融合蛋白IFN-IgGFc在乳酸乳杆菌中的表达及其生物学活性研究

用乳酸菌表达有药用价值的生物学活性多肽,是当前国际上的研究热点之一,对开发新的功能性食品具有广阔的前景。本文应用PCR方法将人干扰素IFN-α-2b基因与IgGFc基因连接,并引入一段柔性连接肽,构建了融合蛋白基因IFN-IgGFc,将融合蛋白基因克隆到原核表达载体pSC111AE中,转化乳酸乳杆菌ATCC393进行诱导表达及鉴定,并研究了融合蛋白的生物学活性。结果表明,通过Western-Blot方法在表达上清液检测出干扰素融合蛋白,ELISA测定表明两段多肽能够保持各自的构象,基因工程乳酸菌表达的上清液可以诱导WISH细胞产生明显的抗VSV病毒的活性,其活性为1.71×103IU/ml。本文首次构建并在大肠杆菌和乳酸菌表达了IFN-IgGFc融合蛋白,获得了能产生人干扰素的乳酸菌株,为基因工程乳酸菌及相关药物的开发研究奠定了基础。

人干扰素α-2b基因在德氏乳杆菌的表达与鉴定

目的 :试图用乳酸杆菌在局部分泌干扰素 ,以达到预防和治疗病毒感染。方法 :以 pBLUE/IFNα 2b为模板 ,采用PCR技术将IFNα 2b基因扩增然后插入乳酸菌表达载体 pSC111AE ,将重组质粒电转德氏乳杆菌DM 890 9,获得重组菌株。在含乳糖的MRS培养基培养并诱导表达 ,表达产物分泌到菌液上清。结果 :分别用PCR和ELISA鉴定目的基因和表达产物 ,利用WISH VSV系统采用细胞病变抑制法 ,测定表达产物IFNα 2b的抗病毒活性 ,平均效价为 1 4 1× 10 5IU/ml。结论 :本研究为以乳酸杆菌为载体在局部产生治疗性药物奠定了基础。

应用核酸适配子检测细胞因子的新方法-ELONA法

以人肿瘤坏死因子 (Humantumornecrosisfactor,hTNF α)特异性的核酸适配子为检测分子建立了酶联寡聚核苷酸吸附试验 (Enzyme linkedOligonucleotideassay ,ELONA)方法 ,用于hTNF α的检测。通过SELEX(SystematicEvolutionofLigandsbyExponentialEnrichment)方法从随机RNA库中筛选到与hTNF α特异结合的RNA适配子。根据其序列 ,用体外转录方法合成生物素标记的RNA适配子 ,并对其进行了氨基修饰以增加其稳定性。以hTNF α的单克隆抗体为捕获分子 ,生物素标记的hTNF α特异性RNA适配子为检测分子建立了ELONA方法 ,并对这种检测方法的灵敏度、精密度和准确度等进行了分析。同时用ELONA和ELISA方法检测了正常人血清中的hTNF α水平 ,并对检测结果进行比较。结果显示 ,ELONA方法的灵敏度为 10 0pg mL ,具有较好的精密度和准确度。ELONA法的检测结果与ELISA法检测结果基本一致。该方法适用于血清。

与细胞因子特异结合的寡聚核苷酸适配子及其在诊断和治疗中的应用

寡聚核苷酸适配子 (Aptamer)是用指数富集式配基系统进化方法 (SELEX )筛选出的寡聚核苷酸 ,它能与靶分子特异性结合 ,具有识别和抑制靶物质生物学活性的作用。将体外筛选到的寡聚核苷酸适配子作为在动物或人体内应用的药剂 ,还需要进行化学修饰来提高它的生物利用度和在血浆中的稳定性。 2 氟、2′ 烷氧基或 2′ 氨基修饰可以提高适配子的稳定性 ,使适配子的体外半衰期延长 ;5′端交联一个高分子量的PEG分子或脂质体分子 ,可以使它的血浆清除率由 1小时提高到几小时至 1天。修饰后仍保持生物学活性的适配子可用于治疗相应靶细胞因子引起的疾病。目前 ,国内外已经筛选到了十几种细胞因子的适配子 ,其中血管内皮生长因子已经用于临床疾病的治疗。除了用于临床治疗外 ,适配子还可以用于细胞因子的诊断 ,凡是涉及抗体的诊断领域 ,几乎都可以用寡聚核苷酸适配子代替。应用大规模机械化筛选技术 ,可以在短期内筛选到大量的高特异性、高亲和力适配子 。

