波幅比DM组增加(26.50±1.87vs13.33±4.27;27.50±2.26vs15.17±3.71,均P<0.01),但比正常组减慢和降低(26.50±1.87vs30.67±3.33,P<0.05;27.50±2.26vs35.17±3.71,P<0.01).结论:外源性SCF对DM小鼠的小肠动力障碍有一定的改善作用.

胃电起搏对大鼠胃窦Cajal间质细胞的影响

目的研究胃电起搏对大鼠Cajal间质细胞(ICC)数量和C-kit受体表达的影响,探讨ICC在胃电起搏调控胃慢波活动中的作用。方法建立Wistar大鼠胃起搏模型,将大鼠分为起搏组(n=8)和对照组(n=8)。选用适宜的起搏参数以控制胃电慢波,持续刺激1 h,连续刺激20 d后处死大鼠并取胃窦组织,以免疫组织化学方法结合图像分析技术和Western blot方法分析C-kit受体免疫反应阳性细胞和C-kit蛋白表达变化。结果起搏组大鼠胃肌间神经丛内C-kit免疫反应阳性产物面积和平均光密度值均显著高于对照组[(1976.76±336.67)vs(1368.23±459.32),P<0.05;(0.19±0.50)vs(0.12±0.52),P<0.05],刺激组大鼠胃窦组织C-kit蛋白表达显著增高[(0.50±0.09)vs(0.29±0.02),P<0.05]。结论胃电起搏后胃窦肌间神经丛ICC数量增多,参与了胃电起搏调控胃慢波活动。

心理干预联合生物反馈在功能性便秘中的临床应用研究

目的研究心理干预联合生物反馈在功能性便秘中的临床应用。方法按照功能性便秘罗马Ⅲ诊断标准,在我院门诊或病房选择便秘患者60例,对每名患者进行5～10次的心理干预加生物反馈治疗,观察患者的临床症状改善情况;应用焦虑自评量表(SAS)、抑郁自评量表(SDS)进行功能性便秘患者的焦虑和抑郁症状评估。结果 60例功能性便秘患者经心理干预加生物反馈治疗后,10.0%(6/60)治愈;40%(24/60)显效;31.6%(19/60)有效;18.3%(11/60)无效,有效率81.6%。生物反馈联合心理干预治疗前,功能性便秘患者的焦虑自评量表评分(41±9)和抑郁自评量表评分(49±8),与中国常模相比较,存在明显的焦虑、抑郁情绪。治疗后,患者焦虑自评量表评分(32±7分)和抑郁自评量表评分(33±7)显著改善(P<0.01)。结论心理干预联合生物反馈治疗后,功能性便秘患者临床症状、焦虑和抑郁量表评分都较治疗前有明显改善。表明心理干预联合生物反馈治疗对功能性便秘有良好的治疗效果,具有较高的临床应用价值。

功能性便秘肛门直肠动力学和敏感性研究

目的:探讨功能性便秘(FC)患者肛门直肠动力学和直肠感觉特征。方法:采用肛门直肠测压方法检测44例FC患者的肛门直肠静息压、缩榨压、直肠初始感觉阈值、排便感觉阈值、窘迫感觉阈值和最大耐受容量指标,并与14例健康人做对照。结果:FC患者肛门静息压、最大缩榨压均较对照组明显降低,差异有显著性(P<0.05);但FC患者的初始感觉阈值、排便阈值、窘迫阈值和最大耐受容量均高于对照组(P<0.05)。模拟排便时,FC组31.82%的患者在直肠收缩时伴有肛管括约肌的矛盾收缩。结论:功能性便秘患者存在肛门直肠动力和感觉异常,可能与FC发病相关。

趣味探究:DNA究竟有多长

DNA双螺旋是北京中关村标志性的雕塑建筑,在学完DNA结构之后,联系到该雕塑作品我突发奇想,向学生提出这个问题:DNA究竟有多长?没想到同学们七嘴八舌,众说纷纭,表现异常活跃,抓住这难得的教学良机,我向学生布置该研究性学习题.

奥美拉唑联合凝血酶治疗上消化道非静脉曲张出血患者的临床研究

目的观察奥美拉唑注射剂联合凝血酶冻干粉治疗上消化道非静脉曲张出血患者的止血效果及安全性。方法将上消化道非静脉曲张出血患者随机分为对照组和试验组。对照组静脉滴注奥美拉唑40 mg,qd;试验组在对照组治疗的基础上,联合口服凝血酶冻干粉2000 U,bid。2组患者均治疗7 d。比较2组患者的止血效果、临床疗效和药物不良反应的发生情况。比较2组患者治疗前后凝血功能和血小板参数。结果试验过程中共脱落3例,最终试验组和对照组分别纳入44例。治疗后,试验组和对照组的总有效率分为93.18%和77.27%,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,试验组和对照组的出血量分别为(224.57±23.08)和(283.54±29.35)mL,输血量分别为(136.89±14.37)和(154.37±16.24)mL,止血时间分别为(2.30±0.24)和(2.54±0.26)d,纤维蛋白原水平分别为(2.01±0.22)和(2.53±0.28)g·L^(-1),凝血酶原时间水平分别为(9.66±1.02)和(12.32±1.35)s,凝血酶时间水平分别为(13.87±1.44)和(15.96±1.63)s,活化部分凝血活酶时间水平分别为(35.97±3.68)和(30.85±3.12)s,血小板比容水平分别为(0.26±0.03)%和(0.16±0.02)%,血小板计数水平分别为(191.84±20.03)×10^(9)和(167.84±17.42)×10^(9)·L^(-1),血小板体积水平分别为(8.49±0.92)和(6.77±0.71)fL,差异均有统计学意义(均P<0.05)。试验组和对照组的总药物不良反应率分别为11.36%和13.64%,差异无统计学意义(P>0.05)。结论奥美拉唑注射剂联合凝血酶冻干粉治疗上消化道非静脉曲张出血患者具有良好的止血效果,其作用机制可能与改善凝血功能和血小板有关。

