维生素K_2对骨髓增生异常综合征细胞株MDS-JSN04生长抑制作用及其机理研究

为了探讨维生素K2(VK2)对骨髓增生异常综合征细胞株MDSJSN04生长的抑制作用及其作用机制,采用细胞形态学方法观察VK2处理后细胞形态的改变;应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测VK2对细胞生长的抑制作用;流式细胞术分析细胞凋亡、细胞周期变化和髓系分化抗原CD11b、CD13的表达情况;RTPCR技术检测抗凋亡基因bcl2、survivin和促凋亡基因bax的表达;用发光比色法检测caspase3活性。结果表明:VK2作用细胞株72小时后,细胞呈现典型的凋亡细胞的形态特征;细胞的凋亡率随着VK2浓度的增加和作用时间的延长而逐渐增高,经统计学处理与对照组比较有显著性差异(P<0.01);S期和G2期细胞随着药物浓度的增加而逐渐减少,G0/G1期细胞逐渐增多,与对照组比较有显著性差异(P<0.01),细胞被阻滞在G0/G1期,而且在G0/G1期前出现明显的亚G1期细胞即凋亡峰;抗凋亡基因bcl2、survivin表达随着VK2浓度的增高而明显下调((P<0.05),而促凋亡基因bax表达无明显变化((P>0.05),caspase3的活性随着VK2浓度的增加和作用时间的延长而逐渐增强。结论:VK2主要是通过激活caspase3途径诱导MDSJSN04细胞发生凋亡,同时抗凋亡基因bcl2和survivin也参与了凋亡调控过程。

重组人粒系集落刺激因子对白血病细胞的作用

作者观察了重组人粒系集落刺激因子（ｒｈＧ－ＣＳＦ）对ＨＬ一６Ｏ细胞和原代培养的急性髓系白血病（ＡＭＬ）细胞的作用，结果显示，ｒｈＧ一ＣＳＦ可刺激白血病细胞生长，并诱导部分ＡＭＬ细胞向粒系分化。提示ｒｈＧ一ＣＳＦ对白血病细胞存在着增殖与分化的双重作用，这种作用对改进白血病治疗可能产生重要影响。

骨髓增生异常综合征骨髓细胞凋亡和TNF-α关系的研究

目的:探讨骨髓增生异常综合征(MDS)骨髓细胞凋亡特征以及与肿瘤坏死因子α(TNF-α)的关系。方法:分别采用形态学和dUTP末端缺口标记(TUNEL)方法检测骨髓细胞凋亡;采用ELISA方法检测骨髓单个核细胞培养后上清液中TNF-α的浓度,并与缺铁性贫血(IDA)患者进行比较。结果:形态学方法检测骨髓单个核细胞培养后细胞凋亡指数,MDS明显高于IDA(P<0.01),MDS各分型(RA/RAS、RAEB/RAEB-t)之间细胞凋亡指数差异无显著性意义(P>0.05)。同一个体TUNEL法测得的骨髓细胞凋亡指数均高于形态学观测的结果。TUNEL检测MDS细胞调亡指数RA/RAS>RAEB/RAEB-t,但差异无显著性意义(P>0.05)。MDS骨髓单个核细胞上清中TNF-α浓度高于IDA组,差异有显著性意义(P<0.05);MDS各分型之间RA/RAS显著高于RAEB/RAEB-t(P<0.05)。结论:MDS骨髓细胞确实凋亡过度,早期MDS重于晚期MDS,并与TNF-α呈线性关系;采用TUNEL法检测凋亡细胞较形态学方法敏感。

维生素K_2诱导人骨髓增生异常综合征细胞株MUTZ-1细胞凋亡机制的研究

为了研究维生素K2(VK2)诱导人骨髓增生异常综合征(MDS)细胞株MUTZ-1细胞凋亡的作用机制,采用流式细胞术Annexin-VFITC/PI双染分析细胞凋亡率和PI染色分析细胞周期的改变,用RT-PCR技术检测抗凋亡基因bcl-2、survivin和促凋亡基因bax的表达,用发光比色法检测caspase-3活性。研究结果显示:细胞的凋亡率随着VK2浓度的增加和作用时间的延长逐渐增高并呈明显的时间浓度依赖性(P<0.05),且随着药物浓度的增加和作用时间的延长S期和G2期细胞逐渐减少(P<0.05),G0/G1期细胞逐渐增多(P<0.01),细胞被阻滞在G0/G1期,并且在G0/G1期前出现明显的亚G1峰,即凋亡峰;抗凋亡基因bcl-2、survivin的表达随着VK2浓度的增高明显下调(P<0.05),而促凋亡基因bax表达无明显变化(P>0.05);caspase-3的活性随着VK2浓度的增加和作用时间的延长而逐渐增强。结论:VK2主要是通过激活caspase-3途径诱导MUTZ-1细胞发生凋亡,同时抗凋亡基因bcl-2、survivin在细胞凋亡过程中也起重要作用。

