桑叶多糖含药血清对体外高糖培养INS-1细胞氧化应激损伤的保护作用研究

采用含桑叶多糖(mulberry leaf polysaccharide,MLP)的大鼠血清干预处理体外高糖培养的INS-1细胞,分别测定含MLP血清对高糖培养INS-1细胞中胰岛素含量、氧化应激标志物含量、细胞形态、抗氧化酶活性的影响,结果表明,MLP可明显提高高糖培养INS-1细胞中胰岛素含量,有效降低8-OHdG和丙二醛(MDA)含量,细胞形态明显改善,细胞中抗氧化酶SOD、CAT和GPx的活性明显升高,ROS含量显著降低。采用酶联免疫吸附测定MLP对高糖培养INS-1细胞线粒体呼吸链酶活性的影响,结果表明,MLP可显著提高高糖培养INS-1细胞线粒体呼吸链ComplexⅠ-Ⅳ复合酶的活性。最后采用Hoechst 33342染色、JC-1染色和免疫荧光组化法检测MLP对高糖培养INS-1细胞凋亡的影响,结果表明,MLP可明显提高线粒体膜电位,减少细胞色素C(Cyt-C)在胞浆中的表达,抑制细胞凋亡。上述结果表明,MLP可能通过提高细胞中抗氧化酶含量,改善线粒体能量代谢来减少氧化应激导致的细胞凋亡。

微酸性电解水对桑叶氟铃脲农药残留的降解作用

桑叶农药残留已成为影响蚕作安全的重要因素,严重威胁着蚕业生产的可持续健康稳定发展。为了减少蚕农因家蚕农药中毒造成的经济损失,文中以苯甲酰脲类杀虫剂氟铃脲为研究对象,采用高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)法测定了微酸性电解水对溶液体系中氟铃脲的降解效果,发现贮存10 h的微酸性电解水与100μg/mL氟铃脲溶液混合处理30 min,降解率最高,达到79.07%。采用Fenton比色法测定微酸性电解水在贮存过程中产生羟自由基的能力,发现贮存10 h时产生羟自由基能力最强。采用生物学试验鉴定微酸性电解水对桑叶氟铃脲农药残留的去除效果,采用将微酸性电解水与氟铃脲溶液混合处理后喷洒桑叶饲喂家蚕、将氟铃脲污染的桑叶用微酸性电解水进行喷洒处理后饲喂家蚕以及将氟铃脲污染的桑叶用微酸性电解水进行浸泡处理后饲喂家蚕3种方式,5龄盛食蚕体质量增长率、熟蚕体质量、结茧率、化蛹率、全茧量和茧层量均显著提高,死蚕率和死笼率降低,且随着氟铃脲农药残留浓度降低,浸泡处理时间延长,效果改善越好。微酸性电解水能够在一定程度上降解桑叶上氟铃脲残留,减少桑叶氟铃脲含量,减轻家蚕农药中毒造成的危害。研究结果将为微酸性电解水在防范家蚕农药中毒中的应用提供参考。

家蚕肠道产酶菌的分离与筛选

探明家蚕肠道菌在食物消化过程中的作用,有助于微生态饲用添加剂的开发研究。从家蚕肠道中分离出30株菌株,并研究了它们的胞外淀粉酶、蛋白酶、纤维素酶和脂肪酶的产酶能力。在家蚕肠道中存在着可以分泌蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶和纤维素酶的菌株。在分离到的30株肠道菌株中,产4种酶的有1株菌,产3种酶的有4株菌,产2种酶的有2株菌,产1种酶的有11株菌,不产酶的有12株菌。在产酶菌中,有9株菌株能分泌蛋白酶,能分泌脂肪酶和纤维素酶的各有7株菌,有8株菌株能分泌淀粉酶。家蚕肠道菌中的各种产酶菌高达60%,表明了肠道菌在家蚕食物消化过程中的重要性。

桑树内生拮抗细菌枯草芽孢杆菌L144对植物生长及营养代谢的影响

桑树内生拮抗细菌枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)L144对多种植物病原菌具有较强的抑制作用。为进一步探讨该内生菌的开发应用价值,研究了该内生菌对植物生长及营养代谢的影响。试验结果表明:适当浓度的L144菌株培养液能明显提高玉米和桑树种子的发芽势、发芽率和胚根长,增加玉米和桑树幼苗的株高及植株鲜质量和干质量,提高植株体内叶绿素、可溶性蛋白和可溶性糖的含量,且以菌株培养液10倍稀释液的促生作用最为显著;该菌株的菌体悬浮液及胞外分泌物对玉米幼苗也表现出不同程度的促生作用;该菌株还具有分泌植物生长激素、溶解无机磷和有机磷的性能,有可能是其促进植株生长的主要作用机制。试验结果提示,L144菌株的培养液及菌体和胞外分泌物对植物有较明显的促生作用。

