黑素皮质素受体1(MC1R)基因与VC-獭兔毛色关系的研究

为研究黑素皮质素受体(Melanocortin1receptor,MC1R)基因对獭兔毛色的影响,本试验采用RT-PCR技术克隆了MC1R基因的cDNA片段,发现MC1R基因长951bp,编码317个氨基酸的前体蛋白,蛋白质PI为9.26,分子量36.28ku,具有7个跨膜结构域,与其他动物MC1R蛋白性质相符。其氨基酸序列经同源性比对结果显示:其与牦牛,马、绵羊、骆驼、牛等哺乳动物的同源性均高于93%,有14个突变频率较高的位点,其中第42、82、176、18、185位点为VC-獭兔特异性突变位点,表明该序列在哺乳动物中较为保守。但这些突变位点均发生极性、亲水疏水性等变化,这些突变可为进一步探测不同群种间的MC1R基因及该基因与獭兔毛色的关系提供理论依据。

太原地区鸡源性大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析

为调查太原市周边地区鸡源大肠杆菌(E.coli)的流行情况,本研究从规模化养鸡场采集患腹泻病鸡的粪便样品进行E.coli分离、血清型鉴定及耐药性检测,通过接合试验检测质粒在抗生素抗性水平转移中的作用。结果表明:分离到81株E.coli属于15种不同血清型,其中28株属于5种优势血清型,即O1、O8、O78、O84和O143;所有分离菌株对13种抗菌药物均有不同程度的耐药性,其中qnrA、tetM、tetA、sul2、strA、aadA、floR为检测到的主要耐药基因;分离菌株质粒携带的7种耐药基因可通过接合作用转移。该研究结果证明E.coli对常用抗生素的耐药已普遍存在,其携带的耐药基因可通过接合作用在细菌之间传递。

复方妥曲珠利缓释微囊的药效试验

为了探讨复方妥曲珠利缓释微囊对鸡球虫病的治疗效果及给药方案,确定首次给药剂量和给药频率。在鸡感染柔嫩艾美耳球虫后第3天(粪便变稀)开始给药,于饮水中添加复方妥曲珠利缓释微囊,期间分别以不同频率给予每组鸡药物,各组鸡给药总量相同。以抗球虫指数(ACI)、相对增重率、病变值等指标进行药效学考察研究。试验结果表明,与感染不给药组相比,各给药治疗组ACI均极显著(P<0.01);试验期间给药3次和2次组治疗效果均可达到高效抗球虫效果;发病后2次给药,且首次剂量加倍组抗球虫指数可达188.14,高于其它给药组的ACI(179.03、182.50、175.98),相对增重率达到90.80%,病变值为2.67,治疗效果显著,可作为最佳的推荐给药方案。

乳酸菌对鸡免疫功能的影响

本试验探讨乳酸杆菌(LL)、嗜酸杆菌(LA)、乳酸链球菌(SL)制成的微生态活菌制剂对鸡免疫功能的促进作用。利用制成的微生态活菌制剂给肉鸡饮水,在7日龄和21日龄进行两次新城疫疫苗免疫,检测免疫相关指标。结果显示:试验组的新城疫血凝抑制效价(HI)高于对照组,且抗体在体内持续时间较长;脾脏、胸腺、法氏囊重量及其指数在3W、5W、7W均不同程度高于对照组,且在3W各指数差异极显著,在5W脾脏指数差异极显著,胸腺指数差异显著,法氏囊指数差异不显著,在7W脾脏指数差异显著,胸腺、法氏囊指数差异不显著;试验组血清免疫球蛋白含量高于对照组,IgG水平明显高于对照组,差异显著。

霍阿基亚型羊驼显性白毛调控基因外显子2的克隆与序列分析

羊驼作为一种高品质毛皮经济动物,对其毛色的研究可以为提高羊驼经济价值提供理论依据。本试验应用RT-PCR技术克隆羊驼显性白位点基因(KIT)第2外显子(exon2),并与其他动物相应区域进行同源性比较,结果发现其序列与牛和山羊的同源性较高,可达到96%,其编码的氨基酸更高,达98%;而与人和家鼠的同源性较低,只有78%和57%。该研究结果为加快霍阿基亚型羊驼育种进展提供了理论依据。

