重组酶聚合酶扩增结合侧向流动试纸条技术快速可视化检测嗜麦芽窄食单胞菌方法的建立与应用

目的:建立一种基于重组酶聚合酶扩增(recombinant polymerase amplification,RPA)和侧向流动试纸条(lateral flow strips,LFS)的嗜麦芽窄食单胞菌快速可视化检测方法。方法:以嗜麦芽窄食单胞菌特异性序列(NC_010943.1)为模板,设计RPA引物。通过基础型RPA反应和琼脂糖凝胶电泳,根据候选引物对的扩增性能及引物二聚体的形成情况筛选最佳引物对。根据最佳引物对,设计探针和修饰引物。在引物和探针中引入碱基错配以消除假阳性信号,建立RPA-LFS反应体系。根据检测线的显色情况,优化RPA-LFS的最佳反应条件。使用临床常见的12种致病菌和12个临床来源的嗜麦芽窄食单胞菌检测该方法的特异性。以10倍梯度稀释的嗜麦芽窄食单胞菌基因组为模板,检测该方法的灵敏度。收集108例临床样本,将该方法与qPCR检测法和生化培养法对比,对RPA-LFS检测法进行kappa一致性检验及临床应用评价。结果:RPA-LFS检测法在37℃恒温条件下8 min即可完成扩增反应,1 min内可在LFS上观察到结果。该方法灵敏度高,最低检出限为1.107 CFU,并且与其他病原菌无交叉反应,特异性强。应用于临床样本检测时,该方法与qPCR相比,检测结果准确性一致。与生化培养方法的符合率为99.07%,kappa指数值为0.972,具有良好的一致性。结论:本研究建立了一种不依赖于精密仪器和专业技术人员的RPA-LFS检测方法,能够短时间内精准鉴定嗜麦芽窄食单胞菌。该方法的建立可为及时制定合理的抗菌治疗方案提供信息,具有较大的临床应用潜力。

大艾段温针法治疗肾虚肝郁型弱精子症临床研究

目的观察大艾段温针灸法治疗肾虚肝郁型弱精子症的临床疗效及对精液常规、精浆生化、性激素水平的影响。方法将纳入病例随机分为观察组、药物组、常规温针组、普通针刺组,每组各35例,观察组使用大艾段温针灸法,采用4 cm艾段,药物组应用硫酸锌片、维生素E软胶囊、五子衍宗丸,常规温针组采用2.5 cm艾段,普通针刺组常规针刺,不用灸法。各组均4周为1个疗程,共治疗2个疗程。观察4组治疗前后中医证候积分、精液常规、精浆生化以及性激素水平变化情况。结果观察组、药物组疗效均优于普通针刺组(P<0.05)。中医证候积分(情绪低落、记忆力下降、精液清冷)改善方面,观察组优于其他3组(P<0.05~0.01)。4组精子活率、a级精子、a+b级精子均较治疗前升高(P<0.05~0.01),4组的精子畸形率均较治疗前下降(P<0.01);畸形率、a级精子、a+b级精子方面,观察组均优于其他3组(P<0.05~0.01),精子活率方面,观察组优于常规温针组、普通针刺组(P<0.01)。4组的精浆果糖、中性α-葡萄糖糖苷酶及药物组精浆锌含量均较治疗前升高(P<0.01),在精浆果糖、中性α-葡萄糖糖苷酶方面,观察组均优于其他3组(P<0.01)。4组的睾酮、促黄体生成素、促卵泡生成激素均较治疗前升高(P<0.05~0.01);睾酮方面观察组优于药物组(P<0.01),促黄体生成素、促卵泡生成激素方面,观察组均优于其他3组(P<0.05~0.01)。结论大艾段温针灸法治疗肾虚肝郁型弱精子症疗效较好,可显著改善中医临床症状、精液常规、精浆生化以及性激素水平相关指标。其作用机制可能与调节性激素水平相关。