盐酸诺氟沙星在健康及细菌感染家蚕中的药代动力学研究

比较抗菌素盐酸诺氟沙星在健康和细菌感染家蚕间的药代动力学特征,可为临床合理用药提供科学依据。对健康及黑胸败血菌(Bacillus bombysepticus)感染家蚕幼虫用250μg/mL盐酸诺氟沙星药液处理的桑叶(剂量18mg/kg)添食,经高效液相色谱法(HPLC)检测不同时间的血浆药物浓度,并用MCP-KP药代动力学分析程序进行分析。结果表明,盐酸诺氟沙星在健康及细菌感染家蚕体内的血药浓度与时间关系均符合一级吸收一室开放模型。与健康家蚕药物代谢动力学参数相比较,盐酸诺氟沙星在细菌感染家蚕体内的药-时曲线下面积(AUC)由81.194mg/(h.L)降为66.105mg/(h.L),吸收半衰期(T1/2Ka)由1.252h延长为1.591h,分布半衰期(T1/2α)由2.673h缩短为1.981h,消除半衰期(T1/2β)由9.298h缩短为5.338h,说明细菌感染使盐酸诺氟沙星在家蚕体内的吸收能力下降,吸收减慢,分布和消除加快。

羧化壳聚糖对离体桑叶及家蚕生理影响的研究

用不同浓度的羧化壳聚糖溶液处理离体桑叶 ,间隔一定时间调查其保鲜效果 ,结果表明 :羧化壳聚糖具有防止桑叶失水 ,保持桑叶原色等保鲜效果 ,并能抑制桑叶呼吸强度 ,降低桑叶在贮藏过程中营养成分 (糖、蛋白质 )的损失。生物试验表明 :羧化壳聚糖不仅对家蚕的生长发育无不良影响 ,而且在一定程度上能提高眠蚕体重、全茧量、茧层量、茧层率和健蛹率等。此外 。

Paraconiothyrium variabile GHJ-4产漆酶发酵培养基优化及酶学性质研究

为了提高木质素降解子囊菌Paraconiothyrium variabile GHJ-4产漆酶的能力,采用响应面分析法优化其产酶培养基。最优的发酵培养基组成为:麸皮30 g·L^(-1),可溶性淀粉58.08 g·L^(-1),牛肉浸膏3.39 g·L^(-1),NaNO_3 1 g·L^(-1),KH_2PO_4 3 g·L^(-1),CuSO_4 0.554 g·L^(-1)。采用该优化培养基,GHJ-4菌株的漆酶酶活达到410.04 U·m L^(-1),比优化前提高9.5倍。以愈创木酚为底物,该菌株纯化漆酶的最适反应温度为50°C,最适反应pH为5.0,米氏常数Km为62.07μmol·L^(-1),最大反应速度Vmax为68.97 mmol·(L·min)-1;该漆酶在55°C以下、pH3.5~6.5的范围内较为稳定,Cu^(2+)、Mg^(2+)、Zn^(2+)对漆酶酶活有明显促进作用,而Hg^(2+)、Fe3+、Ag+对漆酶酶活有显著抑制作用。结果表明,Paraconiothyrium variabile GHJ-4是一株高效的漆酶产生菌株,具有潜在的工业化应用前景。

中草药对家蚕病原细菌的体外抑菌试验

本文选用11味中草药对蚕业生产上常见的细菌病病原（黑胸败血菌、苏云金杆菌和灵菌）进行了体外抑菌试验。结果表明：黄岑、黄连、黄柏、大黄、秦皮、连翘对3种病原菌均有不同程度的抑制作用,金银花、蒲公英、苍耳子、黄芪则对3种病原菌无抑制作用。采用平皿内试物液稀释法测定4种单味中草药及其两两组合后的复方中草药对3种病原菌的体外M IC,结果单味中草药对3种病原菌的M IC在31.25-125 mg/mL之间;9种两味药物组合的M IC在7.8125-62.5 mg/mL之间,表现出协同作用和相加作用,显示出中药配伍的优势。

蚕桑与食疗

一、食疗 食疗,又称饮食疗法,它是利用各种食物,经过烹调加工,制成食品,进而通过食用达到预防和治疗疾病的目的.