猪、牛和兔粪中致病性大肠杆菌LEE毒力岛的检测分析

畜禽粪便中含有大量微生物,在发生传染性疾病时,粪便常常会成为重要的传染源。通过从种猪场、奶牛场和种兔场粪便中分离鉴定致病性大肠杆菌,并对分离到的大肠杆菌进行LEE毒力岛上eaeA基因的PCR检测,鉴定出含有LEE毒力岛大肠杆菌,调查携带LEE毒力岛的大肠杆菌在猪、牛和兔粪便中的存在情况。实验结果表明,猪、牛、兔粪便样品中携带LEE毒力岛的大肠杆菌检出率分别为12.9%、14.0%、22.5%。eaeA阳性的大肠杆菌应是导致仔猪、10日龄以内的初生犊牛和兔场断奶后幼兔发生腹泻症的主要细菌性病原。LEE毒力岛的检测能够作为大肠杆菌的诊断和流行分子病学调查的主要手段。

鸡源大肠杆菌耐药性分析及中药对大肠杆菌耐药性消除作用的研究

研究鸡源大肠杆菌耐药性及中药对大肠杆菌耐药性消除作用。选择22种抗生素采用Kirby-Bauer法对山西省部分地区分离的20株致病性鸡源大肠杆菌进行耐药性检测,对分离菌株进行质粒分析和耐药质粒转化试验,并分析多种中药对大肠杆菌耐药性的消除作用。结果显示,20株试验菌对测试抗生素均存在不同程度的耐药性,其中5耐及5耐以上的菌株占分离菌株的90%,试验菌对青霉素耐药率最高(90%),其次为恩诺沙星(85%),而对黏杆菌素和呋喃妥因的耐药性最低;分离出12种质粒谱型,同一地区、同一鸡场菌株的质粒图谱相同或相似,不同地区菌株的质粒图谱不同,仅有部分相同或相近的流行质粒共存;对其中5株菌株进行耐药质粒的转化试验,发现同一质粒可编码1个至数个耐药性基因,不同质粒可以携带相同的耐药性基因;中药单剂或合剂对大肠杆菌的耐药性有一定的消除作用,其中黄芩的消除效果最好,中药处理后部分菌株质粒图谱无变化,只有黄连和双黄连造成2条质粒带丢失;对中药提取物作用后的消除子进行药敏试验,结果发现大肠杆菌对环丙沙星等多种抗生素恢复了敏感性。研究结果提示联合使用中药治疗鸡源大肠杆菌病有显著效果。

黄曲霉毒素的检测方法研究进展

黄曲霉毒素（aflatoxin，AFT）主要是由黄曲霉和寄生曲霉等真菌产生的一类有毒次生代谢物，毒性极强，主要毒害肝脏，导致肝细胞变性、坏死、出血，引起腹水，肝脾肿大及消化机能障碍。在世界不同地区都发现了这些真菌大量存在于供人类食用的食品中，黄曲霉毒素污染已导致严重的食品安全问题。因此，寻求准确、快速、简便的检测方法，对黄曲霉毒素进行高效的定性，定量分析，

福美双诱导的肉鸡胫骨软骨发育不良软骨细胞凋亡

为研究肉鸡胫骨软骨发育不良(TD)软骨细胞的凋亡分布及凋亡相关基因的表达水平,将80羽1日龄健康AA肉鸡基础日粮饲养1周后,随机分为对照组和处理组,处理组饲喂添加100mg·kg-1福美双的日粮,采用HE染色和TUNEL法分别对肉鸡胫骨生长板软骨细胞的形态学和凋亡情况进行观察,同时采用Real-time PCR方法和免疫组化技术分别对软骨细胞中凋亡相关基因的mRNA转录水平及蛋白质表达水平进行检测。结果显示,福美双诱发TD后第1、2、4和6天,肉鸡生长板软骨栓形成逐渐增大,异常软骨细胞增加,TD病变区软骨细胞,尤其是肥大区软骨细胞凋亡程度明显增加。Real-time PCR检测结果显示,与对照组比较,TD生长板促凋亡基因Bax在试验第1、2、4和6天表达量极显著上调(P<0.01);Caspase-3在第1、2和4天表达量极显著增加(P<0.01);抗凋亡基因BAG-1表达下调,在试验第1和2天差异极显著(P<0.01)。免疫组化结果显示,第1和4天处理组Bax的蛋白表达量明显高于对照组。本研究提示肉鸡TD生长板软骨细胞凋亡与促凋亡基因的表达增强和抗凋亡基因的表达下降有关。

