功能性鼻内镜鼻窦手术对病人嗓音影响的研究进展

总结嗓音变化的客观评价工具及主观评价工具,综述功能性鼻内镜鼻窦手术对嗓音的影响及其机制,论述功能性鼻内镜鼻窦手术后专业护理与康复对鼻音及嗓音的积极作用。

microRNA-31转基因小鼠脊髓损伤模型对胃肠动力障碍的修复作用

目的探讨microRNA-31对脊髓损伤后胃肠动力因素的作用。方法将36只microRNA-31转基因小鼠和36只FVB小鼠分别设为对照组和模型组,用Impactor M-Ⅲ脊髓撞击器建立小鼠脊髓损伤模型。用BBB运动功能评分评估小鼠下肢的恢复情况。HE染色观察脊髓组织的变化。用Real-time PCR法检测生长抑素受体(SSTR2)mRNA的表达,用免疫荧光法检测一氧化氮合酶(iNOS)蛋白和SSTR2蛋白的表达。结果造模后第3天、第7天和第14天,脊髓组织破坏、坏死、空泡形成,胶原纤维明显增加。造模后第14天,FVB模型组与对照组比较,SSTR2 m RNA的表达明显升高(P<0.05),iNOS蛋白和SSTR2蛋白的表达量明显升高;microRNA-31转基因小鼠模型组与对照组比较,SSTR2 mRNA的表达明显升高(P<0.05),iNOS蛋白和SSTR2蛋白的表达量明显升高;microRNA-31转基因小鼠模型组与FVB模型组比较,SSTR2 m RNA的表达明显降低(P<0.05),iNOS蛋白和SSTR2蛋白的表达量明显降低。结论脊髓损伤后胃肠动力障碍的发生可能与SSTR2 m RNA的表达上调、SSTR2蛋白和i NOS蛋白的表达增高有关。高表达的microRNA-31可能与脊髓损伤后胃肠动力障碍的恢复有关。

小鼠海马结构与脊髓损伤后抑郁症高发病率的关系研究

目的:探究脊髓损伤引发的抑郁高风险率是否与海马生理结构的改变有关。方法:制作小鼠脊髓损伤模型,分别在损伤后不同时期采用Basso Mouse Scale(BMS)评分对小鼠术后运动功能进行评估;并通过糖水偏好实验和悬尾实验评估小鼠的抑郁情况;HE染色观察海马组织内部细胞的变化;电镜观察海马亚细胞结构突触的结构变化;RT-qPCR检测突触蛋白标志物突触小泡蛋白(SYP)和突触后致密蛋白95(PSD-95)在mRNA水平上的变化。结果:行为学实验显示模型组小鼠有显著的抑郁行为,且在第7天抑郁程度最显著(P<0.01);HE染色显示,与对照组相比,模型组海马细胞排列紊乱,数量减少,形态欠规则;电镜结果显示,与对照组相比,模型组海马超微结构突触数量减少,突触活动区长度变短,突触后致密物厚度变薄,突触间隙宽度增加,突触界面曲率减小(P<0.05);RT-qPCR结果显示模型组SYP和PSD-95 mRNA表达水平较对照组降低(P<0.05)。结论:海马生理结构的改变是脊髓损伤后抑郁症高风险的原因之一。

tdTomato转基因小鼠的建系及其在细胞示踪方面的应用研究

目的构建稳定表达的tdTomato转基因小鼠并建系,观察其细胞及组织的荧光表达水平以及其干细胞共培养后的荧光表达水平。方法使用Gateway clone技术和DNA显微注射法构建含有tdTomato表达载体的受精卵,移植至假孕母鼠体内,待其自然生产。使用双向鉴定法鉴定并挑取饲养阳性小鼠并建系。另提取tdTomato阳性小鼠的神经干细胞分别与eGFP小鼠的骨髓间充质干细胞、原代神经干细胞共培养。结果成功构建了tdTomato转基因小鼠并建系,与野生型小鼠相比,tdTomato转基因小鼠生化指标和生长性状无明显差异,其组织切片及脑源神经干细胞均可观察到红色荧光。示踪实验表明注射部位可观察到明显的荧光成像,共培养实验可以清晰的观察到细胞分化后荧光的稳定表达。结论tdTomato转基因小鼠的组织和细胞能稳定表达红色荧光,可以利用荧光鼠的自发荧光特性,研究干细胞共培养后的分化方向。

miR-126促进脊髓损伤模型神经干细胞的生长增殖和分化

观察脊髓损伤后miR-126对在体神经干细胞生长增殖和分化的促进作用。应用Allen法制作小鼠第10胸椎脊髓挫伤模型,在损伤后不同时期应用BMS评分对运动功能评估后,H-E染色、尼氏染色观察损伤部位组织病理学及尼氏体的变化。RT-PCR检测miR-126、nestin、HOXA9表达量,同时免疫印迹检测相应蛋白的表达。miR-126、nestin早期表达量下降,后期有所升高。HOXA9表达量则出现与其相反趋势。组织学检测早期损伤部位大量炎症细胞浸润及尼氏体丢失,后期损伤程度减轻,尼氏体逐渐增多。BMS评分随神经元的增多而有一定程度的增高。脊髓损伤后miR-126在促进神经干细胞生长增殖的同时,通过负向调节HOXA9表达提高神经干细胞向神经元的分化,从而促进小鼠运动功能修复。