大艾段温针灸法治疗肾虚肝郁型弱精症的临床效果

目的:探讨大艾段温针灸法治疗肾虚肝郁型弱精症的临床疗效。方法:选取2018年1月至2019年12月课题病例招募组的肾虚肝郁型弱精症患者140例作为研究对象,按照随机数字表法随机分为观察组,药物对照组,常规温针对照组和普通针刺对照组,每组35例。观察组使用4 cm大艾段进行温针灸,药物组服用硫酸锌片、维生素E软胶囊、五子衍宗丸,常规温针组选用2.5 cm艾段,普通针刺组常规针刺,不加灸。各组均4周为1个疗程,2个疗程后分析4组中医证候、精液常规、精浆生化、性激素水平变化情况。结果:观察组疗效优于普通针刺组(P<0.05);药物组精液量优于观察组(P<0.05);观察组畸形率、a级精子、a+b级精子优于其他3组(P<0.05);观察组精子活率优于常规温针组、普通针刺组(P<0.05)。观察组精浆果糖、中性α-葡萄糖苷酶优于其他3组(P<0.05)。观察组睾酮优于药物组(P<0.05);观察组促黄体生成素、促卵泡生成激素优于其他3组(P<0.05)。结论:大艾段温针灸法治疗肾虚肝郁型弱精症疗效肯定,在改善精液常规、精浆生化指标、性激素水平相关参数方面,优于常规温针灸、普通针刺、药物,作用机制可能与调节性激素水平有关。

大艾段温针灸治疗肺气虚寒型变应性鼻炎100例

目的观察大艾段温针灸治疗肺气虚寒型变应性鼻炎(AR)的疗效并探索其作用机制。方法将入选病例随机分为观察组、对照组各105例。观察组大艾段温针灸,每日1次,每周治疗4次,4周为1个疗程。对照组急性期丙酸氟替卡松鼻喷雾剂喷鼻,枸地氯雷他定片口服。病情稳定后,枸地氯雷他定片停药,丙酸氟替卡松鼻喷雾剂继续喷鼻。4周为1个疗程。观察2组治疗结束时及治疗后30d的中医证候总积分、西医临床症状总积分、体征总积分、视觉模拟评分法(VAS评分)以及血清免疫球蛋白E(IgE)、白细胞介素-4(IL-4)、γ干扰素(IFN-γ)水平的变化。结果治疗后2组中医证候总积分、临床症状总积分、体征总积分以及鼻部整体症状的严重程度VAS评分均明显低于同组治疗前(P<0.01),观察组明显低于对照组(P<0.05~0.01);血清3项指标,组内及组间差异均具有统计学意义(P<0.01)。治疗结束后30d随访,观察组疗效优于对照组(P<0.05);2组中医证候总积分、临床症状总积分、体征总积分以及鼻部整体症状的严重程度VAS评分均明显低于同组治疗前(P<0.01);观察组明显低于对照组(P<0.05~0.01);血清3项指标,IFN-γ含量,对照组治疗结束后30d与治疗前比,差异无统计学意义(P>0.05),其余各组内、组间3项指标比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论大艾段温针灸法治疗肺气虚寒型变应性鼻炎的疗效较好,可显著改善患者的中医证候、临床症状、体征、VAS评分,在调节血清IgE、IL-4、IFN-γ含量方面优于对照组,作用机制可能也与降低血清IgE、IL-4含量,升高IFN-γ含量相关。