苯并芘(BaP)对鲤鱼肝、肾抗氧化、非特异性免疫能力及组织结构的影响

为探究苯并芘(BaP)对鲤鱼的毒性机制,本研究检测了不同浓度BaP(0、0.1、0.5、1.0μg·L^(-1))暴露对鲤鱼肝、肾组织中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)及非特异性免疫酶溶菌酶(LZM)、酚氧化酶(PO)、酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)活性,以及硝基四氮唑兰(NBT)阳性细胞及肝、肾组织结构的影响。结果表明,1.0μg·L^(-1)BaP暴露30 d后,鲤鱼肝、肾组织SOD活性、MDA含量及肝组织CAT、肾组织GSH活性均显著低于对照组;1.0μg·L^(-1)Ba P暴露的肝、肾组织LZM、AKP和PO活性以及肝组织ACP活性均显著低于对照组;不同浓度Ba P暴露30 d后,鲤鱼NBT阳性细胞数均显著下降,且对肝、肾组织造成不同程度的损伤。相关性分析结果表明,Ba P暴露浓度与肝、肾组织的SOD活性呈负相关,与MDA含量呈正相关,与肝、肾组织的AKP、ACP、PO活性呈负相关,与NBT阳性细胞数呈负相关。综上,水体中Ba P暴露对鲤鱼肝、肾抗氧化和非特异性免疫能力及组织结构产生了一定程度的负面影响,本研究为水体中Ba P的生态毒性效应研究提供了理论参考。

鸡毒支原体胶体金免疫层析试纸条的研制和初步应用

为研制一种用于快速检测鸡毒支原体(MG)的胶体金免疫层析试纸条,采用直径20nm的胶体金颗粒标记纯化的MG多克隆抗体,硝酸纤维素膜检测线和质检线分别喷加纯化的MG多克隆抗体和兔抗鸡IgG抗体,制作胶体金试纸条。试纸条检测MG阳性显示两条红色反应条带;阴性为一条红色反应带。本试纸条可检测到1∶1 280倍稀释的MG抗原,即颜色变化单位为8×104 CCU/mL,具有高度的灵敏性。用试纸条检测衣原体、滑液支原体、猪肺炎支原体、鸡大肠埃希菌和鸡白痢沙门菌等均呈阴性,表明该试纸条具有较好的特异性。对试纸条检测呈MG阳性的38只病鸡进行MG培养验证,所得结果一致;同时对MG培养检测的另外95份病鸡样品进行试纸条测试比对,符合率为96.84%,证明该试纸条具有很高的准确性。该胶体金免疫层析试纸条检测MG操作简单,灵敏度、准确度、特异性等均符合要求,可以用于养殖场批量MG的检测。

马立克病鸡血清生化指标的检测与分析

研究鸡马立克病对血清生化指标的影响,将72只1日龄海兰褐公雏鸡随机分成对照组(C)与攻毒组(V),C组每只鸡腹腔注射0.2mL灭菌Hanks液,V组每只鸡腹腔注射用灭菌Hank’s液稀释20倍的马立克病毒强毒京-1株血毒稀释液0.2mL。分别于3、6、10、15、20、26、35、45、60d对2组各取4只鸡进行心脏采血,剖检,观察病理变化,析出血清,分别采用IFCC速率法、酶法和直接法测定血清中γ-谷氨酰转肽酶(GGT)活性、高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)的含量变化。结果显示,攻毒后血清中GGT活性在35d时明显高于对照组,而其他阶段偏低,且差异不明显;HDL含量低于对照组,15d时差异极显著(P<0.01);LDL含量高于对照组,且15d时差异极显著(P<0.01)。由此提示,鸡血清GGT,HDL与LDL含量变化可作为预测马立克病的重要指标。