桑树内生拮抗细菌Burkholderia cepacia Lu10-1的分离鉴定及其内生定殖

【目的】对从健康桑树叶片中分离到的一株内生拮抗细菌Lu10-1进行鉴定,并探讨该菌株在桑树体内的定殖。【方法】通过形态观察、生理生化指标测定及16SrRNA基因序列同源性分析,结合recA基因特异引物PCR检测法对菌株Lu10-1进行分类学鉴定;以抗利福平(Rif)和氨苄青霉素(Amp)双抗药性为标记,采用浸种、浸根、涂叶和针刺等方法接种,测定Lu10-1菌株在桑树体内的定殖。【结果】结果表明,菌株Lu10-1属于伯克霍尔德氏菌属(Burkholderia),与亲缘关系较近菌株B.cepacia(X80284)的同源性达98%,该菌株的16SrDNA序列已在GenBank中注册,登录号为EF546394;Lu10-1菌株浸种接种后,菌株在桑苗组织中的数量总体上呈现下降趋势,到第20天后菌量趋于稳定;细菌浸根接种后,菌株在茎叶部定殖的菌量均呈现出"先增后降"的趋势。【结论】内生拮抗细菌Lu10-1归属于洋葱伯克霍尔德氏菌基因型Ⅰ(Burkholderia cepacia genomovarⅠ);该菌株可在桑树体内长期定殖并传导,且在定殖过程中菌株的拮抗性能未改变;为将该菌株导入桑树体内进行病害的生物防治提供了理论依据。

桑叶多糖MLPⅡ的基本结构及对糖尿病模型大鼠的降血糖作用

从桑叶中分离纯化获得一种具有降血糖活性的均一多糖组分MLPⅡ。高效液相色谱分析桑叶多糖MLPⅡ主要由甘露糖(man)、鼠李糖(rha)、葡萄糖(glc)、木糖(xyl)和阿拉伯糖(ara)等5种单糖组成,其摩尔比为n(man)∶n(rha)∶n(glc)∶n(xyl)∶n(ara)=8.73∶1.04∶6.53∶2.13∶1.00;红外光谱显示桑叶多糖MLPⅡ的主要连接键为β-糖苷键。桑叶多糖MLPⅡ对糖尿病模型大鼠的降血糖试验结果表明,150 mg/kg MLPⅡ治疗组糖尿病模型大鼠的体质量与对照组糖尿病模型大鼠相比提高了26.22%,而空腹血糖(FBG)浓度降低了52.89%,达到极显著水平,并且治疗组糖尿病模型大鼠的糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹胰岛素(FINS)和C-肽(C-P)水平得到改善,损伤胰岛细胞得到修复,胰岛β细胞合成和胰岛素分泌的能力增强。研究结果提示,桑叶多糖MLPⅡ可有效控制糖尿病模型大鼠的体质量和空腹血糖水平,并改善糖耐量,而促进糖尿病模型大鼠胰岛β细胞合成及胰岛素分泌可能是桑叶多糖MLPⅡ降血糖作用机制之一。

SO_2胁迫对桑树部分生理生化特性的影响

为探究桑树对SO2污染的抗逆机制,以盆栽实生桑苗为试验材料,采用密闭箱静态熏气法研究不同浓度SO2胁迫对桑树主要逆境生理生化特性的影响。桑树叶片中的含硫量随SO2胁迫处理浓度的增加而升高,随着SO2胁迫的加强,桑树叶片逐渐出现坏死,甚至萎蔫。桑树叶片过氧化氢酶(CAT)活性在处理前期随SO2胁迫处理浓度的增加而升高,处理后期当SO2质量浓度达到50 mg/m3之后,又表现出下降的趋势;桑树叶片的超氧化物歧化酶(SOD)活性则随SO2胁迫处理浓度的增加而急剧下降;在较低质量浓度(10、30 mg/m3)SO2胁迫下,桑树叶片的过氧化物酶(POD)活性表现出较大幅度的升高,而较高质量浓度(50 mg/m3)SO2胁迫下则表现出下降的趋势;桑树叶片的叶绿素含量、净光合速率随着SO2胁迫处理浓度的提高表现出减小趋势,脯氨酸、丙二醛(MDA)、可溶性蛋白质的含量则随SO2胁迫处理浓度的提高而增大。试验结果表明,SO2胁迫抑制了桑树保护酶活性,导致植株逆境伤害加剧,叶片产生坏死,降低了光合能力,对桑树生长产生不利影响。

桑树内生真菌的分离、鉴定及其多样性分析

用组织分离法从不同桑树品种的器官组织中共分离出内生真菌114株,经显微形态观察,鉴定114株内生真菌分别归属于镰孢霉属Fusarium、链格孢属Alternaria、柱霉属Scytalidium等21个属,表明桑树内生真菌具有丰富的生物多样性。不同桑树品种树体内的内生真菌分布有一定差异。同一桑树品种不同器官组织的内生真菌种类和数量差异较大,根中最多,茎中次之,叶中最少。其中:镰孢霉属为根中优势种群,链格孢属为茎、叶中的优势种群;丛梗孢属Monilia和镰孢霉属菌株在根、茎、叶中均能分离到,其它属的菌株只存在于其中的某一个或两个器官组织。研究结果有助于进一步探讨桑树内生真菌与生理活性物质的关系。