脂质体阿霉素治疗小鼠淋巴瘤的实验研究

将阿霉素包封在多层脂质体中,治疗小鼠淋巴瘤,证明阿霉素脂质体的疗效显著优干游离阿霉素。游离阿霉素仅对SRS淋巴瘤小鼠的生存期延长l.5倍,而1mg·kg^(-1)脂质体阿霉素则使其生存期延长3倍,其中30d的存活率为100％,60d的存活率为60％。急性LD_(50)结果表明,脂质体阿霉素毒性较游离阿霉素明显减轻。

抗凋亡治疗骨髓增生异常综合征

目的：探讨抗凋亡治疗骨髓增生异常综合征（MDS）的疗效及疗效和骨髓细胞凋亡、TNF-α的关系。方法：采用形态学方法检测骨髓细胞凋亡；ELISA方法检测骨髓单个核细胞（BMMC）培养后上清液中TNF-α浓度。用己酮可可碱、环丙沙星和地塞米松（PCD）联合治疗MDS。结果：抗凋亡治疗MDS有效率48.15％（13/27），1例难治性贫血（RA）完全缓解（3.7％），3例RA（11．1％）血液学三系明显进步。3例PCD联合治疗持续10～54个月的RA，疗效维持10～36个月。抗凋亡治疗有效的患者治疗前TNF-α浓度和骨髓细胞凋亡指数较无效患者高，但这种差异无统计学意义（P〉0．05），有效的患者治疗后的TNF-α和骨髓凋亡细胞指数较治疗前下降。结论：抗凋亡治疗适用于BMMC上清液TNF-α浓度和骨髓凋亡细胞指数较高的MDS患者，尤其适用于低危MDS患者。

白血病患者血清蛋白结合岩藻糖检测及其临床意义

检测28例白血病患者和28名正常人血清蛋白结合岩藻糖(PBF)值,发现急性白血病组血清PBF值明显高于正常对照组,慢粒,慢淋及慢粒急变者PBF值与正常无差异。完全缓解者血清PBF值下降并渐接近正常,复发时PBF值再次升高,提示血清PBF检测可作为观察白血病化疗效果和复发的指标。

脂质体载药降低阿霉素抗SRS淋巴瘤毒性的实验研究

本文将阿霉素包封在多层脂质体中,观察治疗SRS淋巴瘤小鼠的毒性反应。与游离阿霉素比较,脂质体阿霉素能明显降低小鼠的早期死亡率,骨髓抑制作用减轻。通过血液生化检测与心、肝组织的病理观察,结果表明脂质体载药后能明显降低阿霉素治疗SRS淋巴瘤小鼠的毒副作用。

流式细胞仪对人外周血LAK细胞检测的研究

应用流式细胞仪测定14例成人外周血LAK细胞（淋巴因子激活的杀伤细胞）和21例正常成人外周血淋巴细胞的DNA指数（DI），井对细胞增殖周期进行分析。结果显示（1）人外周血LAK细胞的增殖活力明显高于未激活的外周血淋巴细胞；（2）在1～14天培养中，人外周血LAK细胞的增殖活力高，并且稳定；（3）在人外周血LAK细胞中．未找出非整倍体细胞，DI在正常范围。该研究提示：使用人外周血LAK细胞治疗缓解期的急性白血病患者时，LAK细胞不影响流式细胞仪的疗效监测。

脂质体载药提高阿霉素抗淋巴瘤活性的体内外研究

脂质体载药提高阿霉素抗淋巴瘤活性的体内外研究吴开达，范健，高雪芝，金宝翠（南京铁道医学院血液室，普外科．江苏２１０００９）阿霉素是一种抗瘤谱广、活力强．对多种肿瘤有效的强力抗癌剂．但由于其毒性较大而限制了临床广泛应用。脂质体是近年来发展较快的一种药物...

白血病患者IL-2活性水平的定量分析

采用依赖白细胞介导素2(IL-2)的 CTLL-2建株细胞作为检测系统,用人重组 IL-2作对照(参照 NCI 所定的 u/ml),对15例白血病初发期患者、6例缓解期患者和26例正常人的外周血单个核细胞用 PHA-M 刺激,定量测定其 IL-2产量。结果表明:(1)正常人群中 IL-2活性水平为359.6±37.7u/ml;(2)白血病初发期患者 IL-2活性水平为251.5±184u/ml,其中11例低于或接近正常水平,占73%;(3)白血病缓解期患者 IL-2活性水平高于正常人群和初发期患者,为521±316u/ml。以上结果对研究白血病患者的免疫状态和选用适当的治疗方案有实际意义。

