脆弱拟杆菌的研究进展

近年来,伴随着对肠道益生菌的研究越来越重视,脆弱拟杆菌得到了更加广泛的关注。脆弱拟杆菌是一种能够在哺乳动物肠道内定植并且能够和寄主共生的益生菌。具有减肥、预防和治疗糖尿病、治疗结肠炎、提高免疫力等益生功能。本文主要讨论了脆弱拟杆菌的生理特性以及作为肠道益生菌所具有的功能,同时对其应用前景进行展望。以期为以后脆弱拟杆菌的筛选和应用研究提供参考。

发酵粕类替代鱼粉在水产养殖中的应用

粕类是主要的蛋白质饲料资源,可以缓解日益紧张的鱼粉资源需求,本文综述了微生物发酵对豆粕、菜籽粕、棉籽粕、花生粕等营养特性的影响,以及发酵粕类替代鱼粉在水产养殖中的应用。

一株嗜水气单胞菌噬菌体的分离鉴定与生物学特性

本试验以嗜水气单胞菌CVCC-4002为宿主从鲤鱼内脏中分离得到一株噬菌体,命名为BLCC16-001,用PEG8000浓缩、超速离心获得高纯度的噬菌体进行电镜观察。测定噬菌体宿主谱、最佳感染复数(MOI)、一步生长曲线、热稳定性、pH稳定性及噬菌体体外杀菌效果。结果表明:电镜下,噬菌体BLCC16-001头部直径约60 nm,尾部长约140 nm,还能够裂解4株嗜水气单胞菌,其最佳感染复数为0.0001。噬菌体BLCC16-001潜伏期为20 min,随后进入平台期,爆发量约为1000 PFU/cell;能够耐受60℃以下的温度,超过70℃会急剧失活;对酸碱均具有一定的抵抗力,在pH为4.0~10.0时稳定;在感染复数为0.1时,3 h对宿主菌杀菌率超过90%,感染复数为1时,3 h对宿主菌杀菌率超99%。噬菌体BLCC16-001是一株宽宿主谱的能够耐受一定温度和酸碱环境的肌尾科新型烈性噬菌体,对其研究可为嗜水气单胞菌噬菌体的研究提供理论基础。

酵母培养物高活性菌株的分离及发酵条件优化

酵母培养物是一种集营养和保健为一体的饲料添加剂,在畜牧生产中应用广泛。从土壤样品中分离纯化得到1株生物量较高的酵母菌BLNJ03,经16S r DNA鉴定为一株酿酒酵母。采用单因素和正交试验确定菌株BLNJ03的最佳发酵条件为:以液体深层发酵20 h菌株作种子液,固体发酵培养基为麸皮90%、玉米面3%、豆粕7%,料水比1∶0.7,初始p H值7.0,接种量6%,30℃有氧发酵48 h后厌氧发酵96 h。液体深层发酵与固体发酵相结合的两步两态法,好氧发酵与厌氧发酵相继进行,得到高活菌数、高营养成分及高消化率的酵母培养物。

植物提取物在水产饲料中的应用及作用机理研究

植物提取物具有天然、高效、资源丰富等优点,含丰富营养物质,蛋白质、氨基酸、糖类等;多种免疫活性物质,多酚、多糖、有机酸等;未知的促生长活性物质。文章就植物提取物在水产养殖中促生长、增强免疫、抗氧化、抗应激、提高繁殖性能等方面应用效果进行总结,并对机理进行阐述。

发酵饲料在养猪业中的应用研究

发酵饲料是利用现代食品发酵技术将配合饲料中部分植物性原料进行适度发酵加工的饲料制品,内含大量的益生菌和乳酸,在提高动物免疫力及促生长等方面效果显著。本文综述了发酵饲料的应用现状、作用机理,以期为其在猪生产中合理应用提供理论参考。

