骨髓间充质干细胞外泌体减轻海马神经细胞氧糖剥夺再灌注损伤

背景:深低温停循环术后中枢神经系统并发症已经日益成为人们注意的焦点,其核心机制仍是全脑缺血再灌注损伤。目的:探讨骨髓间充质干细胞外泌体对海马神经细胞氧糖剥夺再灌注损伤的保护性作用及其机制。方法:将培养至第7天的海马神经细胞随机分为正常对照组、氧糖剥夺再灌注损伤组及骨髓间充质干细胞外泌体组,后2组进行2 h氧糖剥夺再灌注损伤。造模后,3组海马神经细胞均更换为神经细胞培养基,骨髓间充质干细胞外泌体组加入骨髓间充质干细胞外泌体,正常对照组和氧糖剥夺再灌注损伤组加入等量的PBS溶液。继续培养24 h收集细胞进行Western blot检测,培养48 h进行免疫荧光染色统计海马神经细胞存活率和突起生长情况。结果与结论:①与正常对照组比较,氧糖剥夺再灌注损伤组海马神经细胞存活率明显降低,突起长度及分支数明显受损,促炎因子表达水平显著上升;②与氧糖剥夺再灌注损伤组比较,骨髓间充质干细胞外泌体组神经细胞存活率和突起长度及分支数显著增加,肝细胞生长因子和脑源性神经营养因子表达水平显著增加,促炎症因子表达水平显著下降;③结果提示,骨髓间充质干细胞外泌体能减轻海马神经细胞氧糖剥夺再灌注损伤,其机制可能与抑制促炎因子分泌和促进肝细胞生长因子、脑源性神经营养因子表达有关。

大鼠深低温停循环抑制Akt信号通路影响认知功能

目的:探究大鼠深低温停循环(DHCA)术后脑损伤情况及作用机制。方法:建立大鼠深低温停循环模型,16只SD大鼠随机分成假手术组和DHCA组。再灌注4 h后Western blot法检测海马组织丝氨酸/苏氨酸激酶(Akt)、磷酸化丝氨酸/苏氨酸激酶(p-Akt)、B淋巴细胞瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和活化胱天蛋白酸-3(cleaved caspase-3)表达水平。HE染色及尼氏染色评估术后第7天海马CA1区神经元损伤情况。Morris水迷宫评价大鼠学习记忆、空间感知及运动能力。结果:与假手术组相比,DHCA组海马CA1区p-Akt、Bcl-2的蛋白表达水平降低,Bax、cleaved caspase-3的蛋白表达水平升高(P均<0.05),两组Akt的蛋白表达水平无统计学差异。DHCA组病理评分明显高于假手术组,正常神经细胞数量均明显低于假手术组,大鼠逃避潜伏期、跨越原平台次数及运动速度均明显弱于假手术组(P均<0.05)。结论:DHCA通过抑制Akt信号通路介导神经细胞凋亡,对大鼠认知等功能造成损伤。

缺氧预处理星形胶质细胞外泌体在SD大鼠脊髓神经元氧糖剥夺损伤的保护作用

目的探讨缺氧预处理星形胶质细胞外泌体对脊髓神经元氧糖剥夺损伤的保护作用。方法神经元分为对照组、氧糖剥夺组、星形胶质细胞外泌体组、缺氧预处理星形胶质细胞外泌体组,除对照组外各组均进行神经元的氧糖剥夺,分别给予等体积PBS、正常细胞外泌体、缺氧预处理细胞外泌体,收集细胞,Western blot方法检测Bax、Caspase 3、Bcl-2表达,流式细胞术检测神经元凋亡率。结果神经元氧糖剥夺后,细胞凋亡率明显上升。与氧糖剥夺组相比,进行外泌体处理能明显降低神经元凋亡率及Bax、Caspase 3的表达、增加Bcl-2表达,其中缺氧预处理星形胶质细胞外泌体组保护作用更强。结论星形胶质细胞外泌体在脊髓神经元氧糖剥夺损伤中具有保护作用,缺氧预处理能增强这种保护作用。