肠膜明串珠菌的研究和应用进展

肠膜明串珠菌是乳酸菌中的明串珠菌属的重要菌种。研究证实,肠膜明串珠菌能发酵糖类产生多种酸和醇,具有高产酸能力、抗氧化能力和拮抗致病菌等能力。目前肠膜明串珠菌已被广泛应用于风味剂、血浆代用品,还有望成为新型微生态制剂。

市售生肉的肉品品质检验

从肉品食用的意义出发,阐述了肉品品质高低的重要性,调查了太原市五龙口农贸市场上的生猪肉品,进行了物理学识别来判定其肉品品质,结合了硫酸铜球蛋白沉淀法、过氧化物酶测定实验及微生物毒素呈色反应来最终判定其品质,最后对结果进行了讨论。

仔猪水肿病大肠杆菌的分离鉴定

从各地发生水肿病的仔猪的脏器中分离到36株细菌,通过菌体形态、菌落形态、革兰氏染色特性、生化特性、血清型等一系列的鉴定,确认为大肠埃希氏菌,从而确定了引起仔猪水肿病的主要血清型,为今后的防治提供了依据。动物致病性试验表明,该菌对小鼠有较强的致病性,可引起小鼠死亡。肉汤培养物无菌滤液能致死小鼠且剖检见相关脏器水肿,引起细胞死亡。

马立克病毒强毒感染和疫苗免疫鸡组织病理学变化比较

为研究马立克病毒强毒感染与疫苗免疫鸡组织病理学变化的差异,试验采用108只1日龄海兰褐公雏鸡,随机分为对照组(C组)、马立克病毒CVI988疫苗株腹腔注射免疫组(IA组)和京-1株攻毒组(V组)。在接种后3、6、10、15、20、26、35、45、60d,对3组各取4只鸡进行剖检,分别取肺脏、胸腺、骨骼肌、肾脏、睾丸、肝脏、心肌、腺胃、脾脏、法氏囊、坐骨神经等组织于100mL/L中性福尔马林中固定,石蜡包埋,制备切片,HE染色,光镜下进行组织病理学观察。结果与对照组相比,V组在接种6d时,无明显病理变化,IA组淋巴器官内出现淋巴细胞增多;接种10d后,V组脾脏动脉周围淋巴鞘、淋巴小结内淋巴细胞数量减少;15d后胸腺小体消失,出现肿瘤细胞,其他组织均出现增生性团块,有大小不等的肿瘤细胞;IA组可见脾脏中淋巴细胞增多,动脉周围淋巴鞘脾小结增多,胸腺小体中淋巴细胞增多,其他组织有明显的淋巴细胞浸润。由此可见,鸡感染马立克病毒后免疫器官损伤,各组织器官都出现明显病理学变化;鸡接种疫苗后免疫器官淋巴细胞逐渐增多,但以后也出现免疫器官损伤与其他组织器官淋巴细胞增多,由此表明了CVI988疫苗的免疫毒性,为研究无免疫毒性且有较好免疫力的马立克病疫苗提供理论依据。

高铜的生理功能及其影响

综述了高铜的生理功能的最新研究进展:①抑制肠道病原微生物的生长,促进有益菌的繁殖;②改变了仔猪肠道微观结构;④提高仔猪的采食量;④提高了体内相关酶的活性;⑤促进生长激素的分泌。并对大量在饲料中添加高铜所产生的负面影响做了分析。

致猪水肿病大肠杆菌标准菌株F107/86SLT-ⅡeA基因的克隆与表达

为了克隆与表达致猪水肿病大肠杆菌标准菌株F107/86类志贺毒素Ⅱ型变异体A亚单位(SLT-ⅡeA)基因,试验以F107/86为模板,PCR扩增去掉信号肽的935 bp的SLT-ⅡeA亚单位基因,将其克隆到原核表达载体pGEX-6p-1的EcoRⅠ与SalⅠ位点之间并测序,在大肠杆菌中经IPTG诱导表达,并对表达产物进行SDS-PAGE和Western-blot分析。结果表明:对筛选出的阳性重组质粒pGEX-SLT-ⅡeA-4测序并与GenBank登录的M36727序列比较,证明插入序列及读码框正确;表达产物GST-SLT-ⅡeA经SDS-PAGE分析其大小为58.3 ku;Western-blot检测证实表达产物具有良好的免疫原性。说明试验所构建的原核表达载体可大量表达抗原蛋白。