整合素αvβ6在牙体及牙周组织疾病中的研究进展

人类牙体及牙周组织疾病的发生与发展是一个复杂的过程,涉及细胞-细胞及细胞-基质间的相互作用。整联蛋白是一种在大多数细胞中表达的异二聚体细胞表面受体家族,介导细胞-细胞及细胞-基质间的相互作用,调节细胞的生长、迁移和存活。整合素αvβ6主要在上皮细胞中表达,并在一些炎症、癌症、伤口愈合和纤维化疾病中被诱导,参与调节不同的过程,如细胞增殖、迁移、存活、分化及肿瘤侵袭和转移的各种信号通路。近年来,多项研究表明整合素αvβ6参与牙体组织的发育过程,并且在牙周炎及非牙周炎创伤中发挥关键作用。本文主要论述整合素αvβ6在牙体及牙周组织疾病发生发展中的研究进展,以期提供更好的诊疗思路。

钙离子在牙釉质矿化中的作用

牙釉质的矿化形成是一个信号分子贯穿始终的过程,釉质矿化通过细胞内多种离子与信号通道的紧密调节和上皮与间充质的相互作用,最终使牙釉质成为人体中矿化程度最高、最硬的组织。Ca^(2+)作为细胞内重要的第二信使分子,在生物矿化中调节许多过程,其中就包括调节釉质蛋白的表达。在牙釉质的基本结构羟基磷灰石晶体中,约含有60%质量的Ca^(2+),由此可见Ca^(2+)是牙釉质的关键和必需成分。因此,Ca^(2+)的正常转运在牙釉质矿化过程中起着关键作用。

Sirt1调控上皮细胞衰老的研究进展

在牙釉质发育过程中,成釉细胞过早衰老和凋亡是遗传性牙釉质发育不全的重要原因。沉默信息调节因子2相关酶1(silent matingtype information regulator 2 homolog 1,Sirt1)是一种依赖烟酰胺腺苷二核苷酸(nico⁃tinamide adenine dinucleotide,NAD+)的脱乙酰酶,已被广泛报道参与调节细胞衰老。本文就Sirt1调控上皮细胞衰老研究进展作一综述,从Sirt1的结构特点入手,阐述Sirt1与衰老的关系。研究表明,当上皮细胞受到外界刺激时,Sirt1通过多种途径影响上皮细胞的衰老:Sirt1参与调节线粒体功能和代谢稳态,线粒体功能障碍会影响细胞衰老表型;端粒长度与衰老呈负相关,Sirt1调节端粒延伸所需的端粒逆转录酶的表达,从而正向调节端粒的稳态;DNA受损后会经历损伤修复,未修复的DNA损伤会引起细胞衰老,Sirt1/p53通路可通过减轻DNA损伤抑制上皮细胞衰老;衰老细胞是慢性炎症的来源,慢性炎症也可以多种方式促成衰老,Sirt1通过缓解炎症症状抑制上皮细胞衰老。未来可重点关注Sirt1对成釉细胞衰老的影响,探究其对成釉细胞的具体作用机制,以期在釉质发育不全病因及治疗中找到突破。

小鼠Q9D3J8(釉成熟蛋白)基因在磨牙牙胚中的表达

目的:报道一新发现的成熟期成釉细胞特异性表达蛋白:釉成熟蛋白(MASP,m ature am elob last-spec ificprote in)。方法:利用生物信息学工具和基因数据库分析位于人4号染色体4q13.3区域的新基因UNQ689;小鼠Q9D3 J8基因为UNQ689的同源基因。根据小鼠Q9D3 J8的基因序列设计引物,扩增长度为982bp的基因片段:分离小鼠下颌第一磨牙牙胚及周围组织,采用RT-PCR技术观察小鼠Q9D3 J8基因在小鼠下颌磨牙组织中的表达。制备D igoxygen in标记的小鼠Q9D3 J8 cRNA探针,以小鼠下颌第一磨牙及其周围组织为研究标本,采用原位杂交技术对Q9D3 J8基因表达进行组织学定位。结果:利用生物信息学工具和基因数据库,发现am elob lastin基因上游一未报道的新基因UNQ689/Q9D3 J8。在染色体基因图谱位置关系上,UNQ689/Q9D3 J8,am elob lastin和enam elin基因紧密相连。RT-PCR产物的琼脂糖电泳显示Q9D3 J8基因在出生后10d和15d的小鼠磨牙组织中表达明显。原位杂交研究显示Q9D3 J8基因仅在小鼠磨牙成熟期成釉细胞中呈特异性表达。结论:本研究提示UNQ689/Q9D3 J8基因为成熟期成釉细胞特异性表达蛋白基因;在染色体DNA上,UNQ689/Q9D3 J8,am elob lastin和enam elin共同组成一个成釉细胞特异性表达蛋白基因串。根据UNQ689/Q9D3 J8基因在组织中的分布和表达,我们暂时将UNQ689/Q9D3 J8基因命名为MASP(釉成熟蛋白)基因。

