针刺上巨虚穴对慢传输型便秘小鼠结肠组织Cajal间质细胞数的影响

目的探讨针刺上巨虚穴治疗慢传输型便秘(slow transit constipation,STC)的机制。方法将40只小鼠分为正常组、模型组、上巨虚组(针刺双侧上巨虚)、非经非穴组(针刺小鼠臀部两处非经非穴点),每组各10只。采用复方地芬诺酯灌胃法复制小鼠STC模型。观察各组首次排便时间、12h内排便粒数,采用免疫组织化学方法观察各组小鼠结肠Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICC)数量。结果与正常组比较,模型组小鼠的首次排便时间明显延长(P<0.01),12h内排便粒数和结肠ICC数量明显减少(P<0.01);与模型组比较,上巨虚组小鼠的首次排便时间明显缩短(P<0.01),12h内排便粒数和结肠ICC数量明显增多(P<0.01)。结论针刺上巨虚穴对STC具有明显的改善作用,其作用机制可能与升高结肠组织ICC数量有关。

针刺心经心包经对急性心肌缺血大鼠心电图J点、T波振幅及心肌梗死面积的影响

目的观察并比较电针心包经和心经抗急性心肌缺血的作用。方法将SD大鼠随机分为正常对照组、伪手术组、模型组、肺经组、心经组、心包经组。采用冠状动脉左前降支结扎法复制大鼠急性心肌缺血模型。肺经组选取"太渊(LU9)—列缺(LU7)"段,心包经组选取"大陵(PC7)—内关(PC6)"段,心经组选取"神门(HT7)—通里(HT5)"段。观察并比较各组大鼠心电图J点、T波振幅及心肌梗死面积。结果①与伪手术组比较,模型组结扎即刻,结扎72 h J点振幅、ΔJ,结扎72 h T波值、ΔT值均显著增大(P<0.01);与模型组、肺经组比较,心经组与心包经组结扎72 h J点值、ΔJ值、T波值、ΔT值均显著减小(P<0.05,或P<0.01)。②与伪手术组比较,模型组左心室梗死面积、梗死百分比显著增加(P<0.01)。与模型组、肺经组比较,心经组与心包经组左心室梗死面积、梗死百分比显著降低(P<0.01)。结论电针心经、心包经可明显改善急性心肌缺血大鼠心电图J点、T波的异常变化,减少心肌梗死面积,从而改善急性心肌缺血;两者在作用方向和作用程度上具有相似性。

针刺对便秘型肠易激综合征大鼠肠运动及胃肠激素含量的影响

目的观察针刺对便秘型肠易激综合征(constipation-predominant irritable bowel syndrome,IBS-C)大鼠的小肠推进率及血清、结肠中5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)、血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide,VIP)、P物质(substunce P,SP)水平的影响,探讨针刺对IBS-C大鼠的作用机制。方法从60只健康清洁级SD大鼠中随机选取10只作为正常对照组,其余50只大鼠采用寒冷-束缚-饥饱失常综合法进行IBS-C模型复制,进行模型评价后采用随机数字表法选取30只分为模型组、四单穴组方组、非经非穴组,每组10只。分别用活性炭粉悬浊液灌胃法观察各组大鼠小肠推进率,采用ELISA法检测血清5-HT、VIP、SP水平,采用免疫组织化学法测定结肠中5-HT、VIP、SP水平。结果与正常对照组比较,模型组大鼠小肠推进率显著降低(P<0.05);与模型组比较,四单穴组方组大鼠小肠推进率显著升高(P<0.05)。与正常对照组比较,模型组大鼠血清、结肠组织中5-HT、VIP水平显著升高(P<0.05),SP水平显著降低(P<0.05);与模型组及非经非穴组比较,四单穴组方组大鼠血清、结肠组织中5-HT、VIP水平均显著降低(P<0.05),SP水平均显著升高(P<0.05)。结论针刺可明显升高IBS-C大鼠小肠推进率,其作用机制可能与降低结肠、血清中5-HT、VIP水平,升高SP水平有关。