急性白血病患者血浆游离氨基酸的变化

氨基酸是体内蛋白质合成前体,又是蛋白质分解代谢产物,所以血浆游离酸(Faa)变化可反映体内蛋白质代谢状况。急性白血病时蛋白质代谢发生紊乱,但其Faa 变化国内很少系统报道。本文检测了26例急性白血病患者血浆Faa 浓度,以探讨其应用价值。材料与方法研究对象:白血病患者均为初治病例,经临床细胞形态学及细胞化学检查确诊,无肝肾疾患;其中急非淋16例,男11例,女5例,年龄24～60岁;急淋10例,男4例,女6例。

白血病与妊娠的现状

发病率国外报道急性白血病在孕妇中的发生率为1.2/10万人,至1990年止已有380例。国内报道发病率较国外高,约28/10万人。合并妊娠的平均年龄为29.5岁,患病时的受孕胎次从第1至12胎不等。妊娠期各类白血病的相对发病率国外报道为:慢性粒细胞白血病(CML)59%,急性粒细胞白血病(AML)23.7%,急性淋巴细胞白血病(ALL)10%,急性单核细胞白血病(AMOL)4.3%,其他3%。白血病合并妊娠者很少见。

白细胞介素2和LAK细胞在白血病临床上的研究进展

近10多年来,随着对白细胞介素2(IL-2)研究的深化,人们发现几乎所有类型白血病患者的IL-2产量和IL-2受体(IL-2R)都明显异常,而且与白血病的发生发展过程、治疗效果及预后密切相关。近来由于淋巴因子活化杀伤细胞(LAK)广泛应用,使白血病的治疗出现新转机。本文就这方面的资料作一介绍。一、IL-2产量多数报道认为,肿瘤患者的IL-2产量和对IL-2的反应性都有不同程度的降低。

脂质体阿霉素治疗SRS淋巴瘤小鼠的心脏病理变化

将阿霉素包封在多层脂质体中,与游离阿霉素比较,观察治疗SRS淋巴瘤小鼠过程中小鼠心脏的病理改变。当剂量均为15mg/kg时,光镜见游离阿霉素治疗组小鼠心肌组织单核细胞浸润,肌细胞肿胀,广泛空泡变性,易见细胞坏死;而脂质体阿霉素组仅见心肌细胞轻度肿胀,少见空泡变性,未见坏死。电镜观察到游离阿霉素组小鼠心肌细胞线粒体肿胀、破裂,肌丝断裂、溶解。而脂质体阿霉素组仅见局灶性肌丝片段丢失。结果表明,脂质体载药能明显降低阿霉素的心脏毒性。

足叶乙甙诱导HL－60急性早幼粒白血病细胞程序化死亡的实验研究

目的：用不同剂量的ＶＰ－１６诱导急性早幼粒白血病细胞程序化死亡（ＰＣＤ）。方法：通过细胞培养技术获取ＰＣＤ细胞，以ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳确定细胞ＰＣＤ的发生，苔盼蓝拒染法检测细胞活力。结果：不同浓度的ＶＰ－１６在试验条件下于４ｈ内均能诱导ＨＬ－６０细胞发生ＰＣＤ。结论：本实验建立的研究细胞ＰＣＤ的方法可靠。

不同浓度 VP_(16)诱导 HL-60 细胞程序化死亡的作用

目的研究ＶＰ１６诱导ＨＬ－６０急性早幼粒白血病细胞程序化死亡。方法用４种不同浓度的ＶＰ１６诱导ＨＬ－６０细胞程序化死亡，ＤＮＡ电泳、电镜及苔盼蓝活细胞拒染试验测定实验结果。结果４种浓度ＶＰ１６均能诱导ＨＬ－６０细胞程序化死亡。结论ＶＰ１６是一种稳定可靠的细胞凋亡诱导剂。苔盼蓝拒染试验不能用于判定细胞是否发生了程序化死亡。ＤＮＡ电泳是确定细胞程序化死亡的简单可靠的方法。

急性白血病患者血浆游离氨基酸的变化

氨基酸是体内蛋白质合成前体,又是蛋白质分解代谢产物,所以血浆游离氨基酸(Faa)变化可反映体内蛋白质代谢状况。急性白血病患者蛋白质代谢发生紊乱,但其血浆游离氨基酸的变化报道较少,我们应用气相色谱分析仪检测了26例急性白血病患者血浆 Faa 浓度,总结如下。1 材料与方法1.1 研究对象

HL-60细胞诱导分化过程中酸性磷酸酶活性的变化

研究结果表明,经 DMSO 诱导的 HL—GO细胞酸性磷酸酶活性升高不到2倍,出现第Ⅰ组同工酶;经 TPA 诱导后 AcP 活性升高4～5倍,并出现Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组同工酶。超微结构观察发现,DMSO 处理的 HL—60细胞 AcP 活性局限在溶酶体及粗面内质网;TIPA 诱导的细胞 AcP 反应在溶酶体、粗面内质网、核周界及高尔基复合体膜囊等处均为阳性。结果提示,HL-60细胞 AcP 酶活性变化,对研究白血病细胞诱导分化有重要意义。