一株溶藻芽孢杆菌的分离筛选及菌株抗逆性研究

以铜绿微囊藻为研究对象,从富营养化养殖水体分离了一株高效溶藻细菌BLRZ-O26,通过16SrDNA序列比对,鉴定出该溶藻菌株为枯草芽胞杆菌属;BLRZ-026具有较高溶藻效率,对铜绿微囊藻最高溶藻率可达91.3%;该菌株具有较好的抗逆性,可耐高温、耐酸、耐盐,在生物溶藻方面具有广阔应用前景。

枯草芽孢杆菌发酵中药制剂对鲤鱼生长性能、生化指标、抗氧化指标及抗感染能力的影响

本试验旨在研究饲料中添加枯草芽孢杆菌发酵中药制剂对鲤鱼生长性能、血清生化指标、抗氧化指标及对嗜水气单胞菌抗感染能力的影响,并确定其适宜的添加水平。将枯草芽孢杆菌发酵中药制剂投喂初始体重为(35±0.5)g的鲤鱼,试验设6个组,添加水平分别为0(对照组)、0.1‰、0.5‰、1‰、2‰、3‰,每组30尾,设3个重复,试验周期56d。养殖试验结束后,腹腔注射嗜水气单胞菌进行感染试验,计算免疫保护率(RPS)。结果显示,饲料中添加枯草芽孢杆菌发酵中药制剂,鲤鱼增重率(WGR)、特定生长率(SGR)、肥满度(CF)、溶菌酶(LSZ)、补体3(C3)、总蛋白(TP)、总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)均不同程度提高,饲料系数(FCR)、丙二醛(MDA)含量不同程度降低,且当饲料中发酵中药添加量为2‰、3‰时,与对照组相比各指标(C3、碱性磷酸酶(ALP)和肌酐(Cr)除外)均差异显著(P<0.05)。用嗜水气单胞菌对鲤鱼感染试验结果表明,发酵中药可显著提高鲤鱼的抗感染能力,添加发酵中药2‰、3‰组免疫保护率可达77.23%和74.63%。可见,饲料中添加枯草芽孢杆菌发酵中药2‰、3‰能显著提高鲤鱼的生长性能、血清生化指标、肝脏抗氧化能力及抗嗜水气单胞菌感染能力。基于对添加成本的考虑,建议发酵中药的最佳添加剂量为2‰。

不同益生菌发酵中草药对鲤鱼生长性能及抗感染能力的研究

为研究不同益生菌发酵中草药对鲤鱼生长性能及抗感染能力的影响,本试验选用初始体重为(11.0±1.0)g的鲤鱼450尾,随机分为5组,每组30尾,设3个重复。Ⅰ组为对照组,饲喂基础日粮;Ⅱ组为中草药复方组;Ⅲ组为产朊假丝酵母发酵中草药组;Ⅳ组为枯草芽孢杆菌发酵中草药组;Ⅴ组为鼠李糖乳杆菌发酵中草药组。养殖56 d后,测定其生长指标,并腹腔注射嗜水气单胞菌进行感染试验,统计死亡率。同时采用硫酸-苯酚法测定中草药发酵前后多糖含量。结果表明:(1)与Ⅰ组相比,Ⅲ组、Ⅳ组增重率分别提高22.55%、14.29%(P<0.05),特定生长率分别提高13.53%、8.8%(P<0.05),饲料系数分别降低22.48%、14.59%(P<0.05),肥满度分别提高13.53%、9.1%(P<0.05),肾脏指数分别提高12.24%、12.24%(P<0.05);(2)Ⅲ组脾脏指数较Ⅰ组提高16.51%(P<0.05),各组间肝脏指数、存活率差异均不显著(P>0.05);(3)Ⅳ组死亡率分别较Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅴ组降低56.41%、54.05%、45.16%、45.16%(P<0.05),Ⅲ组、Ⅴ组死亡率较Ⅰ组、Ⅱ组分别降低20.51%、16.21%(P<0.05);(4)发酵48 h后,Ⅲ组、Ⅳ组多糖含量分别比对照组增加71.88%、46.09%(P<0.05),分别比Ⅴ组增加78.99%、52.12%(P<0.05)。由此可见,发酵中草药的最佳菌株为枯草芽孢杆菌,发酵中草药多糖含量显著增加,且提高了鲤鱼的生长性能及抗感染能力。

