基于nNOS/CAPON相互作用探讨参枝苓口服液对拟散发性AD小鼠海马突触的影响

目的探索参枝苓口服液对拟散发性阿尔茨海默病(sporadic Alzheimer’s disease,SAD)模型小鼠学习记忆能力的影响以及对神经元型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase,nNOS)与神经元型一氧化氮合酶羧基末端PDZ配体(carboxy-terminal PDZ ligand of neuronal nitric oxide synthase,CAPON)相互作用及下游细胞外信号调控激酶(extracellular signal-regulated kinases,ERK)/环磷腺苷反应元件结合蛋白(cAMP-response element binding protein,CREB)信号通路的调节。方法72只C57BL/6J雄性小鼠随机抽取12只作为对照组,其余60只隔日双侧侧脑室注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ),制备拟SAD小鼠模型,对照组代以等体积人工脑脊液。造模组小鼠随机分为模型组、多奈哌齐组和参枝苓高、中、低剂量组,各治疗组给予相应剂量的药物干预,而对照组及模型组给予等体积0.5%CMC,连续灌胃3个月。Morris水迷宫记录小鼠的逃避潜伏期和撤台后穿越平台次数;透射电镜观察小鼠海马CA1区突触数量;免疫共沉淀检测小鼠海马组织中nNOS与CAPON的相互作用;免疫组织化学染色观察小鼠海马CA1区ERK、CREB的分布及阳性表达细胞数;Western blot检测小鼠海马ERK、p-ERK、CREB、p-CREB的表达。结果与对照组相比,模型组小鼠逃避潜伏期显著增加(P<0.01),穿越平台次数显著减少(P<0.01);海马CA1区突触数量显著减少(P<0.01);nNOS与CAPON的相互作用显著增加(P<0.01);ERK的表达无明显变化(P>0.05),p-ERK、CREB、p-CREB的表达显著下降(P<0.01),p-ERK/ERK、p-CREB/CREB水平显著降低(P<0.01)。与模型组相比,多奈哌齐组和参枝苓各干预组逃避潜伏期均明显下降(P<0.05或P<0.01),小鼠穿越平台次数均显著增加(P<0.01);海马CA1区突触数量均显著增多(P<0.01);nNOS与CAPON的相互作用均明显减少(P<0.05或P<0.01);ERK的表达无明显变化(P>0.05),p-ERK、CREB、p-CREB的表达均有不同程度的增加(P<0.05或P<0.01)),p-ERK/ERK、p-CREB/CREB水平显著增加(P<0.01)。结论参枝苓口服液可通过减少nNOS与CAPON的相互作用,增加ERK/CREB通路相关蛋白的表达及突触数量,改善拟SAD小鼠的学习记忆能力。