HIV-1转基因大鼠的肾脏氧化应激与凋亡基因的表达

目的检测HIV-1转基因大鼠和F344大鼠肾脏COX3、COX5a、SOD2、GPx4、Caspase-1、Bax、BCL2L1、Fas Lg基因表达水平,探讨相关基因表达与HIV-1致肾脏病理变化的相关性。方法以GAPDH为内参照,应用SYBR Green染料法进行相对实时荧光定量PCR检测COX3、COX5a、SOD2、GPx4、Caspase-1、Bax、BCL2L1、Fas Lg在HIV-1转基因大鼠和F344大鼠肾脏中的表达情况。结果 HIV-1转基因大鼠肾脏组织中氧化应激相关基因COX3、COX5a、SOD2、GPx4基因表达水平分别是F344大鼠的0.440,0.791,1.703,0.346倍,其中SOD2基因表达水平显著升高(P<0.05),COX3、COX5a、GPx4显著降低(P<0.05)。HIV-1转基因大鼠肾脏组织中凋亡相关基因Caspase-1、BCL2L1、Bax、Fas Lg的基因表达水平分别是F344大鼠的1.389,1.145,0.400,0.590倍,其中,Caspase-1和BCL2L1基因表达水平显著升高(P<0.05),Bax和Fas Lg显著降低(P<0.05)。结论 HIV-1通过下调抗氧化酶基因表达水平使肾脏发生氧化应激,通过调控凋亡基因表达水平来拮抗肾脏细胞凋亡。

泡白菜卤中优势微生物的分离鉴定及抗菌特性的研究

以泡菜厂、居民家、实验室的14种泡白菜卤为研究材料,通过平板稀释的方法对泡菜卤的肠杆菌、酵母菌、霉菌、需氧嗜温菌和乳酸菌进行计数,并对优势的乳酸菌进行鉴定。110种乳酸菌是从这14种泡白菜卤中的203种分离菌得到的。对分离的乳酸菌用API50CHL试剂盒中49种糖类反应和附加的生物化学试验进行鉴定。来自居民家泡菜卤中乳酸菌有Lactobacillus plantarum、Lactobacillus fermentum、Lactobacillus brevis、Lactobacillus acidophilus、Lactobacillus Pentosus.泡菜厂和实验室白菜卤的乳酸菌除与居民家取的泡菜卤中乳酸菌一样外,还有Leuconostoc mesenteroides,6种乳酸菌中有3种对大肠杆菌有明显的抑制作用,而6种乳酸菌对金黄色葡萄球菌无抑制作用。

中国地鼠口腔颊囊黏膜癌模型的建立及癌变的动态观察

目的:利用二甲基苯并蒽(DMBA)涂抹法建立中国地鼠颊囊黏膜癌的实验动物模型,观察癌变不同时期的组织学动态变化过程。方法:将60只雄性中国地鼠随机分为3组,分别为模型组(24只)、溶剂对照组(12只)、空白对照组(24只)。溶剂对照组仅涂丙酮液,空白对照组不作任何处理,模型组以0.5%DMBA涂抹中国地鼠两侧颊囊,每周3次,共15周。分别于第6、9、12、15周将模型组和空白对照组随机处死6只,溶剂对照组处死3只,在肉眼及光镜下动态观察颊囊黏膜癌变全过程的形态学和显微组织学改变。结果:与对照组比较,DMBA长时间处理后模型组地鼠相继出现口腔内黏膜充血、增厚、溃烂化脓、白斑及菜花状赘生物等变化,经历了单纯上皮增生(6~9周)、不同程度上皮异常增生(9~12周)、原位癌及鳞状细胞癌(12~15周)等阶段。结论:DMBA涂抹法可成功建立中国地鼠颊囊黏膜癌前病变、鳞状细胞癌模型,发病过程与人类口腔鳞状细胞癌相似,为口腔鳞癌的多阶段、多步骤研究提供了一个较为理想的动物模型。

氟对大鼠肝组织细胞凋亡与DNA损伤的影响

目的研究大鼠染氟后肝组织细胞凋亡及DNA损伤情况。方法 SD大鼠随机分为对照组、低氟组、中氟组、高氟组,每组12只,分别饮用含氟化钠为0、50、100、200 mg/L的去离子水,均饲标准营养大鼠饲料,染氟120 d。肉眼观察牙齿的变化,采用氟离子选择电极法测定大鼠尿氟,HE染色观察组织病理学变化,彗星实验检测细胞DNA损伤,流式细胞术检测肝脏组织细胞凋亡率。结果低氟组、中氟组、高氟组大鼠尿氟分别为(23.52±2.91)、(30.16±4.78)、(61.23±3.98)mg/L,均显著高于对照组(0.07±0.02)mg/L,差异有统计学意义(P<0.01)。不同剂量染氟大鼠肝组织细胞呈现不同程度肿胀,肝组织内出现多种灶状病变。各染氟组大鼠肝细胞拖尾率及拖尾长度与相应的对照组相比,差异均有统计学意义,并且肝细胞拖尾率及拖尾长度随染氟剂量的加大而增大。不同剂量染氟组细胞凋亡率与对照组相比,均明显增高,而且高、中氟组肝细胞凋亡率显著高于低氟组(P<0.01)。结论氟化物可导致大鼠肝细胞DNA损伤,诱导细胞凋亡,一定浓度的氟化物诱导大鼠肝细胞凋亡与DNA损伤之间存在着相关性。