五香兔肉肠的研制

在传统猪肉灌肠制作的基础上，按一定比例加入兔肉、卡拉胶、变性淀粉，采用现代西式灌肠加工新工艺制作的五香兔肉肠，不仅营养丰富、风味独特，而且出品率高，为肉兔养殖与深加工开辟了一条新渠道，通过成本核算，经济前景较好。

新工艺对半干牛肉制品营养的影响

本实验以牛肉半干制品为研究对象，比较新、旧工艺对半干牛肉制品营养成分的影响。结果表明：新工艺有效的保存了牛肉原来特有的风味。新工艺的水分含量比旧工艺的高；新工艺加工后的半干牛肉制品pH值比旧工艺的低；蛋白质营养价值比旧工艺制品有所提高，感官评分明显高于旧工艺加工后的半干牛肉制品。

全牛肉乳化香肠的研制

香肠是肉类制品中的一个有代表性的品种，深受人们的喜爱。由于多采用猪肉为原料加工，产品在少数民族地区的生产和消费受到一定限制。为此本课题对全牛肉乳化香肠工艺过程进行了研究，并采用正交试验法对工艺条件进行探索，以解决牛脂口感和乳化性不佳的问题。结果表明：牛肉在低温下腌制３６ｈ，脂肪添加量１７．３３％，水温＞９０℃时，搅拌３ｍｉｎ，低温成熟３ｈ，乳化内斩拌４ｍｉｎ，在６０℃下烘烤３０ｍｉｎ，８２—８５℃煮制４５～５０ｍｉｎ，在５０～５５℃烟熏４０ｍｉｎ为最佳工艺条件，适合工业化生产。

药物经济学对临床药学的指导作用

目的：介绍药物经济学的基本理论与研究方法。方法：对近１０年来国内外药物经济学研究进展进行概述，并结合本地实践阐述了其对临床药学的指导作用。结果：药物经济学评价对临床药学具有重要指导意义，指出高效、安全、经济为临床合理用药三大原则。结论：据此，临床医师可制定出更合理的费用效果药疗方案。可以最低的费用获取最佳医疗效果。

急性脑血管病患者血清甲状腺素水平的变化及其意义

对７０例急性脑血管病患者进行血清甲状腺素（Ｔ３、Ｔ４、ｒＴ３）及促甲状腺激素（ＴＳＨ）检测。结果显示：急性脑血管病患者的血清Ｔ３明显降低，ｒＴ３升高，Ｔ３随病情好转而渐趋正常；血清Ｔ４、ＴＳＨ下降，与对照组比较不显著；血清Ｔ３、Ｔ４均降低者预后不良。

红肠辐照保鲜的研究

本试验对真空包装的红肠进行辐照处理,结果表明,辐照可大大降低细菌总数,延长产品的保存期,在4℃条件下贮存13周仍有较高的感官可接受性,但辐照会影响产品的颜色,使红肠颜色发暗。

智能简易速检表在60岁以上人群中的常模研究

目的探讨智能简易速检表（ＭＩＦＥ）６０岁以上人群在山东地区的常模。方法用ＭＩＦＥ对山东省胶州市１５４９例６０岁以上正常人进行测试。结果ＭＩＦＥ总分在不同年龄、性别、文化程度之间存在差异性（Ｐ＜０．０１）。６０～６９岁组男性：文盲≤２２，小学≤２３，初中≤２５，女性：文盲≤１５，小学≤２０，初中≤２１；６９岁以上组男性：文盲≤１７，小学≤２０，初中≤２５；女性：文盲≤１２，小学≤２０为异常。结论对不同年龄、性别、文化程度取不同的阳性标准更为合理。

