G-CSF动员自体造血干细胞在大鼠MCAO/R模型分化为神经元样细胞

探讨G GSF动员自体HSCs在大鼠MCAO R模型中分化为神经元样细胞的研究。采用大鼠大脑中动脉栓塞 再灌注 (MCAO R)模型 ,应用粒细胞集落刺激因子 (G GSF) ,促进骨髓造血干细胞 (HSCs)分裂增殖并向靶区“归巢” ,达到动员目的。观察大鼠神经病学评分 ,HE染色和免疫组化法观察病理改变及CD34、巢蛋白 (Nestin)阳性细胞的表达。模型大鼠脑缺血 再灌注后 2 4h时 ,大量淋巴、单核细胞浸润 ,脑缺血区少量Nestin细胞表达 ,无CD34+ 细胞表达。模型动员组 4 8h后 ,脑缺血区尤其是皮层缺血区大量CD34及Nestin阳性细胞表达 ,72h后CD34+ 细胞消失 ,但仍存在大量Nestin阳性细胞 ,且胞突增长 ;模型未动员组各时段未发现CD34+ 细胞 ,且Nestin阳性细胞明显少于动员组。结论 :应用G GSF可动员大鼠自体HSCs并向脑缺血区迁移 ,并可以分化为神经元前体细胞。

动员自体骨髓干细胞促进大鼠急性脑缺血损伤后血管新生的实验研究

目的 探讨应用粒细胞集落刺激因子 (G CSF)动员自体骨髓干细胞对大鼠急性脑缺血 /再灌注损伤后血管新生的影响。方法 采用大鼠大脑中动脉栓塞 /再灌注模型 (MCAO/R) ,应用粒细胞集落刺激因子 (G GSF)动员自体骨髓干细胞 ,观察不同时间大鼠的神经病学评分。应用HE染色和免疫组化方法检测动物模型脑缺血区病理改变、CD34+阳性细胞 ,应用 5 溴脱氧尿核苷 (Brdu)标记新生血管。结果 手术动员组大鼠脑缺血 /再灌注后脑局部缺血组织缺血坏死渐进加重 ,缺血 /再灌注 2 4h ,有大量淋巴细胞、单核细胞浸润 ;48h ,脑组织缺血坏死区可见CD34+阳性细胞 ,并可见新生毛细血管 (Brdu染色阳性 )生成 ;72h后 ,新生毛细血管数目更明显多于手术非动员组。结论 应用G CSF动员自体骨髓干细胞治疗MCAO/R大鼠 。

贝那普利和氯沙坦联合治疗对自发性高血压大鼠左室重构的影响

目的探讨贝那普利和氯沙坦联合应用对自发性高血压大鼠(SHR)左心室重构的作用。方法48只55周龄SHR随机分组(n=12):空白对照组(SHRC)、贝那普利组(SHRB:10mg/kg·d)、氯沙坦组(SHRL:30mg/kg·d)、合用组(SHRB+L:贝那普利10mg/kg·d+氯沙坦15mg/kg·d),另设WKY大鼠为对照组,检测尾动脉压(SBP)。12周后:(1)放射免疫法检测血浆肾素活性(PRA)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、醛固酮(Ald)水平,化学法检测血浆一氧化氮(NO)水平;(2)免疫组化法检测心肌Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维表达;(3)病理及超微结构检测。结果与SHR对照组比较,各药物组尾动脉压显著下降(P<0.01),但用药组间无显著差异(P>0.05);SHR各组间血浆PRA无显著性差异(P>0.05)。SHR对照组血浆AngⅡ低于WKY对照组(P<0.05～0.01),贝那普利组显著降低和氯沙坦组显著升高血浆AngⅡ水平,合用组介于两组之间。与贝那普利组[Ald:(393.9±17.6)pg/mL、NO:(15.2±2.1)μmol/L]、氯沙坦组[Ald:(332.0±17.8)pg/mL、NO:(12.3±1.8)μmol/L]比较,合用组[Ald:(302.4±15.5)pg/mL、NO:(16.5±2.4)μmol/L]更显著的降低血浆Ald和升高NO水平(P<0.01);与贝那普利组(Ⅰ型胶原:6.09±1.12%、Ⅲ型胶原:9.0%±1.2%)、氯沙坦组(Ⅰ型胶原:4.3%±0.7%、Ⅲ型胶原:8.0%±1.3%)比较,合用组(Ⅰ型胶原:2.8%±0.7%、Ⅲ型胶原:6.5%±1.0%)更显著的降低心肌Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维的表达(P<0.01);组织病理及电镜显示,合用组更显著的改善SHR左心室重构。结论贝那普利和氯沙坦均能有效的改善高血压左室重构,二者合用时更为明显。