实时荧光定量PCR技术及其在肿瘤研究中的应用

与传统PCR技术相比较,qRT-PCR是具有高灵敏性、特异性、准确性的一种定量定性研究技术,能够更早地做到肿瘤基因早期诊断,已经成为医学分子生物学中重要的研究技术之一。且在临床中广泛应用,尤其近年来qRT-PCR技术在预防、诊断以及治疗肿瘤发生率较高领域(肺癌、肝癌、胃癌、乳腺癌、宫颈癌等)方面最为盛行,因此本文就qRT-PCR检测技术的最新研究进展进行综述。

从冲脉试析针灸治疗肠易激综合征

冲脉具有维持生命机能及延续生命的生理特性。冲脉为“五脏六腑之海”,藏元精元气;冲脉为“十二经之海”,受十二经及督脉气血渗灌。冲脉在循行及病症上均与少阴、阳明经有着密切联系。冲脉为“血海”,担负着阳明经气血的补充与濡养,与胃肠疾病联系密切。肠易激综合征的中医病因病机也表明,冲脉与该病密切相关。因此,冲脉可作为治疗肠易激综合征的首选经脉,临床可选择天枢、大肠俞、曲池、上巨虚、公孙等穴进行治疗。

试析心经心包经主治作用

古代医学经典和现代针灸经络研究成果,较为系统地总结了手少阴心经和手厥阴心包经所主病候和主治范围。笔者在前人总结的基础上,探讨了心经与心包经在主治心脏、脑部疾病以及其他病症方面各自的特点,并作比较分析。

电针对脑心综合征大鼠脑组织细胞凋亡及Caspase-3表达的影响

目的观察电针对脑心综合征(cerebral-cardiac syndrome,CCS)大鼠血肿周围脑组织细胞凋亡及Caspase-3表达的影响。方法从70只健康SD大鼠中随机选择10只作为假手术组,其余60只用于CCS模型复制。选取造模成功的大鼠30只,分为模型组、电针组和电针非经非穴组,每组10只。采用胶原酶加肝素联合注射大鼠尾状核方法造模,假手术组向大鼠尾状核注入等量0.9%氯化钠注射液。于造模第1天开始电针,电针组选取水沟、风府、内关和心俞穴,电针非经非穴组选取臀部非经非穴点4处,每次20min,每天1次,连续3天。假手术组和模型组仅每天抓空1次。分别采用TUNEL法和免疫组化法检测血肿周围脑组织细胞凋亡及Caspase-3表达。结果假手术组偶可见TUNEL细胞,Caspase-3少量表达;模型组血肿周围组织出现较多的TUNEL阳性细胞,Caspase-3大量表达;电针组TUNEL阳性细胞和Caspase-3表达均较模型组和电针非经非穴组明显减少(P<0.01)。结论电针可以抑制CCS大鼠脑组织细胞凋亡,其机制可能与下调血肿周围脑组织Caspase-3表达有关。

针刺“足三里”穴干预胃肠功能紊乱-腹泻模型大鼠胃肠激素GAS、MTL水平的影响

[目的]探讨针刺足三里穴治疗胃肠功能紊乱-腹泻(functional gastrointestinal disorders-diarrhea,FGIDs-D)的机制。[方法]将40只大鼠分为正常对照组、模型组、足三里组(针刺双侧足三里)、非经非穴组(针刺大鼠臀部两处非经非穴点),每组各10只。采用寒冷-束缚、饥饱失常综合法复制FGIDs-D动物模型。采用放免方法观察各组大鼠血清及胃组织中胃泌素(Gastrin,GAS)、胃动素(Motilin,MTL)的含量。[结果]与正常组比较,模型组大鼠血清及胃组织中GAS、MTL的含量显著降低,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,足三里组大鼠血清及胃组织中GAS、MTL的含量显著升高,差异有统计学意义(P<0.01);与非经非穴组比较,足三里组大鼠血清及胃组织中GAS、MTL的含量显著升高,差异有统计学意义(P<0.01)。[结论]针刺足三里穴对FGIDs-D具有明显的改善作用,其作用机制与GAS、MTL有密切关系。