不同理化处理对鲜切豇豆菜生理特性的影响

实验采用不同的物理方法:低功率超声波(清洗10 min)、紫外线(照射40 min)和不同的化学试剂:苯甲酸钠(5 g/L)、双氧水(50 mL/L)、次氯酸钠(活性氯0.01%)来清洗鲜切豇豆,并用蒸馏水处理作为对照。通过研究样品中失重率、呼吸强度、Vc、叶绿素、可溶性蛋白含量的变化,探索有利于鲜切菜保鲜的最佳清洗方法。结果表明:紫外线照射40 min的处理中可溶性蛋白含量下降较少且Vc降低最缓慢,但紫外线容易使鲜切菜产生褐变,影响外观品质;超声波清洗消毒速度快,但消毒效果不彻底;与其它化学清洗方法相比,活性氯0.01%的次氯酸钠在Vc含量、可溶性蛋白含量、维持叶绿素含量方面的效果相对较好,可作为鲜切豇豆加工过程中清洗剂的首选。

EGFR,PDCD4,TGF-β1,Smad3,Smad7在中国地鼠口腔颊囊黏膜癌变过程中的表达研究

目的探讨EGFR,PDCD4,TGF-β1,Smad3,Smad7在口腔正常黏膜、上皮单纯增生、上皮异常增生和鳞状细胞癌组织中的表达及意义。方法采用ELISA对中国地鼠口腔黏膜癌变过程中血清EGFR,PDCD4水平进行检测;采用免疫组织化学法检测正常口腔黏膜上皮,单纯增生上皮、异常增生上皮和鳞癌组织中TGF-β1,Smad3,Smad7的表达。结果在口腔黏膜癌变过程中血清EGFR蛋白呈升高趋势,血清PDCD4的表达呈降低趋势,呈负相关。鳞癌组织中TGF-β1、Smad7表达明显高于口腔正常黏膜、上皮单纯增生、上皮异常增生(P<0.05),而Smad3作用减弱。相关性分析显示,口腔异常增生上皮、口腔鳞癌组织中TGF-β1表达与Smad7呈正相关(P<0.05)。结论 EGFR,PDCD4,TGF-β1,Smad3,Smad7表达与口腔鳞癌的生物学行为关系密切,本实验为研究口腔鳞癌机理研究提供了理论依据,对口腔鳞癌的发展与预后有重要意义。

中国地鼠线粒体DNA 16S rRNA基因序列分析及分子系统发育研究

目的通过克隆分析中国地鼠16S基因的部分序列,对中国地鼠16S基因的结构和功能进行初步探索和揭示。方法从GenBank中已报道的啮齿动物16S基因保守区设计一对引物,进行PCR扩增,测序。用Blastn与GenBank中七种啮齿类动物的16S基因进行序列比较,分析其碱基组成及变异情况,并用邻接法(NJ)、非加权组平均法(UPGMA)构建分子系统树,在分子水平上探讨中国地鼠和其他啮齿类动物的进化关系,对中国地鼠的种属地位进行了进一步验证。结果获得了中国地鼠线粒体16S基因的部分序列,其碱基组成A、T、C、G分别为40.5%、24.5%、18.7%、16.3%,与其他七种啮齿类动物的碱基含量相比,各碱基含量基本相似。NJ进化树表明,中国地鼠、金黄地鼠与欧洲仓鼠先聚为一支,小鼠与大鼠先聚为一支,东方田鼠、台湾田鼠与东欧田鼠先聚为一支。结论中国地鼠和金黄地鼠的亲缘关系最近,与传统的分类地位基本吻合。

中国地鼠线粒体D-loop基因的克隆及序列分析

本试验根据已知相近物种动物基因序列设计引物,PCR扩增获得中国地鼠线粒体D-loop基因序列。采用DNAS-tar软件计算序列碱基组成,分析遗传变异情况。用MEGA 4.1软件计算物种间遗传距离,采用邻接法(NJ)、最小进化法(ME)构建系统进化树。结果表明,中国地鼠线粒体D-loop区序列全长为867bp,碱基A、T、C、G的含量分别为29.53%、31.49%、26.07%、12.92%,中国地鼠与啮齿类动物有相似的碱基组成。系统进化树结果显示,中国地鼠与金黄地鼠亲缘关系较近,与大鼠的关系最远,与传统的分类相一致。所获得的中国地鼠D-loop基因可作为种间遗传变异研究的标记,研究结果为进一步研究中国地鼠的群体遗传结构奠定了基础。