大艾段温针灸法治疗弱精症肾虚肝郁型疗效观察

目的评价大艾段温针灸法治疗弱精症肾虚肝郁型的疗效及对中医症状、精液常规、精浆生化的调节作用。方法选择2018年3月—2019年12月来南京中医药大学连云港附属医院课题病例招募组治疗的140例弱精症肾虚肝郁型患者,随机分为观察组、药物组、常规温针组、普通针刺组,每组35例。观察组使用4 cm艾段行温针灸治疗,药物组采用维生素E软胶囊、硫酸锌片、五子衍宗丸治疗,常规温针组应用2.5 cm艾段行温针灸治疗,普通针刺组只针不灸。4组均以4周为1个疗程,治疗2个疗程后观察4组中医症状积分、精液常规指标、精浆生化指标变化情况,统计4组临床疗效。结果治疗后4组患者中医症状总积分均显著降低(P均<0.05),但4组间比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。治疗后4组患者的精子活率、a级精子率、a+b级精子率、精浆中果糖和中性α-葡萄糖糖苷酶含量及药物组的精液量、精浆中锌含量均明显高于治疗前(P均<0.05),精子畸形率均明显低于治疗前(P均<0.05);且观察组a级精子率、a+b级精子率、精浆中果糖和中性α-葡萄糖糖苷酶含量均明显高于其他3组(P均<0.05),精子活率明显高于常规温针组、普通针刺组(P均<0.05),精子畸形率均明显低于其他3组(P均<0.05)。观察组和药物组总有效率均明显高于普通针刺组(P均<0.05),其余各组间疗效比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论大艾段温针灸法治疗弱精症肾虚肝郁型患者疗效肯定,在降低精子畸形率,提高a级精子率、a+b级精子率、精浆中果糖和中性α-葡萄糖苷酶含量方面效果优于药物疗法、常规温针法和普通针刺法。

关于不同分期梅毒患者IL-6浓度的变化及临床意义

分析梅毒螺旋体(treponema pallidum,TP)感染患者,血清白细胞介素6(IL-6)浓度变化及临床意义。方法 选取 2021.5~2022.5至连云港市第二人民医院就诊的梅毒患者80例作为试验组,至我院体检中心就诊的健康人群80例作为对照组,分别收集血清。采用化学发光法检测IL-6表达水平。分析血清IL-6水平对梅毒感染的临床诊疗意义。结果 Logistic回归分析,IL-6对梅毒感染的严重程度具有影响(OR=0.930,95%CI:0.805-0.996,P=0.030;OR=0.950,95%CI:0.863-0.905,P=0.045)。血清IL-6浓度在梅毒显性感染组明显高于隐性感染组(P<0.001),区分梅毒隐性和显性感染的ROC曲线下面积(areas under the ROC curve,AUC)为0.77,当Cut-Off值为3.93时,诊断特异性为71.90%,敏感性为77.10%。结论 血清IL-6在连云港地区的梅毒患者中呈高表达,并且,随着疾病的发展,IL-6水平逐渐增加,血清IL-6表达改变与梅毒分期相关性显著。

重组聚合酶等温扩增-侧流层析试纸条检测技术在诊断病原微生物中的应用研究进展

重组聚合酶等温扩增(RPA)技术是新开发的具有高灵敏度、高特异性的等温扩增技术,将RPA与侧流层析试纸条检测(LFS)技术相结合,可快速鉴别目的基因。迄今为止,RPA-LFS技术已广泛运用于医药、食品、植物学等领域。本文将对RPA-LFS技术在病原微生物中的诊断进行综述,为实现病原微生物的即时诊断提供参考。