基于HMM的矿井提升机故障诊断方法

结合隐马尔可夫模型(HMM)所需训练样本少及可解释的优点,提出了基于HMM的矿井提升机故障诊断方法。利用多个加速度传感器在提升机运行的不同转速阶段采集数据,通过快速傅里叶变换(FFT)从提升机振动信号中进行特征抽取后,再由劳埃德算法(Lloyd)进行标量量化,根据HMM建模理论,训练HMM诊断库,再利用训练好的HMM对提升机进行状态监测和故障诊断。

3种方式修复乳磨牙大面积缺损的临床疗效

目的探讨不同修复方式对乳磨牙大面积缺损修复的临床疗效。方法选择大面积缺损的乳磨牙150颗,将其随机分成A、B、C组。A组选用玻璃离子加复合树脂修复,B组选用Hall技术修复,C组选用金属预成冠修复。比较3组患牙6、12个月的修复成功率。结果 A、B、C组间6个月修复成功率差异无统计学意义(P>0.05);B、C组12个月修复成功率均明显高于A组(P<0.05)。结论 Hall技术和金属预成冠对乳磨牙大面积缺损的修复成功率高于玻璃离子加复合树脂。

口腔健康教育实验教学改革探索

目的提高学生口腔健康宣教能力,巩固学生口腔健康教育理论,增加学生学习的兴趣和主动性。方法选择潍坊医学院2006—2008级口腔医学专业大学四年级学生为研究对象进行口腔健康教育实验教学改革探索,将学生分为试验组和对照组,试验组采用"讲出去"的教学方式,对照组采用传统的教学方法,对试验组的课堂、课后评价以及两组的期终考试和实习考核评价结果进行分析和比较。结果试验组的课堂、课后评价结果表明,"讲出去"教学方式被学生普遍认可,能提高学生口腔健康宣教的能力;期终考试和实习考核成绩均显示试验组得分高于对照组(P<0.01)。结论 "讲出去"教学方式提高了学生口腔健康宣教的能力,符合教学改革发展趋势。

釉成熟蛋白Amelotin抗体的制备和初步鉴定

目的:表达并纯化小鼠釉成熟蛋白(Amelotin),制备多克隆抗体,并进行初步鉴定。方法:RT-PCR获得Amelo-tin成熟肽片段,构建pET32a-Amelotin,IPTG诱导表达Amelo-tin,纯化后免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,ELISA检测抗体滴度。Western blot和免疫组织化学鉴定抗体特异性。结果:成功构建了Amelotin重组表达载体pET32a-Amelotin,表达的重组蛋白纯化后免疫新西兰大白兔,得到的多克隆抗体ELISA显示抗体效价可以达到1∶12800。Western blot分析表明该抗体能特异结合Amelotin,免疫组化分析表明自制的抗体能特异的与Amelotin相互作用。结论:以纯化的Amelo-tin为免疫原,成功地制备了效价及特异性较高的兔抗Amelo-tin抗体,为进一步建立简便的Amelotin检测方法及研究Amelotin生物学功能奠定了良好的基础。

TGF-β1调控基质金属蛋白酶-20(MMP-20)启动子转录活性的研究

目的:克隆MMP-20基因启动子序列,分析转化生长因子-β1对其转录活性的影响。方法:检索并分析MMP-20基因翻译起始点上游序列。利用PCR从小鼠基因组上扩增长度为2852bp的启动子序列,并与pMD18-T克隆载体连接。经酶切反应初步鉴定后,以pMD18-T-MMP-20为模板,利用PCR方法获得带酶切位点的MMP-20启动子片段(2842bp),并与pGL3-Basic载体连接。pGL3-MMP-20瞬时转染小鼠成釉细胞系(ALC)过夜后,在培养基中加入1ng/mLTGF-β1,12h后检测荧光素酶的活性。结果:经酶切反应和测序结果证实MMP-20启动子成功插入pGL3-Basic质粒。与pGL3-Basic质粒转染相比较,转染pGL3-MMP-20后荧光素酶活性明显增强;培养基中加入TGF-β1能促使pGL3-MMP-20荧光素酶活性进一步增强。结论:外源性MMP-20启动子在成釉细胞中被激活;TGF-β1能增强pGL3-MMP-20荧光素酶活性,提示釉质发育过程中,TGF-β1具有调节MMP-20基因表达的生物学功能。