动员自体骨髓干细胞对大鼠脑缺血/再灌注损伤及细胞凋亡的影响

目的 探讨应用G CSF动员自体骨髓干细胞对大鼠脑缺血 /再灌注损伤及细胞凋亡的影响。 方法 应用线栓法制备大鼠局灶性大脑中动脉栓塞 /再灌注 (MCAO/R)模型 ,应用粒细胞集落刺激因子 (G GSF)刺激自体骨髓干细胞分裂增殖 ,并用 5 溴脱氧尿核苷 (Brdu)标记。观察大鼠神经病学评分 ,HE染色和免疫组化检测脑缺血区病理改变及CD34和Brdu阳性细胞 ,原位末端标记法 (TUNEL法 )观察细胞凋亡。 结果 模型动员组大鼠脑缺血 /再灌注后 2 4h ,大量炎症细胞浸润。再灌注后 4 8h ,缺血区可见CD34和Brdu阳性细胞 ;72h后CD34阳性细胞消失 ,而Brdu阳性细胞持续存在 ;模型未动员组缺血区无CD34和很少Brdu阳性细胞表达。 4 8h缺血区新生毛细血管密度明显高于对照组。再灌注后 2 4h细胞凋亡显著 ,1周时达高峰 ;与模型非动员组比较 ,模型动员组 4 8h后细胞凋亡改善明显。结论 自体骨髓干细胞经G CSF动员后可向大鼠脑缺血区趋化并可分化为神经元前体细胞 ,显著促进脑缺血区血管再生 ,降低脑神经功能评分 ,降低细胞凋亡率。

冠心病患者抗凝系统改变与中医证型关系

本研究应用凝血酶凝胶空斑法、火箭电泳法测定了４６例冠心病患者及４０例健康人的血浆抗凝血酶Ⅲ活性（ＡＴⅢ：Ａ）、抗凝血酶Ⅲ抗原（ＡＴⅢ：Ａｇ）、蛋白Ｃ抗原（ＰＣ：Ａｇ）、总蛋白Ｓ抗原（ＴＰＳ：Ａｇ）、游离蛋白Ｓ抗原（ＦＰＳ：Ａｇ）的水平。结果表明：冠心病气滞型ＰＣ：Ａｇ、ＴＰＳ：Ａｇ显著高于正常对照组（Ｐ均＜０．０５），血瘀型ＡＴⅢ：Ａｇ、ＡＴⅢ：Ａ显著低于正常对照组（Ｐ均＜０．０５），提示ＰＣ：Ａｇ、ＴＰＳ：Ａｇ可作为气滞型的参考指标，ＡＴⅢ：Ａｇ、ＡＴⅢ：Ａ可作为血瘀型的参考指标。

复方丹参滴丸对急性心肌梗塞病人血清肌钙蛋白T影响

为探讨复方丹参滴丸对急性心肌梗塞（ＡＭＩ）病人血清肌钙蛋白Ｔ（ＴｎＴ）浓度的影响，观察了２８例ＡＭＩ病人给予复方丹参滴丸治疗后血清ＴｎＴ浓度的动态变化，并与常规西药治疗比较。结果表明复方丹参滴丸组血清ＴｎＴ浓度峰值明显下降（Ｐ＜０．０１），ＴｎＴ升高持续时间及恢复正常时间均明显缩短（Ｐ＜０．０５，０．０５），提示复方丹参滴丸对心肌具有明显的保护作用。