转基因小鼠脊髓源神经干细胞移植于脊髓损伤模型后的成活、分化、迁移

目的将从绿色荧光蛋白（GFP）转基因小鼠胚胎脊髓分离培养的神经干细胞（NSCs）移植到小鼠脊髓损伤模型损伤处，观察小鼠运动恢复和NSCs在脊髓内的存活、迁移和分化，探讨NSCs在临床治疗脊髓损伤的作用。方法采用简单随机化分组方法将小鼠随机分为空白组（n=10）、损伤组（n=30）、细胞移植组（n=30），制备损伤模型并在损伤处进行NSCs移植，于时间节点进行Basso-Beattie—Bresnahan（BBB）评分、斜板实验和免疫组织化学检测。结果击打后小鼠双后肢均瘫痪，BBB评分为0分，移植2周后评分开始出现差异，移植组提高到（4．50±1．04）分，损伤组为（2．17±0．75）分（P=0．023）；4周时移植组为（8．17±1．47）分，损伤组为（5．33±1．03）分（P=0．015）；6周时移植组为（10．8±1．47）分，损伤组为（8．33±0．81）分（P=0．017）；8周时差异最大，移植组为（15．50±1．37）分，损伤组为（11．17±1．16）分（P=0.016）。斜板实验中在1周时移植组为（17．17±3．18）°，损伤组为（14．83±3．06）°；2周时移植组为（23．33±d．27）°，损伤组为（18．17±2．40）°；4周后两组比较差异有统计学意义，移植组为（33．83±6．30）°，损伤组为（23．50±1．76）°（P=0．024），6周时较4周变化不大，移植组为（37．50±8．50）°，损伤组为（27．67±3．56）°（P=0．029），8周时显著提高，移植组为（46．83±6．05）°，损伤组为（36．33±7．23）°（P=0．019）。荧光检查结果显示移植的NSCs会在体内存活并迁移，部分保持未分化状态，少量分化为胶质细胞，向神经元分化较少。结论NSCs对脊髓损伤的恢复有促进作用，这种作用是通过移植细胞后形成一个有利于恢复的微环境，增加向神经元分化的比例来促进恢复。

小鼠多能干细胞对小鼠肝脏电离辐射损伤的作用

目的探讨小鼠多能干细胞(mouse pluripotent stem cells,miPS)对小鼠肝脏电离辐射损伤的作用。方法采用医用电子直线加速器进行单次全身性照射(电子辐射线源为6 MeV,照射总剂量为8 Gy,照射剂量率为1. 0 Gy/min)。辐射组于辐射后12和24 h,经小鼠尾静脉注射生理盐水(200μL/只);治疗组于照射后12和24 h,经尾静脉注射mi PS细胞悬浮液[3×106个/(200μL·只)];对照组小鼠不进行辐射,仅注射生理盐水(200μL/只)。末次注射后1、3、7、14 d,记录小鼠体重、计算肝脏指数,并检测小鼠肝脏中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)及丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平;末次注射后14 d,观察小鼠状态,并采用组织病理学方法观察肝脏病理形态学变化。结果与对照组比较,辐射组小鼠精神状态和食欲状况均不佳,体重显著降低(P <0. 05),肝脏指数差异无统计学意义(P> 0. 05),肝脏中SOD活性显著降低(P <0. 01),MDA水平显著升高(P <0. 05);与辐射组比较,治疗组小鼠体重明显升高(P <0. 05),肝脏指数差异无统计学意义(P> 0. 05),肝脏中SOD活性显著升高(P <0. 05),MDA水平显著降低(P <0. 01)。对照组小鼠肝脏组织无明显病变;辐射组小鼠肝细胞发生明显肿胀及肝细胞索紊乱等明显病理变化;治疗组小鼠肝细胞索排列整齐,肝细胞轻度肿胀,病理变化得到改善。结论 miPS可通过其增殖分化减少小鼠体内氧化应激产生的细胞凋亡,对电离辐射造成的小鼠肝脏损害有明显的修复作用。