PSO-SVM在提升机制动系统故障诊断中的应用

针对矿井提升机制动系统故障样本少难以准确诊断,提出支持向量机(SVM)的故障诊断方法。为了解决支持向量机参数选择困难和其对于故障诊断的影响,提出利用粒子群优化算法(PSO)对支持向量机的参数进行优化,提高提升机故障诊断分类的准确率。利用组态王进行数据的采集,并且将采集的数据通过数据库传输到网页监测画面实现远程监测。实验结果显示,该故障诊断方法的故障分类准确率很高,响应速度快,并且可以实现网页监控画面和故障诊断所需数据实现共享。

DT Light-Post纤维桩和铸造桩核在前牙修复中的效果比较

选择200507／2007—07在潍坊医学院口腔医学院就诊的患者152例183颗前牙，均为牙冠严重缺损或外伤冠折，行完善的根管治疗后，分别用DTLight—Post纤维桩（106颗）和铸造金属桩核（77颗）制作桩核，再用全瓷冠进行修复，患者随访6~30个月。DTLight—Post纤维桩组治疗成功102例，失败4例，成功率97．17％；铸造金属桩核组治疗成功64例，失败13例，成功率为83．12％，两组修复效果差异有统计学意义（P〈0．05）。结果提示DTLight-Post纤维桩是一种较为理想的桩核修复方法。

维甲酸诱导鼠磨牙牙胚midkine基因表达的研究

目的 :探讨RA与midkine (MK)基因表达在牙胚发育过程中的相互关系。方法 :将 16d胎龄的鼠胎下颌第一磨牙牙胚分别置于含不同浓度的外源性RA(分别为 5× 10 -8,5× 10 -7和 5× 10 -6mol/L)的RPMI 16 40半固态培养基表面。培养 2d后分别提取总RNA ,经RT -PCR扩增 2 5个循环 ,采用Southern印迹法检测MKmRNA在牙胚组织中的表达变化。结果 :体外培养 2d后 ,对照组 (无外源性RA )牙胚MKmRNA的表达为弱阳性 ;随培养基中外源性RA浓度的增加 ,牙胚组织中MKmRNA的表达逐渐增强。结论 :MK基因在牙胚发育中的作用可能受RA调控。

Runx2介导TGF-β1调控成釉细胞MMP20基因表达的研究

目的:研究Runx2在TGF-β1调控小鼠成釉细胞金属基质蛋白酶-20(matrix metalloprotei-nase 20,MMP20)基因表达中的作用。方法:首先利用双荧光素酶基因报告系统分析TGF-β1对MMP20基因启动子转录活性的影响;然后利用染色体免疫共沉淀(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP)方法观察Runx2与MMP20特异性结合位点之间的相互作用,并利用基因定点突变和双荧光素酶基因报告系统分析Runx2对MMP20基因启动子转录活性的影响;最后运用小RNA干扰技术使Runx2基因沉默,实时定量RT-PCR技术观察TGF-β1诱导MMP20基因表达的改变。结果:TGF-β1刺激成釉细胞后,MMP20启动子在-87～+23区域转录活性无明显变化外,其他各区域转录活性均增强。利用ChIP研究发现Runx2与MMP20基因核心启动子的特征性序列"TGTGGG"相互作用;将该特征性序列由"TGTGGG"突变为"TGTAAG"后,利用双荧光素酶基因报告系统发现Runx2对MMP20基因启动子转录活性的影响减弱;利用小RNA干扰技术使Runx2基因沉默后,TGF-β1上调MMP20基因表达的作用减弱。结论:TGF-β1通过转录因子Runx2调控成釉细胞MMP20的表达。

