miR-133b-3p对大鼠脑缺血/再灌注损伤的影响及其作用机制

目的:探讨miR-133b-3p对脑缺血/再灌注(I/R)损伤大鼠的影响。方法:将36只雄性SD大鼠随机分为6组,每组6只,分别为假手术组、I/R组、I/R+miR-133b-3p激动剂(agomir)组、I/R+miR-133b-3p抑制剂(antagomir)组、I/R+agomir阴性对照(NC)组、I/R+antagomir NC组。采用实时荧光定量PCR(qPCR)法检测大鼠脑组织miR-133b-3p表达水平,苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠脑组织病理形态变化,原位末端标记(TUNEL)染色检测神经元细胞凋亡,利用DIANA数据库筛选miR-133b-3p的靶基因,通过生物信息学方法对靶基因的上、下游完整调控机制进行分析。结果:与假手术组比较,I/R组大鼠神经行为学评分显著升高(P<0.01),脑组织miR-133b-3p表达水平明显降低(P<0.05);与相应NC组比较,I/R+agomir组行为学评分显著升高,miR-133b-3p表达明显升高,而I/R+antagomir组miR-133b-3p表达显著降低(均P<0.01)。与I/R组比较,I/R+agomir组神经元损伤严重,神经元细胞萎缩,核深染且形状不规则,细胞凋亡率明显升高(P<0.01);相反,I/R+antagomir组神经元损伤少,神经元细胞核染适中且均匀,神经元凋亡率明显降低(P<0.01)。KEGG通路富集分析发现,靶基因主要作用于自噬信号通路和MAPK信号通路等,上游转录因子和激酶富集结果显示miR-133b-3p主要与UBTF和MAPK1等因子相关。结论:miR-133b-3p可能通过调控自噬通路和MAPK信号通路加重大鼠脑I/R损伤,抑制miR-133b-3p表达对大鼠神经元有保护作用。