基于EPO介导的JAK2/STAT5信号通路研究百会、大椎刺络促缺血性脑卒中后血管新生的调控机制

目的基于促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)介导的JAK2/STAT5信号通路探讨百会、大椎刺络促缺血性脑卒中后血管新生的调控机制。方法选取健康SD雄性大鼠150只,随机分为正常对照组、假手术组、模型对照组、刺络治疗组、刺络+EPO拮抗组,每组30只;正常对照组不进行手术,假手术组仅分离血管而不插线栓,模型对照组、刺络治疗组、刺络+EPO拮抗组采用改良的Zea-Longa法制备大脑中动脉局灶性脑缺血再灌注模型(middle cerebral artery occlusion/reperfusion model,MCAO/R)大鼠。模型制备后刺络治疗组、刺络+EPO拮抗组采用“百会”“大椎”穴刺络进行干预,刺络+EPO拮抗组在针刺前将脂质体-siEPO2复合物按5 mg/kg剂量对大鼠进行腹腔注射,使之进入合成EPO的靶细胞,在细胞内引起针对EPO的RNA干扰效应。采用苏木精-伊红染色观察各组大鼠脑皮质病理形态,RT-PCR法检测各组大鼠脑皮质中EPO、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)mRNA表达水平,Western Blot法检测各组大鼠脑皮质中P-JAK2、P-STAT5、VEGF蛋白表达水平。结果与正常对照组比较,模型对照组及刺络+EPO拮抗组大鼠脑皮质病理损伤严重;与模型对照组比较,刺络治疗组大鼠脑皮质病理损伤明显改善。与正常对照组比较,模型对照组大鼠脑皮质中EPO、VEGF mRNA表达水平显著升高(P<0.05),P-JAK2、P-STAT5、VEGF蛋白表达水平显著升高(P<0.05),刺络治疗会进一步增强这种趋势;与刺络治疗组比较,刺络+EPO拮抗组大鼠脑皮质中EPO、VEGF mRNA表达水平降低(P<0.05),P-JAK2、P-STAT5、VEGF蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论通过百会、大椎刺络能上调MCAO/R模型大鼠EPO的表达水平,激活JAK2/STAT5信号通路,促进下游VEGF的表达而促进缺血性脑卒中后血管的新生。

中医基础类实验实训教学改革的探索与实践——以安徽中医药大学为例

中医基础类课程虽以理论教学为主,但实践教学对学生理解中医基本理论和掌握中医基本技能至关重要。因此,如何结合专业特点和医学教育发展的要求,推动中医基础类课程实践教学改革,提高实验实训教学质量,是中医临床类专业人才培养的重要任务。本文结合安徽中医药大学近年来开展中医基础类实验实训教学改革的探索与实践,从整合课程内容,修订教学计划,加强自编教材建设,整合实验实训资源,增加综合性实验项目,优化资源管理,加大实验室的利用率和开放率,改革实验实训教学方法与手段等方面,分析探讨实施中医基础类实验实训教学改革的路径,以期为提升中医实验实训课程的建设水平和人才培养质量发挥积极的作用。