小鼠肾小管上皮细胞的培养和鉴定

目的建立小鼠肾小管上皮细胞培养方法,为有关肾损伤体外研究提供实验平台。方法分别采用肾小管节段贴块法、胰蛋白酶和胶原酶Ⅰ法消化分离肾小管节段,用含10%血清的培养基培养,然后用含EDTA的0.25%胰蛋白酶消化,对原代和传一代肾小管上皮细胞进行鉴定。结果三种培养方法培养细胞3 d基本贴壁,胶原酶Ⅰ法3-4 d长满瓶底,肾小管节段贴块法4-5 d长满瓶底,胰蛋白酶7 d左右。细胞均鹅卵石铺路样生长,经细胞免疫组织化学染色鉴定cytokeratin 18呈阳性。结论肾小管节段贴块法和胶原酶Ⅰ消化都可以得到较理想的肾小管上皮细胞,后者细胞生长较快,为研究肾损伤的发生原因和机制提供实验基础。

中国地鼠线粒体基因组与微卫星遗传标记的研究

中国地鼠在生物医学研究中占有重要的地位,但中国地鼠的分子遗传标记研究尚少。本研究运用生物信息学和比较基因组学等方法分析了中国地鼠的线粒体基因组的碱基组成、基因组结构、基因进化等特征,为中国地鼠应用于人类疾病动物模型提供基因组数据。建立了中国地鼠近交系遗传质量控制体系,为中国地鼠种质资源科学评估、合理开发利用奠定了基础。

某基层医院住院患者死因统计分析

目的了解住院患者的死亡情况及原因。方法采用回顾性调查方法对某基层医院1993—2005年住院死亡的118例临床资料进行统计分析。结果男性明显多于女性;死亡人数最多的年龄段为60～69岁,占35.59%,其次为50～59岁和70～79岁,分别占23.73%和16.95%;死因顺位前5位依次是循环系统疾病、恶性肿瘤、损伤和中毒、消化系统疾病、妊娠分娩产褥期疾病。结论加强对老年疾病的防治和研究;加强对死亡顺位前5位疾病的防治工作,以提高矿区职工、家属的健康水平和生命质量。

纳米铜粉在乙醇溶液中的团聚规律

研究了纳米铜粉在乙醇溶液中团聚的影响因素及其规律。结果表明:随着静止时间的延长,纳米铜粉的团聚粒径逐渐增大,粒径的分布范围先是增大,当团聚达到动态平衡后又逐渐变小;当团聚达平衡状态时,纳米铜粉的平均粒径随其质量分数的增加而增大,但当质量分数达到一定值时平均团聚粒径就达到极限;纳米铜粉在悬浊液中的团聚速率随纳米铜粉质量分数的增大而增大。

369例脑卒中住院病人流行病学分析

目的 :探讨矿区脑卒中住院病人的发病危险因素。方法 :对矿区医院1995年7月～2002年7月住院的369例脑卒中病人进行回顾性分析 ,并分为≤50岁组及>50岁组进行危险因素分析。结果 :脑卒中病例中男性明显高于女性 ,平均发病年龄为59.97岁 ,脑梗死平均年龄比脑出血和短暂性脑缺血高 ,各病种发病季节冬春略高与夏秋季节。在脑梗死和脑出血病例中 ,年龄是影响预后的关键因素之一 ,≤50岁组其治愈率和好转率明显高于>50岁组年龄组 ,差异有极显著性P<0.01 ,脑梗死和脑出血组比较 ,脑出血组死亡率明显高于脑梗死组 ,差异有显著性P<0.05。≤50岁的病人主要危险因素为高血压 (64.81 % ) ,高血脂(55.56 % ) ,吸烟 (51.85 % ) ,酗酒 (44.94 % ) ;>50岁的病人主要危险因素为高血压 (67.94) ,吸烟 (48.57 % ) ,高血脂 (46.03 % ) ,高血糖 (40.63 % )。结论 :中老年病人应定期监测血压、血脂、血糖 ,发现异常及时合理用药 ,戒除不良生活习惯 ,医疗机构要加强脑血管病的防治工作 ,遏制脑血管病的年轻化趋势。

重科技 抓培训 加快企业发展步伐

江苏天伦染织实业有限公司多年来,坚定不移地执行“科技兴厂,教育为本”的方针,注重智力投资,狠抓教育培训,职工整体素质到有,96年以来,一直保持在年结汇金额1500万美元以上,最高达2196万美元。公司先后被上级授予“江苏省文明单位”、“全国纺织科技进步先进单位”、“