不同长度艾段温针灸治疗神经根型颈椎病气滞血瘀证:随机对照试验

目的:比较不同长度艾段温针灸治疗神经根型颈椎病气滞血瘀证临床疗效。方法:将600例神经根型颈椎病气滞血瘀证患者随机分为4组:4 cm组(150例,脱落5例、中止2例)、3 cm组(150例,脱落6例、中止2例)、2 cm组(150例,脱落6例)和常规针刺组(150例,脱落6例)。4 cm组采用4 cm艾段温针灸治疗,3 cm组采用3 cm艾段温针灸治疗,2 cm组采用2 cm艾段温针灸治疗,常规针刺组仅予针刺治疗,取穴均为大椎及双侧夹脊穴(C_(5)、C_(7))、风池、肩贞、曲池、中渚等,每天1次,每周治疗5次,两周为一疗程,共治疗2个疗程。分别于治疗前后比较各组患者中医证候评分、临床症状评价量表(CASCS)评分、患侧臂丛神经牵拉试验评分及患侧上肢神经(尺神经、正中神经和桡神经)F波出现率和传导速度,测定各组患者治疗前后血清炎性因子[白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和超敏C反应蛋白(hs-CRP)]含量,并评定各组临床疗效。结果:治疗后,各组患者中医证候评分中颈部疼痛、活动受限、上肢麻痛评分及总分,臂丛神经牵拉试验评分均较治疗前降低(P<0.01,P<0.05);CASCS评分中主观症状、适应能力评分及总分均较治疗前升高(P<0.01,P<0.05)。治疗后,4 cm组中医证候评分中颈部疼痛、活动受限评分及总分低于其他3组(P<0.05,P<0.01),CASCS评分中主观症状、适应能力评分及总分高于其他3组(P<0.05,P<0.01),臂丛神经牵拉试验评分低于常规针刺组(P<0.05)。治疗后,各组患者正中神经、桡神经F波出现率及传导速度均较治疗前升高(P<0.05,P<0.01),4 cm组桡神经F波出现率及传导速度高于其他3组、正中神经F波出现率及传导速度高于常规针刺组(P<0.05)。治疗后,各组患者血清IL-1β、IL-6、TNF-α含量均较治疗前降低(P<0.01,P<0.05),4 cm组IL-6含量低于其他3组、TNF-α含量低于常规针刺组(P<0.05)。4 cm组总有效率为78.3%(112/143),高于3 cm组(67.6%,96/142)、2 cm组(65.3%,94/144)和常规针刺组(53.5%,77/144,P<0.05)。结论:4 cm长度艾段温针灸可有效改善神经根型颈椎病气滞血瘀证的临床症状,提升上肢神经功能,减轻神经压迫造成的炎性反应,临床疗效优于3 cm、2 cm长度艾段温针灸和常规针刺。

不同长度艾段温针灸治疗肾虚肝郁型弱精症:随机对照试验

目的:探讨不同长度艾段温针灸治疗肾虚肝郁型弱精症的临床疗效。方法:将240例肾虚肝郁型弱精症患者随机分为4 cm组(4 cm艾段温针灸组,60例,脱落3例)、3 cm组(3 cm艾段温针灸组,60例,脱落4例)、2 cm组(2 cm艾段温针灸组,60例,脱落2例)和针刺组(60例,脱落3例)。各组患者均穴取中脘、关元、中极、归来、腰阳关、关元俞等分别进行不同长度艾段温针灸和常规针刺治疗,每日1次,每周治疗5次,4周为一疗程,共治疗2个疗程。比较各组患者治疗前后精液常规、精浆生化指标及性激素水平、中医证候评分。结果:治疗后,4 cm组、3 cm组患者精子密度、精子活率、a级精子比例、a+b级精子比例、精浆果糖及中性α-葡萄糖苷酶含量均较治疗前升高(P<0.05,P<0.01),精子畸形率较治疗前降低(P<0.01,P<0.05);4 cm组患者a级精子比例、a+b级精子比例、精浆果糖及中性α-葡萄糖苷酶含量高于其他3组(P<0.05,P<0.01),精子畸形率低于其他3组(P<0.05)。治疗后,除头昏耳鸣评分外,4 cm组、3 cm组患者各项中医证候评分及总分均较治疗前降低(P<0.01,P<0.05);4 cm组患者情绪低落、腰膝酸软、性功能低下评分及总分均低于其他3组(P<0.05,P<0.01)。4 cm组总有效率为87.7%(50/57),高于3 cm组、2 cm组、针刺组的78.6%(44/56)、77.6%(45/58)、70.2%(40/57,P<0.05,P<0.01)。结论:4 cm艾段温针灸可有效提升肾虚肝郁型弱精症患者精子质量和活力,改善临床症状,疗效优于3 cm、2 cm艾段温针灸和常规针刺治疗。