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地黄轮纹病实时荧光定量PCR方法的建立及应用 被引量:5
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作者 王鑫源 董诚明 +4 位作者 杨林林 高袁浩 侯文川 顾旭鹏 侯庆峰 《中药材》 CAS 北大核心 2022年第3期530-535,共6页
目的:建立一种准确、快速地检测地黄Rehmannia glutinosa Libosch.轮纹病病原真菌草茎点霉Phoma herbarum的实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法。方法:基于GenBank数据库中草茎点霉的基因序列设计草茎点霉的特异性引物,并基于该引物制备重组... 目的:建立一种准确、快速地检测地黄Rehmannia glutinosa Libosch.轮纹病病原真菌草茎点霉Phoma herbarum的实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法。方法:基于GenBank数据库中草茎点霉的基因序列设计草茎点霉的特异性引物,并基于该引物制备重组质粒标准品,以标准品DNA优化qRT-PCR反应体系及构建qRT-PCR标准曲线。采用所设计的qRT-PCR体系及特异性引物,检测草茎点霉回接地黄叶盘后不同时间病原菌数量的动态变化。结果:设计得到的特异性引物PH.F10/PH.R10及所建立的qRT-PCR方法体系特异性强,敏感度高,检测地黄草茎点霉DNA的最低浓度为2.04×10^(-4)ng/μL。接种后24~48 h(Ct值<31.29)时草茎点霉开始侵染地黄,48 h后病情级别调查结果为1级,且随时间延续侵染量逐渐增加。结论:本研究所建立的qRT-PCR方法能对地黄病株中草茎点霉真菌数量进行快速、动态检测,可为地黄轮纹病的早期诊断和动态监测提供技术支持。 展开更多
关键词 地黄轮纹病 草茎点霉 QRT-PCR 动态监测
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基于中红外光谱技术对不同产地地黄的定性及定量分析 被引量:2
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作者 王鑫源 董诚明 +4 位作者 杨林林 高袁浩 顾旭鹏 侯庆峰 任啸 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2022年第8期54-57,I0019-I0021,共7页
目的基于中红外光谱技术建立不同产地地黄的定性和定量模型。方法采集不同产地地黄样品的中红外光谱,高效液相色谱法(HPLC)测定梓醇、毛蕊花糖苷和地黄苷D含量,结合判别分析及逐步多元线性回归法分别建立不同产地地黄样品的定性和定量... 目的基于中红外光谱技术建立不同产地地黄的定性和定量模型。方法采集不同产地地黄样品的中红外光谱,高效液相色谱法(HPLC)测定梓醇、毛蕊花糖苷和地黄苷D含量,结合判别分析及逐步多元线性回归法分别建立不同产地地黄样品的定性和定量分析模型。结果定性分析中,所建立的定性模型能有效区分不同产地地黄样品;定量分析中,建立了地黄梓醇、毛蕊花糖苷及地黄苷D含量的定量模型,经验证,所建模型预测效果良好。结论所建立的定性和定量模型稳定、客观,可为不同产地地黄品质的快速评价提供依据。 展开更多
关键词 地黄 不同产地 中红外光谱 定性定量
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怀地黄“菊花心”性状与化学成分的相关性研究
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作者 宋梦娇 董诚明 +4 位作者 魏悦 高袁浩 任啸 颉颖睿 王素娟 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期1133-1137,共5页
目的探索怀地黄“菊花心”性状与化学成分之间相关性,为怀地黄辨状论质提供数据参考。方法取地黄断面,观察其形成层宽度、射线密度,Photoshop软件测定地黄中菊花心及形成层R(红)、G(绿)、B(蓝);CAD软件测定菊花心与韧皮部面积比值(以下... 目的探索怀地黄“菊花心”性状与化学成分之间相关性,为怀地黄辨状论质提供数据参考。方法取地黄断面,观察其形成层宽度、射线密度,Photoshop软件测定地黄中菊花心及形成层R(红)、G(绿)、B(蓝);CAD软件测定菊花心与韧皮部面积比值(以下均以心皮比表示);HPLC法测定梓醇、益母草苷、地黄苷D、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷、果糖、葡萄糖、棉子糖、蔗糖、水苏糖含量。采用SPSS 26.0软件对其“菊花心”性状与化学成分进行相关性分析。结果地黄形成层RGB均高于菊花心,北京3号RGB值最高,R、G、B值分别为196、185、85;地黄苷D、益母草苷与菊花心、形成层中RGB均值呈显著正相关,相关系数分别为0.515、0.523,与形成层宽度、射线密度呈极显著正相关,相关系数分别为0.887、0.887、0.904、0.904,其他化学成分与“菊花心”性状呈显著负相关或无显著相关性。结论所建立的怀地黄“菊花心”性状分析方法,可以全面概括通过直接观察得到的“菊花心”性状;地黄苷D、益母草苷与菊花心和形成层RGB均值、形成层宽度、射线密度呈相关性,是药材“辨状论质”的具体体现,可为地黄辨状论质提供理论支持。 展开更多
关键词 怀地黄 菊花心 面积比 色泽 相关性
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