细胞凋亡参与脑心综合征心肌损伤及针刺干预作用

目的观察心肌细胞凋亡在脑心综合征(cerebral-cardiac syndrome,CCS)发病中的作用机制及针刺的干预作用。方法从60只健康SD大鼠中随机选择10只作为伪手术组,其余50只用于CCS模型复制,从模型复制成功的大鼠中随机选取30只,分成模型组、针刺组和非经非穴组,每组10只。采用胶原酶加肝素联合注射大鼠尾状核方法复制CCS模型,伪手术组向大鼠尾状核注入等量生理盐水。模型复制后72h处死动物,分别采用苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色、脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP-biotin nick end labeling,TUNEL)和免疫组织化学法检测心肌组织病理变化、细胞凋亡及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase 3)的表达。结果 HE染色示伪手术组心肌结构正常,模型组心肌细胞变性、坏死,大量平滑肌断裂;TUNEL及免疫组织化学染色提示模型组出现较多凋亡细胞,Caspase 3大量表达,针刺组TUNEL染色阳性细胞和Caspase 3阳性细胞均较模型组和非经非穴组显著减少(P<0.01)。结论心肌细胞凋亡参与了CCS大鼠心肌损伤,其机制可能与上调凋亡蛋白酶Caspase 3表达有关,而针刺可拮抗CCS大鼠心肌组织细胞凋亡。

针刺心包经、心经对急性心肌缺血模型大鼠心肌肌钙蛋白T的影响

目的:观察电针心包经、心经对急性心肌缺血模型大鼠心肌和血清心肌肌钙蛋白T(cTnT)的影响,比较针刺心包经和心经干预急性心肌缺血作用。方法:将SD大鼠随机分为正常对照组、伪手术组、模型组、肺经组、心经组、心包经组。采用冠状动脉左降支结扎复制大鼠急性心肌缺血模型。肺经组选取"太渊(LU9)–列缺(LU7)"段,心包经组选取"大陵(PC7)–内关(PC6)"段,心经组选取"神门(HT7)–通里(HT5)"段。观察急性心肌缺血大鼠心肌和血清cTnT的变化。结果:与伪手术组比较,模型组心肌和血清cTnT具有显著性差异(P<0.01);与模型组比较,心经组、心包经组均具有显著性差异(P<0.01),而肺经组则无显著性差异(P>0.05);与肺经组比较,心经、心包经均有显著性差异(P<0.01),而心经组、心包经组之间比较,差异无显著性(P>0.05)。结论:电针心包经、心经可显著降低急性心肌缺血大鼠心肌和血清cTnT的含量,且优于肺经,对急性心肌缺血具有保护作用。

针刺天枢大肠俞对腹泻模型小鼠肠运动的影响

目的:观察针刺穴位对腹泻模型小鼠肠运动的调节作用,为临床应用针灸治疗功能性腹泻提供科学依据。方法:采用番泻叶建立小鼠腹泻模型,观察各组小鼠72h后小肠推进率的变化及小肠黏膜形态学改变。结果:与模型组比较,针刺组小肠碳末推进率显著降低,非经非穴组小肠碳末推进率稍降低;HE染色显示:模型组小肠黏膜肿胀,绒毛脱落,小肠正常结构不完整,针刺组小肠黏膜病理改变显著改善。结论:针刺可以抑制腹泻小鼠小肠推进,并对受损的小肠黏膜病理损伤有一定的改善作用。

电针对大鼠脑出血后脑血肿的影响

目的观察早期电针治疗对大鼠脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)后脑血肿的影响。方法从60只Wistar大鼠中随机选择10只作为假手术对照组,其余50只用于大鼠ICH模型的复制,然后根据模型成功的评判标准随机选取模型复制成功大鼠30只,再分为模型组、非经非穴组和电针组,每组各10只。电针组选取"人中"、"风府",非经非穴组选取大鼠臀部非经非穴点。电针每次20 min,每隔24 h 1次,连续3 d。假手术对照组、模型组均不予电针。结果模型组、非经非穴组、电针组大鼠均可见大小不等的出血点及血肿;镜下观察可见模型组、非经非穴组、电针组大鼠大脑注射区域均可见组织内有不同程度的血肿,周围脑组织水肿、神经细胞肿胀、细胞核碎裂溶解或消失、组织内可见红细胞,有不同程度的炎性细胞浸润等;与非经非穴组、模型组比较,电针组血肿直径明显减小,差异有统计学意义(P<0.05)。结论针刺早期介入,可减小脑血肿的直径,能有效控制ICH后脑血肿的发生、发展,对保护脑组织具有一定的意义。