硒对氟致大鼠肾小管上皮细胞线粒体膜电位改变的拮抗作用

目的探究硒对氟致大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E细胞)线粒体膜电位改变的拮抗作用。方法实验共设4组:染氟组(5mg/L和20mg/L的氟化钠)、染硒组(0.0171mg/L和0.0342mg/L的亚硒酸钠)、硒干预组(氟化钠和亚硒酸钠联合干预)和对照组,按照分组干预NRK-52E细胞48 h。流式细胞仪检测其线粒体膜电位,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和总抗氧化力(T-AOC)测试盒测定酶的活性。结果与对照组比,随着氟化钠浓度的升高,染氟组NRK-52E细胞线粒体膜电位下降(P<0.05或P<0.01)且SOD、T-AOC、GSH-PX和CAT酶活性均降低(P<0.05或P<0.01)。与染氟组相比,相对应的硒干预组线粒体膜电位升高(P<0.01)。与20mg/L的染氟组比较,相对应硒干预组的SOD、T-AOC、GSH-PX和CAT酶活性均升高(P<0.05)。与0.0171 mg/L染硒组相比,相对应的硒干预组线粒体膜电位降低(P<0.01)且T-AOC、GSH-PX和CAT酶活性均降低(P<0.01或P<0.05)。5 mg/L加氟组与加硒组相比,线粒体膜电位显著变化(P<0.01),但SOD、GSH-PX、CAT、T-AOC酶活性均无显著变化。20mg/L加氟组与加硒组相比,线粒体膜电位具有显著性差异(P<0.01)且SOD、GSH-PX、CAT、T-AOC酶活性均有显著性差异(P<0.01)。结论一定浓度的硒可以拮抗氟诱导大鼠腎小管上皮细胞线粒体膜电位下降,可能通过恢复抗氧化酶活性实现。

氧化应激与肾脏细胞凋亡

氧化应激产生的活性氧(ROS)与细胞凋亡存在密切的关系。ROS可通过激活线粒体、Bcl-2家族、NF-κB及MAPKS家族、Caspase家族等途径引起细胞凋亡,细胞凋亡在肾脏疾病的发病过程中起着重要作用。本文就氧化应激在肾脏疾病发生发展中的作用及其诱导细胞凋亡的机制进行了综述。

利用中国仓鼠制备疾病模型的优势与进展

中国仓鼠是具有中国特色的实验动物,在医学和生物学等实验研究中占有重要地位,广泛用于遗传学、传染病学和组织培养等生命科学研究,尤其是在糖尿病与口腔癌等动物模型及机制研究方面独具特色。本文就中国仓鼠自被开发以来在疾病动物模型中的应用研究进行综述,探讨中国仓鼠在生物医学研究中的作用与面临的问题。

槲皮素对口腔癌Tca-8113细胞增殖、迁移和侵袭的影响及PI3K/AKT信号通路的调控作用

目的研究槲皮素对Tca-8113细胞增殖、迁移和侵袭功能的影响及PI3K/AKT通路的调控作用。方法体外培养Tca-8113细胞,将细胞分为对照组和槲皮素(50μmol/L)处理组。采用CCK-8实验检测细胞增殖能力;Transwell(添加基质胶)检测细胞迁移(侵袭)情况;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中PTEN、AKT、FOXO1以及BCL2L11 mRNA表达,蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测FOXO1、p-FOXO1、AKT、p-AKT、PTEN和BCL2L11蛋白表达。结果与对照组相比,槲皮素处理组Tca-8113细胞的增殖、迁移及侵袭能力显著降低,PTEN和BCL2L11 mRNA和蛋白表达水平均显著上调(P<0.05),FOXO1和AKT磷酸化水平显著下调(P<0.01),但AKT和FOXO1 mRNA表达水平无显著差异。结论槲皮素可抑制Tca-8113细胞增殖、迁移及侵袭,其机制可能是槲皮素促进PTEN的表达,负调控PI3K/AKT通路减弱FOXO1的磷酸化水平,引起BCL2L11的表达增加实现的。

自噬相关基因及信号通路在口腔肿瘤发生发展中的影响

自噬是依赖溶酶体进行的一种高保守的细胞自我保护行为,可作为促进或预防癌症的重要因素。自噬作用与肿瘤的类型及发展程度相关,对自噬途径的了解有助于提高肿瘤的诊断和治疗。研究表明自噬与口腔肿瘤的发生发展密切相关,自噬相关基因及信号通路对口腔肿瘤起着双重调节作用。本文综述了在口腔肿瘤中自噬相关调节机制及治疗作用的最新进展。