桑叶多糖MLPⅡ对糖尿病模型大鼠肝脏胰岛素抵抗的改善作用

从桑叶中分离纯化获得一种具有降血糖活性的均一多糖组分MLPⅡ,通过检测分析MLPⅡ治疗组糖尿病模型大鼠的胰岛素敏感指数和肝脏生理指标,探究桑叶多糖MLPⅡ对糖尿病模型大鼠肝脏胰岛素抵抗的改善作用。与糖尿病对照组模型大鼠相比,150 mg/kg MLPⅡ治疗组糖尿病模型大鼠肝脏组织中的总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和丙二醛(MDA)含量分别降低了40.59%、38.58%和52.81%,而肝脏组织中的超氧化物歧化酶(SOD)活性、肝糖原含量和肝脏葡萄糖激酶活性则分别升高了15.88%、198.48%和169.77%,均达到极显著水平。与糖尿病对照组模型大鼠相比,桑叶多糖MLPⅡ治疗组糖尿病模型大鼠的胰岛素敏感指数均明显提高,肝脏的脂肪变性程度明显减轻,其中150 mg/kg MLPⅡ治疗组均达到极显著水平。研究结果提示,桑叶多糖MLPⅡ可显著改善糖尿病模型大鼠的肝脏糖脂代谢和胰岛素抵抗,其作用可能与调节胰岛素的释放和肝脏的氧化应激水平有关。

植物内生细菌的侵染定殖规律研究进展

详细综述了植物内生细菌的侵染定殖过程,即吸附、侵入、定殖三个阶段。着重阐述了对植物内生细菌的定殖检测方法,包括抗生素标记法、免疫学方法、基因标记法及特异性寡核苷酸片段标记法等。另外,对植物内生细菌的来源及定殖影响因子也进行了系统讨论,并对未来植物内生细菌定殖研究前景作了展望。

蝇蛆寄生对家蚕血细胞和酚氧化酶活性的影响

为了探明蝇蛆寄生对家蚕免疫因子的影响，对家蚕追寄蝇（Exorista sorbillans Wiedemann）幼虫寄生的5龄家蚕血淋巴中血细胞数量的变化以及血淋巴酚氧化酶活性的变化进行了研究。结果表明：蝇蛆寄生家蚕后，家蚕血淋巴中颗粒细胞和浆细胞的数量急剧上升，在寄生后16～24h，蝇蛆蚕血淋巴颗粒细胞和浆细胞数达到6．81×10^6／mL，比对照增加了4．76×10^6／mL；蝇蛆寄生导致血淋巴黑化反应加快。黑色素增加；蝇蛆蚕血淋巴酚氧化酶活性升高，在6d内由7U／mg上升到34U／mg.

桑叶多糖MLPⅡ对糖尿病大鼠胰腺组织氧化应激的保护作用

用从桑叶中分离提取的粗多糖MLPⅡ连续5周灌胃给药治疗Ⅱ型糖尿病模型大鼠,在电子显微镜下观察大鼠胰岛β细胞超微结构,采用免疫组化法检测核转录因子κB(nuclear transcription factorκB,NF-κB)的表达变化,并利用Western blot、半定量RT-PCR法分别检测肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)和胰岛素2(insulin 2,INS-2)在蛋白质表达水平和基因转录水平的变化。与糖尿病模型对照组大鼠相比,桑叶多糖MLPⅡ治疗组糖尿病模型大鼠的胰岛β细胞超微结构损伤程度明显减轻,胰岛β细胞中NF-κB的表达明显降低,胰腺组织中TNF-α蛋白的表达和基因mRNA的转录显著下调(P<0.01),而INS-2蛋白的表达和基因mRNA的转录显著上调(P<0.01)。试验结果表明,桑叶多糖MLPⅡ可明显改善Ⅱ型糖尿病模型大鼠胰腺组织氧化应激损伤,其作用机制可能与下调胰腺组织NF-κB和TNF-α的表达有关。

盐酸诺氟沙星防治家蚕细菌病的药理学研究

盐酸诺氟沙星是一种氟喹诺酮类抗生素 ,已作为新一代蚕用抗生素应用。体外抑菌试验表明 ,在相同浓度下 ,盐酸诺氟沙星对家蚕 3种病原细菌的抑菌效果好于氯霉素和红霉素 ;生物试验表明 ,该药对家蚕常见细菌病有较好的防治效果 ,并且对家蚕的生长发育及茧质均无不良影响 ;研究其在家蚕体内的药代动力学发现 ,盐酸诺氟沙星在家蚕食下 0 2 5h后进入血液 ,0 5h后达到最大值 ,2 4h后在血液中已检测不到。