针刺心经对急性心肌缺血模型大鼠血流动力学指标的影响

目的观察针刺心经对急性心肌缺血模型大鼠心电图和血流动力学指标的影响,探讨针刺抗急性心肌缺血的效应。方法将SD大鼠随机分为伪手术组、模型组、针刺心经组、非经非穴组,每组各10只,通过冠状动脉左前降支结扎法复制大鼠急性心肌缺血模型,针刺心经组取"神门(HT7)—通里(HT5)"经脉段,非经非穴组取大鼠臀部非经穴刺激点,各刺入3根1寸毫针,间距约2mm;电针每次30min,每天1次,连续3次。观察比较各组大鼠血流动力学指标心率(heart rate,HR)、平均动脉压(mean arterial pressure,MAP)和心率收缩压乘积(rate pressure product,RPP)。结果末次针刺后即刻(0min),与伪手术组比较,模型组大鼠HR显著增加,MAP、RPP显著下降(P<0.01);与模型组、非经非穴组比较,针刺心经组大鼠HR显著下降,MAP、RPP显著上升(P<0.05,或P<0.01);末次针刺后10、20、30min,与模型组、非经非穴组比较,针刺心经组大鼠HR显著下降,MAP、RPP显著升高(P<0.01)。结论针刺心经可逆转急性心肌缺血大鼠心电图和血流动力学指标的异常变化,具有改善急性心肌缺血的确切效应。

电针对IBS-C模型大鼠血清及结肠中CGRP和5-HT表达的影响

目的:探讨电针对便秘型肠易激综合征(IBS-C)模型大鼠血清及结肠中降钙素基因相关肽(CGRP)和五羟色胺(5-HT)表达的影响。方法:40只大鼠随机分为正常对照组、模型组、电针四单穴组(电针天枢、大肠俞、曲池、上巨虚,双侧穴位左右交替针刺)、非经非穴组(电针大鼠两侧臀部非经非穴点)。除正常对照组外,其余3组采用寒冷-束缚-饥饱失常综合法复制IBS-C模型。模型复制成功后,电针四单穴组及非经非穴组开始电针治疗,1日1次,连续3 d。观察各组大鼠内脏敏感性变化、血清及结肠中CGRP、5-HT表达的差异。结果:与正常对照组相比,模型组腹部回缩反射最小容量阈值降低(P<0.05)、血清及结肠中5-HT与CGRP表达均增加(P<0.05);与模型组相比,电针四单穴组腹部回缩反射最小容量阈值升高(P<0.05)、血清及结肠中5-HT与CGRP表达明显降低(P<0.05),非经非穴组各指标无明显变化(P>0.05)。结论:电针四单穴组方可有效改善IBS-C大鼠内脏敏感性,并能调节大鼠血清及结肠中5-HT和CGRP表达水平,从而为临床治疗IBS-C提供实验依据。