槲皮素抗菌活性的研究

以大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等为实验菌株,采用药敏纸片法考察槲皮素的抗菌活性。槲皮素对金黄色葡萄球菌的抗菌效果最好,最低杀菌浓度小于0.0061μmol.mL-1;对胶质芽孢杆菌抗菌效果次之,最低抑菌浓度小于0.0061μmol.mL-1;对大肠杆菌、苏云金芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌也有较为明显的抗菌效果,最低抑菌浓度分别为0.0242μmol.mL-1、0.0061μmol.mL-1、0.0485μmol.mL-1、0.0121μmol.mL-1,最低杀菌浓度分别为1.5522μmol.mL-1、6.2086μmol.mL-1、3.1043μmol.mL-1、1.5522μmol.mL-1;对人仓白杆菌无抗菌效果。槲皮素具有广谱抗菌性,并且对革兰氏阴性菌的抗菌作用强于革兰氏阳性菌。

1株禽大肠杆菌噬菌体的分离及杀菌效果评估

【目的】探索噬菌体作为控制养殖环境致病性大肠杆菌的新手段。【方法】本研究进行了大肠杆菌噬菌体的分离及相应指标评估。通过双层平板法从养殖环境中分离禽致病性大肠杆菌裂解性噬菌体。通过电镜及酶切鉴定、温度及酸碱稳定性、最佳感染复数、一步生长曲线及其在模拟环境中的杀菌效果对该噬菌体进行综合性评估。【结果】分离得到的噬菌体具有正多面体的头部和细而长的尾部结构,头部直径约98 nm,尾部长约123 nm,结合酶切鉴定结果初步判定该噬菌体为肌尾科双链DNA噬菌体。该噬菌体的温度耐受范围为37~50℃;酸碱耐受范围为pH 3.0~11.0。当感染复数为0.00001时产生的子代噬菌体滴度最高;一步生长曲线测定结果显示,该噬菌体潜伏期为20~40 min,裂解时间为80~100 min,裂解量为4133 PFU/cell。从该噬菌体对模拟环境中宿主大肠杆菌的杀菌效果可看出,浓度为1×10^(4)~1×10^(6) PFU/mL的噬菌体ФECP2-1对液体中目标大肠杆菌作用1~6 h,杀菌率均在99.9%以上;浓度为2×10^(4)~2×10^(6) PFU/g的噬菌体ФECP2-1对鸡粪中目标大肠杆菌作用5~10 h,杀菌率均在99%以上,该噬菌体对鸡粪中目标大肠杆菌杀菌效果略低于对液体中目标大肠杆菌的杀菌效果。【结论】ФECP2-1符合噬菌体类消毒剂相关特征,是一株具有良好应用前景的噬菌体,可作为一种生物消毒剂应用于养殖环境中禽大肠杆菌的防控。

甘蔗渣固态发酵方式研究

本研究目的在于通过固态发酵方式,有效利用甘蔗渣中的营养成分,使其转化为蛋白质等利于动物吸收的营养物质。利用黑曲霉和产朊假丝酵母两种菌种,通过单菌株发酵和混合菌株发酵两种发酵方式,分别比较其发酵前后甘蔗渣中粗蛋白、粗纤维及多酚的含量变化,以比较筛选适合的发酵方式。本研究采用产朊假丝酵母和黑曲霉混合发酵甘蔗渣及麸皮混合物,可有效提高粗蛋白含量由19.41%升高至26.56%,显著提高多酚含量。没食子酸当量由2.51 mg/g升高至10.65 mg/g,粗纤维含量略有降低,由26.65%降至24.71%。因此,在此试验条件下,混合菌株发酵优于单一菌株发酵。