维甲酸体外诱导鼠磨牙牙胚骨涎蛋白基因表达的研究

目的 :观察维甲酸 (RA)对小鼠磨牙牙胚BSPmRNA表达的影响 ,探讨RA在牙胚早期发育中的作用。方法 :将 16d胎龄的鼠胎下颌第一磨牙牙胚置于含外源性RA(5× 10 -8mol/L)的RPMI16 40半固态培养基表面 ,分别培养 4、5、6d。培养结束后提取总RNA ,经RT -PCR扩增 30循环后 ,采用Southern印迹法检测BSPmRNA在牙胚组织中的表达。结果 :体外培养 4d后 ,实验组 (含外源性RA )和对照组 (不含外源性RA)的牙胚组织中BSPmRNA的表达均为阴性。培养 5d后 ,实验组的牙胚开始表达BSPmRNA ,对照组的牙胚仍为阴性。培养 6d后 ,实验组牙胚BSPmRNA的表达明显增强 ,对照组的牙胚也开始表达BSPmRNA ,但表达强度明显低于实验组的牙胚。结论

碧兰麻在牙科治疗中的应用与疗效

目的通过局部浸润注射碧兰麻来观察急性牙髓炎患者治疗时的麻醉疗效。方法将120例患者随机分为两组,运用不同的麻醉方法,实验组注射碧兰麻,对照组注射利多卡因。观察两组在牙髓治疗中的疗效。结果注射碧兰麻的实验组与注射利多卡因的对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),实验组麻醉效果优于对照组。结论碧兰麻的麻醉效果越来越得到人们的认可和满意,可以取代利多卡因在牙科治疗中应用。

Tie2受体在口腔鳞癌中的表达

目的:探讨Tie2受体在口腔鳞癌组织中的表达规律及其在肿瘤组织发展以及血管生成中的作用。方法:采用免疫组织化学S-P法,检测40例口腔鳞癌组织的微血管密度(microvessel density,MVD)和Tie2的表达,并分析其与临床病理特征的关系。结果:口腔鳞癌组织中MVD和Tie2的表达水平均高于正常对照组,且Tie2的表达水平与MVD呈正相关;Tie2的表达随临床病理分级的增加呈递增的趋势。结论:Tie2可能通过调节口腔鳞癌组织的血管生成参与其发展的过程。

案例教学法在口腔正畸学教学中的应用效果

目的:探讨案例教学法在口腔正畸学教学中的应用效果。方法:将113名口腔本科学生分为实验组(55名)和对照组(58名)。对照组采用传统教学法,实验组采用案例教学法,课程结束后评价教学效果。结果:实验组学生考核成绩优于对照组(P<0.05)。结论:采用案例教学法进行口腔正畸学教学有利于学生沟通能力、临床实际应对能力的培养,并解决了教学与临床实际脱节的问题。

谈PBL在口腔医学教育中的应用

医学教育目前正从过去的纯生物医学模式向生理-心理-社会环境的模式转变,对医学教育提出了新的要求。潍坊医学院口腔医学院为了适应现代医学教育模式,提高教学质量,现引入PBL(problem-based learning)教学法。本文阐述了PBL教学法在潍坊医学院口腔医学教学中的应用初探。

TGF-β1调控成釉细胞ODAM基因表达的研究

目的:探讨TGF-β1对ODAM基因表达的作用。方法:通过实时定量RT-PCR法观察TGF-β1对成釉细胞ODAM基因表达的影响;利用c-jun小RNA干扰(siRNA)技术,阻断转录因子c-jun基因表达,观察c-jun基因沉默对TGF-β1诱导ODAM基因表达的影响;利用双荧光素酶基因报告系统研究成釉细胞中TGF-β1对ODAM启动子转录活性的调控作用。结果:TGF-β1刺激成釉细胞后,ODAM基因表达显著增强;利用小RNA干扰技术使c-jun基因沉默,实时定量RT-PCR法研究显示,TGF-β1调控ODAM基因表达的作用减弱。将pGL3-ODAM转染成釉细胞后,用TGF-β1刺激成釉细胞一定时间,ODAM启动子的转录活性增强。c-jun基因沉默抑制了TGF-β1对ODAM启动子的激活作用。结论:在釉质发育过程中,TGF-β1通过转录因子c-jun调控成釉细胞ODAM基因表达。

牙科焦虑症患者心理干预的疗效分析

为了探讨心理诱导对牙科焦虑症(dental anxiety,DA)患者治疗的影响,采用焦虑自评量表及汉密顿焦虑量表对门诊就诊患者进行焦虑调查,筛选出伴焦虑者82例,随机分为两组,分别进行心理干预治疗和一般治疗,并对数据进行统计分析。结果显示,心理诱导指导组与对照组相比较焦虑水平明显降低,患者无论在完成第一次治疗还是复诊情况均优于对照组(P<0.01)。提示心理干预对DA患者治疗有显著效果。