不同穴位艾灸对腹泻模型小鼠腹泻指数及小肠AQP8、VIP及SP表达的影响

目的探讨不同穴位及配伍对腹泻模型小鼠腹泻指数的影响及艾灸干预腹泻的作用机制。方法将昆明小鼠90只,随机分为正常组、模型组、天枢组、大肠俞组及天枢大肠俞组。采用番泻叶灌胃法建立小鼠腹泻模型,对天枢组、大肠俞组、天枢大肠俞组大鼠进行艾灸,其中天枢组选取双侧天枢穴,大肠俞组选取双侧大肠俞穴,天枢大肠俞组选取一侧天枢、大肠俞(隔日交换对侧),观察各组小鼠72 h后腹泻指数及小肠水通道蛋白8(aquaporin protein-8,AQP8)、血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide,VIP)及P物质(substance P,SP)免疫阳性细胞表达的变化。结果与正常组比较,模型组腹泻指数显著增高(P<0.05);与模型组比较,天枢组、大肠俞组、天枢大肠俞组腹泻指数显著降低(P<0.05);与天枢组、大肠俞组比较,天枢大肠俞组腹泻指数显著降低(P<0.05)。与正常组比较,模型组小肠组织AQP8免疫阳性细胞表达显著减少(P<0.05),VIP、SP免疫阳性细胞表达显著增加(P<0.05);与模型组比较,天枢大肠俞组小肠组织AQP8免疫阳性细胞表达显著增加(P<0.05),VIP、SP免疫阳性细胞表达显著减少(P<0.05)。结论天枢与大肠俞配伍治疗腹泻具有协同效应,艾灸治疗腹泻机制可能与上调AQP8表达或抑制VIP、SP表达有关。

卫生监督实行政务公开的做法和体会

卫生执法工作是一项事关经济发展、社会进步、人民身体健康的重要工作.因此加强文明执法,提高执法透明度尤为重要.

附子毒性反应重现及配伍减毒效应的虚拟仿真实验设计

与干姜配伍是附子减毒的基本手段,但囿于医学伦理的相关规定以及动物实验的局限性,附子与干姜配伍减毒实验采用传统的实验方法难以有效开展;虚拟仿真技术为该实验的高质量开展提供了可能,且虚拟仿真实验具有安全性高、可重复操作、不受时空限制等优点。

针刺不同穴方对便秘小鼠肠运动的影响

目的:比较单穴之间、单穴与相应穴组之间、四单穴组方与相应穴组之间治疗便秘的疗效差异,为临床治疗便秘选穴组方筛选提供实验依据。方法:昆明小鼠190只,每组10只,分别就单穴组、单穴与相应穴组、四单穴组方与相应穴组的比较进行实验设计,均分别设有正常组和模型组做对照。采用灌胃给予复方地芬诺酯建立小鼠便秘模型。模型复制成功后,各治疗组分别选取"曲池""上巨虚""天枢"和"大肠俞"进行针刺。其中,单穴间比较选取4个穴位的单侧,单穴及相应穴组间比较选取4个穴位的双侧以及"天枢"+"大肠俞""曲池"+"上巨虚"的单侧,四单穴组方与相应穴组间比较选取"天枢"+"大肠俞""曲池"+"上巨虚"的双侧以及4个穴位的单侧同时针刺,留针20min,共针刺7次。以上均观察针刺对便秘模型小鼠首次排便时间、12h排便粒数和肠道推进率的影响。结果:1与正常组比较,3个模型组小鼠首次排便时间、12h排便粒数和肠道推进率的差异均具有统计学意义(P<0.01)。2与模型组比较,各单穴(单侧)组小鼠首次排便时间显著缩短(P<0.05),12h排便粒数明显增多(P<0.05),肠道推进率明显提高(P<0.01)。3与模型组比较,各单穴(双侧)组及天枢+大肠俞组、曲池+上巨虚组首次排便时间显著缩短(P<0.05),12h排便粒数明显增加(P<0.05),肠道推进率明显提高(P<0.05),且天枢+大肠俞组与曲池+上巨虚组均优于相应的单穴(双侧)组(P<0.05)。4与模型组比较,四单穴组方组及曲池+上巨虚组、天枢+大肠俞组小鼠首次排便时间显著缩短(P<0.05),12h排便粒数明显增加(P<0.05),肠道推进率明显提高(P<0.05),且四单穴组方组优于天枢+大肠俞组及曲池+上巨虚组(P<0.05)。结论:1针刺各单穴均对治疗慢传输型便秘具有明显改善作用;2针刺穴组的效应优于相应单穴双侧组,提示穴位间具有协同作用;3针刺四单穴组方的效应优于相应双穴组,提示针刺四单穴组方治疗效果最佳。