1株水产用抑菌菌株的筛选鉴定及性质研究

试验从鲫鱼肠道中分离筛选得到1株具有抑菌活性的菌株YJ4,菌株YJ4发酵液对嗜水气单胞菌、哈维氏弧菌、溶藻弧菌、副溶血弧菌、维氏气单胞菌均具有较强抑菌作用,分析其形态特征、生理生化特征、16S rDNA序列以及系统发育进化。结果显示:菌株YJ4与枯草芽孢杆菌的同源性最高达99%,鉴定为枯草芽孢杆菌;性质研究发现,枯草芽孢杆菌YJ4菌液具有耐酸、耐盐、耐高温特性,对鱼体无毒害作用。研究表明,试验分离筛选得到的枯草芽孢杆菌YJ4对水产常见病原菌有抑制效果,耐受性能强,适用于添加至水产饲料制备颗粒料,可作为水产微生态制剂使用。

复方中草药对鲤鱼生长、生化及抗病力的影响

试验旨在研究复方中草药对鲤鱼生长指标、生化指标及抗病力的影响。选取平均体重为(55±5)g的健康鲤鱼,随机分为4组(对照组、中草药复方Ⅰ、中草药复方Ⅱ、中草药复方Ⅲ),每组2个重复,每个重复16尾鱼,试验周期为42 d。结果表明,添加中草药复方Ⅱ组效果最好,且溶菌酶活力显著高于对照组(P<0.05)。用嗜水气单胞菌对鲤鱼进行攻毒试验的结果表明,添加中草药复方Ⅱ可以显著降低鲤鱼的死亡率(P<0.05),比对照组免疫保护率提高50%。

噬菌体裂解酶在大肠杆菌中的重组表达研究进展

噬菌体裂解酶在治疗细菌性疾病方面具有诸多优势,如细菌不产生抗性、裂解谱更宽、特异性强不影响机体内正常菌群平衡等。近年来,噬菌体裂解酶在工程菌株中的异源表达成为研究热点。本文就噬菌体裂解酶在大肠杆菌中的重组表达研究及纯化蛋白抑菌杀菌效果进行综述,以期为噬菌体裂解酶在原核表达系统中进行基因重组及蛋白表达的深入研究及应用提供一定的参考。

酵母培养物促水产动物生长机理研究进展

酵母培养物是近年来兴起的集营养与保健为一体的绿色饲料添加剂,它营养丰富,在水产养殖中对水产动物促生长作用显著。文章就酵母培养物促水产动物生长机理进行了阐述,以期为酵母培养物在水产养殖中大规模推广应用提供理论依据。

酵母培养物对鲤生长指标及消化指标的影响试验

酵母培养物是在一定的工艺条件控制下，由酵母菌在特制培养基上经过充分发酵后形成的复合型发酵产品，富含氨基酸、维生素、矿物质、消化酶、促生长网子、有机酸、寡糖等物质，是集营养与保健为一体的饲料添加剂。其在维持消化道内环境稳定，促进胃肠道功能正常，提高饲料中营养物质消化率，进而增强动物免疫力和抗病力，改善动物生产性能等方面效果显著。笔者开展了酵母培养物对鲤生长指标及肠道消化指标的影响试验，旨在为实际应用提供理论基础。

一种生物复合型增氧剂的开发及应用

将无水碳酸钠与30％过氧化氢按照1．1（m／v）的比例采用喷雾的方法进行混合，得到基础增氧剂过碳酸钠，并将一株具有较好氨氮降解能力的菌株按照一定比例及方法添加到增氧剂中，采用糊精作为粘合剂制成的生物复合型增氧剂，具有良好的增氧及降氨氮效果。动物实验结果显示使用该增氧剂的实验组鱼类窒息死亡率可由空白组的88．57％降低为15．71％，养殖后水体氨氮由8．75m班降为2．82mg/L。菌剂与增氧剂复合之后没有明显的相互抑制现象，而且具有促进氨氮降解的作用。