三联疗法治疗急性缺血性脑血管病64例疗效分析

我院使用甘露醇、706代血浆(或低分子右旋糖酐,简称低右)、维脑路通联合治疗(又称“三联”疗法)急性缺血性脑血管病患者64例,与其它疗法进行回顾性对比分析,以探求该“三联”疗法在该病治疗中的价值。 1 临床资料 1.1

胃石症与粪石症

在胃内形成的食物或物品结块称"胃石";胃内结块排到肠道后或于肠道内形成的结块称为"粪石"(亦称肠石),属于消化道异物的范围,即消化道内形成性异物。由胃石或粪石引起的疾病称胃石症或粪石症。以往认为此病国内少见,近些年报道日多,说明此症国内并非罕见。特别在盛产黑枣、柿子等水果的北方地区。因此加强对本病的认识。

急性脑血管病甲状腺素含量检测

急性脑血管病甲状腺素含量检测高绪文李继莲（青岛市胶州中心医院山东胶州２６６３００）据报道，许多非甲状腺疾病存在甲状腺素水平的变化〔１～３〕。我们对７０例急性脑血管疾病病人血清甲状腺素（Ｔ３，Ｔ４）、促甲状腺激素（ＴＳＨ）含量进行了检测，发现其变化与病...

卡介苗与潘生丁联合抗HBV作用的研究

目的探讨乙肝新疗法与ＢＣＧ、潘生丁联合抗ＨＢＶ的作用。方法选择ＨＢｅＡｇ阳性乙肝病人５１２例，１∶２０００ＯＴ试验局部红肿、硬结＜７ｍｍ者，于三角肌外侧皮内注射卡介苗（ＢＣＧ）０．１ｍｌ，每月１次。同时口服潘生丁５０ｍｇ，２次／ｄ，连用４～８个月，治疗前后进行肝功、乙肝５项标志物检测。结果症状体征改善多优于９０例的对照组。ＨＢｓＡｇ阴转率和ＨＢｓＡｂ阳转率：治疗组分别为５．４７％与８．２０％；对照组为５．５６％与９．８６％，差异无显著性。ＨＢｅＡｇ阴转率与ＨＢｅＡｂ阳转率：治疗组分别为６０．３５％与３１．６２％；对照组分别为１３．３３％与１２．９９％，差异非常显著（Ｐ＞０．０１）。结论研究结果提示两药联用有协同抗ＨＢＶ作用，从而达到可靠地控制ＨＢＶ和改善肝功能效果，而无严重不良反应发生。

手消毒设施的革新

1 革新的目的及意义 1.1 目的 我院在实施医院感染的管理中,使用过氧乙酸消毒效果好,价格又便宜。但是,其重要特性为易挥发,消毒容器必须加盖,但在洗手消毒后仍需用手启闭盖子而造成新的污染。我们对手消毒设施进行了革新改进。研制成了脚踏式手消毒器(JT91—1型),经6年来使用,效果极佳。 1.2 意义 脚踏式手消毒器,加盖后可防止过氧乙酸的挥发,保持有效消毒浓度。脚踏启动盖子,消毒后移去脚即可自动闭盖,避免了用手启闭盖子造成新的污染。且结构简单,美观实用,价格便宜。 2 脚踏式手消毒器的构造及监测结果 2.1 洗手盆盖为铝合金制成,表面使用防腐喷塑工艺;支架为空心钢管,表面为防腐喷塑工艺;洗手盆为全塑式;钢丝传动。

男性乳腺癌1例临床与病理分析

1 病历摘要 患者男,42岁。左侧乳腺发现乳头溢液伴无痛性包块一个月,头昏、头痛,于1995年6月7日就诊。查体:左侧乳腺外上象限触及一核桃大小包块,质地较硬、固定、无压痛。在同侧腰部查见高出皮肤肿物0.5cm,肿物大小如花生米,质地硬固定。血常规大致在正常范围,手术单纯切除包块。