老年原发性高血压患者血压控制与血浆BNP、ET-1含量的关系

目的 探讨老年原发性高血压患者经药物治疗后血脑利钠肽 (BNP)、内皮素 - 1(ET- 1)含量与血压控制情况的关系。方法 测定 5 6例经药物治疗后老年原发性高血压患者的血浆 BNP、ET- 1含量。结果 血压控制正常组血浆 BNP和 ET- 1含量均显著低于血压控制不理想组 (分别为 P<0 .0 5和 P<0 .0 1)。结论 血浆BNP、ET- l的含量能反映老年原发性高血压患者的血压控制情况 。

急性下壁心梗心电图胸前导联ST段下降与冠状动脉造影的关系

目的 :探讨急性下壁心肌梗死 (AIMI)时心电图胸前导联ST段下降的临床意义。方法 :对 32例AIMI患者的心电图是否有胸前导联ST段下降与心功能分级和冠状动脉造影资料进行对比分析。结果 :心电图胸前导联ST段下降与合并左前降支 (LAD)病变组与不合并左前降支 (LAD)病变组 ,经统计学处理无显著性差异 (P >0 .0 5 )。心功能Ⅱ～Ⅳ级在心电图胸前导联ST段下降组明显高于无胸前导联ST段下降组 ,经统计学处理有显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论 :AIMI时心电图胸前导联ST段下降与左前降支 (LAD)病变存在与否无关 。

自体骨髓干细胞动员治疗心脑缺血损伤的进展

随着对骨髓干细胞研究应用的不断深入,干细胞在应用于治疗心脑缺血损伤方面引起越来越多的关注,本文主要介绍自体骨髓干细胞动员尤其是造血干细胞动员在该方面的研究进展。

胆固醇抑制、癌症与化疗

恶性肿瘤形成的一个重要特征是调节胆固醇合成的反馈抑制机制消失.癌细胞的生长需要高浓度胆固醇及其前身物质.因此一个合理的假说:通过限制摄入胆固醇或抑制胆固醇的合成预防癌细胞的增长.体外及细胞培养实验表明,低血清胆固醇或应用HMG-CoA还原酶抑制剂干扰甲羟戊酸途径来减慢肿瘤生长.现在通过口服或通过埋入灌输泵间断地给予HGM-CoA还原酶抑制剂,能够取得这些药物治疗肿瘤的组织浓度.假若胆固醇抑制能够抑制肿瘤细胞的生长,可将其作为肿瘤化疗的辅助治疗,并且可能对癌肿有预防作用.

氯沙坦对动脉粥样硬化兔的MCP-1及基因表达的实验研究

为了探讨血管紧张素Ⅱ的Ⅰ型受体(AT1R)拮抗剂氯沙坦(Losartan)的抗动脉粥样硬化(AS)作用及观察其是否能抑制单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的蛋白及基因表达,我们通过高脂饮食及内皮损伤术建立兔AS模型,一组用Losartan(25mg/kg/d),另一组不用,喂养4个月,观察血管内膜的变化;同时做免疫组化及原位杂交,分别观察MCP-1蛋白及基因的表达。结果发现Losartan治疗组兔主动脉内膜面积及内、中膜面积之比均小于未治疗组,其MCP-1的蛋白及mRNA的表达亦明显减少,表明Losartan可通过抑制MCP-1的产生而具有抗AS作用。