内镜电凝止血与组织胶注射治疗上消化道溃疡伴出血的疗效观察

目的观察内镜电凝止血术与内镜组织胶注射术治疗对消化性溃疡伴出血患者的临床疗效。方法回顾性分析2021年1月至2023年1月亳州市人民医院收治的因消化性溃疡所致上消化道出血的86例患者的临床资料,根据治疗方案的不同,将患者分为对照组(内镜组织胶注射)46例和观察组(内镜电凝止血)40例。统计并比较两组患者的一般基线资料(年龄、性别、体重指数、病程、Forrest分级、溃疡类型、血红蛋白水平)、疗效、术中内镜下止血率、术后1周内再出血率和异位栓塞率、病情康复相关指标(呕血消失时间、住院时间、潜血转阴时间)及不良反应发生率。结果两组患者的一般基线资料比较差异无统计学意义(P>0.05)。观察组的治疗总有效率高于对照组(P<0.05)。观察组的术中内镜下止血率显著高于对照组(P<0.05),术后1周内再出血率显著低于对照组(P<0.05),两组术后1周内异位栓塞率比较差异无统计学意义(P>0.05)。观察组的病情康复相关指标显著优于对照组(P<0.001)。两组患者的不良反应总发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论内镜电凝止血术较内镜组织胶注射术对消化性溃疡伴出血患者具有更好的止血效果,不但可以减少患者术后的再出血率,还能加快患者的康复进程。

胰岛素对糖尿病小鼠小肠功能的影响

目的 探讨胰岛素（regular insulin,RI）对糖尿病（DM）小鼠小肠功能的影响.方法 一次性给予雄性BALB/c小鼠链脲佐菌素（STZ,150 mg/kg）腹腔注射造模.将造模成功小鼠分为DM组6只,DM＋RI组6只,另选血糖正常小鼠6只为对照组.DM＋RI组给予RI 40U·kg-1·d-1皮下注射,对照组和DM组每天给予等量的磷酸盐缓冲液（pH=7.4）腹腔注射.所有小鼠干预6周结束后,给予印度墨水灌胃测定胃肠传输速率.免疫组织化学法检测各组小鼠十二指肠组织的c-kit阳性细胞数目.最后处死所有小鼠,用细胞内记录技术记录各组小鼠十二指肠平滑肌细胞内慢波的变化.采用SPSS 17.0软件分析,多组资料间比较采用LSD检验.结果 干预6周后,DM＋RI组的多饮、多食、多尿症状比DM组减轻,体重较DM组明显增加[（23.33±3.13）g比（15.42±1.40）g,P＜0.01],但比对照组降低[（26.78±2.09）g,P＜0.05].第6周DM组血糖值显著高于对照组（P＜0.01）,但比DM＋RI组显著升高（P＜0.01）.DM组小肠推进率比DM＋RI组和对照组明显降低（P值均＜0.01）;DM＋RI组也较对照组降低（P＜0.01）.光镜下观察到DM组c-kit阳性细胞数明显低于DM＋RI组和对照组（P值均＜0.05）,DM＋RI组比正常组减少（P＜0.05）.DM组慢波频率比DM＋RI组和对照组显著降低（P值均＜0.01）,而DM＋RI组慢波频率比对照组降低（P＜0.01）.DM组慢波波幅比DM＋RI组和对照组明显降低（P值均＜0.01）,而DM＋RI组慢波波幅比对照组降低（P＜0.01）.结论 DM小鼠存在胃肠动力障碍,外源性RI可能对DM小鼠小肠动力障碍有一定的改善作用.

糖尿病小鼠十二指肠运动的变化

糖尿病（DM）的病因主要是胰岛素分泌不足或胰岛索抵抗.胃肠动力障碍是DM患者的常见并发症之一,其机制尚不清楚.近年来普遍认为,Cajal间质细胞（ICC）广泛分布于胃肠道系统中,是胃肠道慢波的起搏细胞,在维持胃肠道正常的生理功能中发挥重要作用.

物种竞争中的生存策略

请看下面这道题:有两个不同物种的种群(甲和乙),对环境的要求(生态位)相近。若这两个种群生活在同一自然区域,通过长期的进化发展,一般会出现如下图A、B、C3种情况中的一种。请用文字表述图中所反映的两个种群的进化趋势。

关于DNA长度的趣味探究

DNA双螺旋是北京中关村标志性的雕塑建筑，在学完DNA结构之后，联想到该雕塑作品笔者突发奇想．向学生提出这个问题：DNA究竟有多长？没想到学生众说纷纭，表现异常活跃，抓住这难得的教学良机，笔者向学生布置该研究性学习题。