Parkin促进HepG2细胞自噬并抑制星型孢菌素诱导的细胞凋亡

目的观察Parkin在星型孢菌素(staurosporine,STS)诱导的HepG2细胞凋亡及细胞自噬中的作用。方法流式细胞仪检测STS作用前后线粒体膜电位变化;Western blotting检测经STS处理后HepG2细胞caspase3、caspase7、PARP、Parkin/PINK1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值、ATg5、Vps34表达水平;免疫荧光法检测线粒体细胞色素C的释放情况;双荧光mRFP-eGFP-LC3自噬指示系统检测细胞自噬率。在HepG2细胞中过表达重组载体Parkin-flag,经STS处理后,蛋白质印记法检测凋亡蛋白表达变化,双荧光mRFP-eGFP-LC3自噬指示系统检测细胞自噬率改变。结果与对照组相比,STS下调线粒体膜电位并促进细胞色素C释放,同时上调凋亡蛋白cleaved-caspase3、cleaved-caspase7及PARP表达水平。经STS处理后Parkin蛋白表达被抑制,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值及自噬相关蛋白ATg5、Vps34的表达下降。转染mRFP-eGFP-LC3后,STS组自噬体及自噬溶酶体形成明显减少。过表达Parkin后细胞自噬率明显上调,且过表达Parkin明显抑制了STS引起的凋亡蛋白激活。结论Parkin促进HepG2细胞自噬并抑制了STS诱导的细胞凋亡。

杆状病毒IAP重复序列蛋白6对胃癌细胞生物学行为的影响

目的 探讨杆状病毒凋亡抑制蛋白(IAP)重复序列蛋白6(BIRC6)在胃癌细胞的表达情况及其对胃癌细胞恶性生物学行为的影响。方法 采用Western-blot和qRT-PCR检测BIRC6在不同胃癌细胞株中的蛋白和mRNA水平;采用慢病毒载体构建稳定敲减BIRC6的胃癌细胞株BGC823-shRNA-BIRC6和MGC803-shRNA-BIRC6;采用CCK-8法和Edu实验检测细胞增殖能力;采用流式细胞术检测细胞周期变化;采用Transwell侵袭实验检测细胞侵袭水平;采用划痕实验检测细胞迁移能力;采用克隆形成实验检测BIRC6对胃癌细胞克隆形成能力的影响;采用裸鼠皮下成瘤实验检测敲减BIRC6后胃癌细胞在异种移植瘤中的增殖活性。结果 胃癌细胞中BIRC6的蛋白和mRNA水平均呈现高表达。敲减BIRC6可抑制胃癌细胞株BGC823和MGC803的增殖能力,诱导胃癌细胞株BGC823和MGC803阻滞在G2-M期,抑制胃癌细胞增长,同时抑制胃癌细胞株BGC823和MGC803的迁移、侵袭能力,并使胃癌细胞株BGC823的裸鼠皮下成瘤能力明显减弱。结论 BIRC6在促进胃癌发生、发展过程中发挥癌基因的作用,促进胃癌细胞的增殖和远处转移。

HBx通过Wnt/β-catenin通路促进HepG2细胞增殖

目的探讨Wnt/β-catenin通路在稳定表达乙型肝炎病毒x蛋白(HBx)的HepG2肝癌细胞增殖中的作用机制。方法验证前期构建的HepG2/HBx细胞株能稳定表达HBx蛋白。CCK-8法检测HepG2/HBx,HepG2/mock及HepG2 3组细胞增殖情况,RT-PCR及Western-blot法分别检测上述3种细胞中β-catenin mRNA和蛋白表达水平;最后检测β-catenin选择性抑制剂XAV939(20μmol/L)对各组细胞增殖水平的影响。结果前期构建的HepG2/HBx细胞株能稳定表达HBx蛋白。细胞增殖实验表明,HepG2/HBx组细胞增殖能力强于对照组(P<0.05)。RT-PCR及Western-blot检测结果显示,HepG2/HBx组细胞中β-catenin的mRNA及蛋白表达水平均高于对照组(P<0.05),而HepG2/mock及HepG2组细胞之间则无明显差别。XAV939能够抑制各组细胞的增殖能力,HepG2/HBx组细胞在加入20μmol/L XAV939作用后的增殖速度较加入相同浓度DMSO的HepG2/HBx组细胞下降(P<0.05)。XAV939对HepG2/HBx组细胞增殖的抑制强于对照组。结论 HBx蛋白可以上调肝细胞β-catenin表达,激活Wnt/β-catenin通路,促进肝癌细胞增殖。选择性β-catenin抑制剂可部分逆转该作用。

新时期“双师型”教师素质提升与考核评价机制的探索

教师是人类灵魂的工程师,是人类文明的传承者。新时代“双师型”教师不仅要做好知识传授,更要肩负起教书育人、立德树人的时代责任。加强“双师型”师资队伍建设,应坚持党建引领,构建师德建设长效机制;加强制度建设创新,保障教师队伍全面发展;关注个体差异,发挥教师专长,实行分类管理考核;优化“双师型”教师培训体系,提高培训质量;更新“双师型”教师人才库,优化“双师型”师资配置。要通过优化“双师型”教师考核评价办法,促进“双师型”师资队伍发展。

关于发展应用型高校教师教学评价机制的再思考

应用型高校教师的教学评价充分体现应用型和实践性的特征,以实践教学为核心环节,以培养应用型高素质学生为主要目的.目前,应用型本科院校教学评价在评价主体、评价标准、评价方式方法、评价结果等方面出现了一些突出问题.依据应用型高校教学评价的现状和问题,需要建立符合应用实践特点的教师教学评价机制.通过建立多元化主体教学评价整合机制、分类教学评价标准考核机制、专业化评价方法运用机制和教学评价结果信息反馈机制等多方面评价机制,逐步提升应用型高校的教学评价工作.

应用型高校师资队伍建设研究

随着国家高新技术的快速发展及产业结构的转型升级,应用型高技术人才需求量激增,应用型高校应运而生。应用型高校的师资队伍建设情况直接影响着应用型人才培养的水平与质量。通过对应用型高校师资队伍建设现状的分析,提出存在问题、分析成因,并对今后应用型高校师资队伍建设发展提出了建议。

统一战线作用于公共危机管理的路径研究

通过对公共危机管理与统一战线理论的矛盾辨析,寻找统一战线工作与公共危机事件处理在现实需求、发展过程、结构成因等方面的联系,阐述统一战线工作作用于公共危机事件处理的必要性和可行性。同时,基于近年来统一战线工作参与社会治理的实践探索,在提炼经验启示的基础上,探究在处理突发公共危机事件中统一战线工作发挥的积极作用,以期得到化解社会矛盾的对策,维护社会和谐稳定。

探索以“党建+统战”模式做好基层党组织统战工作

党的十八大以来,统一战线工作得到了高度重视,在以习近平同志为核心的党中央的领导下,新时期统一战线工作也逐步进入了新的发展阶段。高校开展统战工作的基本格局已经稳定并有序运转。但面对近几年国内外新形势,党外知识分子、民族、宗教、海外归国人员、新阶层人士等因素相互交织的复杂情况,统战工作的重要性、战略性、紧迫性进一步凸显,如何全面深入地推进统战工作,就需要基层党组织在统战工作中发挥更具体的作用,落实更多的责任。本文将尝试以“党建+统战”的工作模式,为加强基层党组织统战工作探讨提出一种实践路径。