胰岛素抵抗大鼠认知功能的变化及其脑组织Alzheimer样病变

目的研究胰岛素抵抗大鼠(IR)认知功能的变化及其脑组织胆碱乙酰转移酶(ChAT)的活性、β-淀粉样(Aβ42)、P-Tau(ser396)、淀粉样前体蛋白(APP),β-分泌酶(BACE1)及早老素(PS1)的表达,探讨胰岛素抵抗在阿尔茨海默病(AD)中可能的作用机制。方法从25只Wistar雄性大鼠中随机选取10只作为正常对照组(NC),以普通标准饲料+自来水喂养;余15只为模型组以普通标准饲料+10%果糖水连续喂养12周后筛选出IR大鼠13只;12周末用Morris水迷宫试验测定各组大鼠认知功能行为学改变,放免法检测血浆胰岛素水平,葡萄糖氧化酶法检测血浆葡萄糖水平,化学比色法测定ChAT的活性,免疫组化法检测APP、Aβ42,蛋白印迹法检测BACE1,PS1及P-Tau(ser396)蛋白表达水平。结果 IR组大鼠逃避潜伏期较NC组明显延长(P<0.01);IR组血浆血糖、胰岛素水平及运用HOMA-IR计算的胰岛素抵抗指数均显著高于NC组(P<0.01);IR组ChAT的活性较NC组明显降低(P<0.01);与NC组相比,IR组APP、Aβ42平均光密度值明显升高,组间差异有统计学意义(P<0.01);IR组大鼠脑组织中BACE1,PS1及P-tau(ser396)蛋白表达水平较NC组显著增高(P<0.01)。结论胰岛素抵抗大鼠认知功能受损,其程度与ChAT的活性相关;胰岛素抵抗通过上调BACE1,PS1的活性,使Aβ生成增加,同时P-Tau蛋白表达增加,从而可能参与类AD病变的发生。

糖基化终末产物对人神经母细胞瘤细胞APP表达及Aβ生成的影响

目的通过研究糖基化终末产物(AGEs-BSA)以及阻断其与特异性受体RAGE的结合对培养的人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein,APP)的表达以及β淀粉样蛋白(β-amyloid,Aβ)生成的影响。方法以培养的SH-SY5Y细胞为模型,将细胞随机分为4组,空白对照组、BSA组、AGEs-BSA组、AGEs-BSA+抗RAGE中和抗体组。用MTT法观察细胞形态以及确定AGEs-BSA的最佳干预时间及浓度。用免疫细胞化学方法及免疫印迹方法来检测各组细胞内APP、RAGE表达和Aβ生成情况。结果不同蛋白浓度的BSA处理细胞24、48、72h,与空白对照组比较细胞MTT代谢率,APP、RAGE及Aβ的表达水平没有明显差异,(P>0.05);不同蛋白浓度的AGEs-BSA(>50μg/ml)处理细胞与BSA组比较,细胞MTT代谢率明显降低,并随蛋白浓度升高差异越明显,APP、RAGE、Aβ的表达水平较BSA组明显增加(P<0.05),预先用抗RAGE中和抗体(1∶100)1h后再加入AGEs-BSA,APP、Aβ的表达水平较AGEs-BSA组明显减少(P<0.05),但仍高于BSA组(P<0.05)。结论糖基化终末产物能够促使SH-SY5Y细胞中APP、RAGE、Aβ的表达和生成增加。通过阻断其与特异性受体RAGE的结合可以部分减少APP、Aβ的表达和生成。

糖基化终末产物促SH-SY5Y细胞β-淀粉样蛋白生成及相关机制

目的通过研究糖基化终末产物(AGEs-BSA)对培养的人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y细胞)β-淀粉样蛋白(Aβ)的生成,以及淀粉样前体蛋白(APP)及相关酶—β-分泌酶(BACE1)、γ-分泌酶(PS1)的表达的影响,在体外水平探讨AGEs-BSA在阿尔茨海默病(AD)发病中的作用及其可能的机制。方法以培养的SH-SY5Y细胞为模型,将细胞随机分为4组。用MTT实验得到的AGEs-BSA最佳干预时间及浓度干预细胞,用免疫细胞化学方法及ELISA方法观察及检测各组细胞内Aβ1-40、Aβ1-42表达,用免疫印迹法检测各组细胞内APP、BACE1、PS1变化。结果 BSA组与空白对照组相比APP、BACE1、PS1、Aβ的表达无明显差异(P>0.05);AGEs-BSA组与BSA组相比APP、BACE1、PS1、Aβ的表达明显增加(P<0.05);AGEs-BSA+抗RAGE中和抗体组APP、BACE1、PS1、Aβ的表达较单纯AGEs-BSA组明显减少(P<0.05),但仍高于BSA组(P<0.05)。结论 糖基化终末产物能够促使SH-SY5Y细胞中APP的表达增加,并通过上调BACE1、PS1的活性使Aβ生成增加。通过阻断其与特异性受体RAGE的结合可以部分减少APP、BACE1、PS1及Aβ的表达和生成。